补肾生血法对化疗后骨髓抑制小鼠造血生长因子GM-CSF,EPO, TPO mRNA表达的影响

目的探讨补肾生血(BSSX)法对化疗后骨髓抑制小鼠造血生长因子基因表达的影响,明确其改善骨髓抑制的机制。方法 60只雄性昆明小鼠随机分为6组,即空白对照组,模型对照组,阳性对照组,BSSX高、中、低剂组。除空白对照组外,其余组均连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(CTX,50 mg·kg~(-1))1次,制备化疗后骨髓抑制模型。造模完成次日,阳性对照组皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF,30μg·kg~(-1)),BSSX高、中、低剂组分别按16 g·kg~(-1)、8 g·kg~(-1)、4 g·kg~(-1)给予左归丸联合当归补血丸,均每日1次,连续9d。造模前后记录小鼠体重,并观测外周血白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)、血小板计数(PLT)变化,以评价造模成功与否。用药结束后,采用实时荧光定量PCR检测小鼠骨髓细胞中粒-单细胞集落刺激因子(GM-CSF)、促红细胞生成素(EPO)、血小板生成素(TPO)mRNA表达水平。结果造模前各组小鼠体重、外周血WBC、RBC、HGB、PLT值无明显差异(均P0.05),提示组间具有可比性。造模后注射CTX的小鼠体重、WBC、RBC、HGB明显低于正常小鼠(均P0.01),提示模型复制成功。用药干预9d后,模型对照组小鼠骨髓细胞中GM-CSF、EPO、TPO mRNA表达水平明显低于空白对照组(均P0.01);与模型对照组比较,阳性对照组GM-CSF、EPO mRNA表达水平明显升高(分别P0.01、P0.05),BSSX高剂组GM-CSF、EPO、TPO mRNA表达水平也明显升高(分别P0.01、P0.01、P0.05);在上调GM-CSF、EPO、TPO mRNA表达方面,BSSX高剂组与阳性对照组无明显差异(均P0.05)。结论补肾生血法改善化疗后骨髓抑制的机制与上调骨髓细胞造血生长因子GM-CSF、EPO、TPO mRNA表达有密切关系。     

微小RNA-148a-3p靶向调控MAP3K9表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-148a-3p（miR-148a-3p）对丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9（MAP3K9）的靶向调控作用及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 向对数生长期胃癌细胞株MGC-803转染miR-148a-3p模拟物（mimics组）和阴性对照（NC组），以未转染的MGC-803细胞为对照组；采用实时定量PCR（QPCR）检测各组miR-148a-3p水平以评价转染效率，MTT法检测各组细胞增殖能力，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况，分别采用QPCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3及MAP3K9 mRNA和蛋白水平，同时采用双荧光素酶报告实验验证miR-148a-3p与MAP3K9的靶向作用关系。结果 QPCR结果显示，对照组、NC组和mimics组的miR-148a-3p水平分别为1.021±0.123、1.087±0.196和2.854±0.368，与对照组和NC组比较，mimics组的miR-148a-3p水平升高（P＜0.05）。mimics组MGC-803细胞的增殖活力较其余两组减弱（P＜0.05）。mimics组MGC-803细胞凋亡率为（15.2±1.6）％，高于对照组的（3.5±0.9％）％和NC组的（4.5±1.1）％，差异具有统计学意义（P＜0.05）。与对照组和NC组比较，mimics组的MAP3K9和Bcl-2的mRNA和蛋白水平均下调，而Bax和caspase-3的mRNA和蛋白水平均上调（P＜0.05）；双荧光素酶报告实验证实MAP3K9是miR-148a-3p的直接作用靶点。结论 MiR-148a-3p可抑制胃癌细胞MGC-803的增殖并诱导其凋亡，可能通过靶向MAP3K9来发挥抑癌作用，调控miR-148a-3p／MAP3K9轴在胃癌防治中有一定应用前景。     

骨科外固定支具结合数控压力充气泵预防下肢深静脉血栓的临床效果

目的观察骨科外固定支具结合数控压力充气泵预防下肢深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)的临床效果。方法随机选取我科于2015-01-2016-01手术的患者86例,采用随机数字表法分为观察组与对照组各43例,观察组给予外固定支具结合数控压力充气泵的一体式器械治疗,对照组患给予低分子肝素治疗,对比两组患者DVT发生情况。结果①观察组患者术后的DVT发生率为2.33%,显著低于对照组的18.60%,差异有统计学意义(P0.05);且预防下肢深静脉血栓的临床效果显著优于对照组(P0.05)。②观察组患者术后的Lysholm及Lysholm不稳评分均显著优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。③术后引流量、肢体肿胀程度、凝血综合指数、治疗时间等指标对比,观察组均显著优于对照组(P0.05)。结论采用外固定支具结合数控压力充气泵的一体式器械预防骨科手术患者DVT,可达到良好的预防效果,显著减少DVT发生率,值得推广使用。     

大鼠脑缺血再灌注损伤后HMG-COA还原酶抑制剂下调Caveolin-1表达对血脑屏障的影响

目的采用线栓法构建大鼠的中动脉缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,应用不同剂量辛伐他汀(HMG-COA reductase inhibitor)下调Caveolin-1表达,研究被不同程度抑制的Caceolin-1对BBB的作用。方法 160只雄性SD大鼠分成高、中、低剂量的辛伐他汀预处理组,同等剂量生理盐水缺血组及假手术组。预处理及生理盐水组连续灌胃给药7 d,最后一次灌胃3 h后建立MCAO,缺血2 h后抽出线栓再灌,假手术组仅结扎颈外动脉。手术24 h后进行神经功能评分,取脑分别进行TTC染色检测脑梗死体积、干湿质量法测量脑含水量、分光光度计测OD值测量伊文思蓝渗出、免疫组化法及蛋白印记杂交检测Caveolin-1的表达。结果神经功能评分结果显示,全部辛伐他汀组明显优于生理盐水组(P0.05);TTC染色示,低剂量及中剂量预处理组梗死体积百分比明显小于生理盐水缺血组(P0.01),高剂量组未见优势,各预处理组两两比较,低及中剂量组梗死体积小于高剂量组(P0.05);干湿质量百分率测定预处理组湿质量明显小于生理盐水缺血组(P0.05),且各预处理组间两两比较发现中剂量组湿质量小于高剂量组(P0.05);分光光度计测伊文思蓝渗透OD值结果,各给药组伊文思蓝渗透水平均低于生理盐水缺血组(P0.05),各预处理组两两比较,低剂量组优于中及高剂量组且中剂量组优于高剂量组(P0.05);Western Blot定量分析结果显示,各预处理组Caceolin-1表达水平均低于生理盐水缺血组(P0.05),各给药组两两比较发现,随剂量增加Caveolin-1被降低水平增加即低剂量组中剂量组高剂量组(P0.05);免疫组化示,Caveolin-1蛋白在各组大鼠脑组织中均沿微血管阳性表达,免疫组化染色半定量测量分布于血管内皮的Caveolin-1表达,除中与高剂量间差异无统计学意义(P0.05)外,与Western Blot分析结果大概一致。结论大鼠MCAO再灌注模型中Caveolin-1蛋白的表达量会增加。辛伐他汀的预处理可以有效抑制Caveolin-1的表达,适当剂量辛伐他汀可以通过抑制Caveolin-1表达保护血脑屏障完整,但过高或过低水平Caveolin-1蛋白都会破坏血脑屏障增大梗死的体积。     

局部晚期鼻咽癌患者外周血淋巴细胞和单核细胞比例与预后的相关性

目的:回顾性分析局部晚期鼻咽癌患者外周血中淋巴细胞与单核细胞比例（lymphocyte-to-monocyte ratio,LMR)与预后的相关性。方法:收集既往接受同期放化疗的219例Ⅲ/Ⅳa，b期（AJCC第7版分期）鼻咽癌患者，采用外周血中LMR中位值4.31作为阈值来对所有患者进行分层。Log-rank检验对生存结果进行分析。主要生存终点为无进展生存率（PFS）。结果:低LMR值组（<4.31）与更差的T分期(P=0.038)、N分期(P=0.004)、临床分期(P=0.005)、EBV DNA(P=0.000)和死亡(P=0.050)相关。低LMR值组（<4.31）与高LMR值组（≥4.31）患者4年PFS分别为68.2%vs 77.8%（P=0.048）。Cox风险模型多因素分析显示影响PFS的预后因素为N分期（HR=3.27，95%CI=1.72~5.27；P=0.032）、临床分期（HR=1.72，95%CI=1.08~2.43；P=0.001）和EBV DNA（HR=3.55，95%CI=2.50~7.53；P<0.001），而LMR（HR=0.43，95%CI=0.37~1.05；P=0.057）不是独立的预后因素。结论:LMR值下降提示鼻咽癌患者更晚的分期和更差的预后，但对生存的总体预测作用低于传统的AJCC分期和EBV DNA。     

单孔腹腔镜子宫腺肌病病灶大部切除术临床应用

目的探讨单孔腹腔镜子宫腺肌病病灶大部切除术的可行性与安全性。 方法回顾性分析2018年3月至2020年6月在南京医科大学附属常州第二人民医院妇科接受单孔腹腔镜下子宫腺肌病病灶切除术＋子宫成形术的7例患者的临床资料并进行总结分析。 结果接受经脐单孔腹腔镜子宫腺肌病病灶大部切除术＋子宫成形术的7例患者手术均成功，术中未增加其他手术切口，无一例中转开腹手术。发生术中并发症的共2例，程度均较轻，术中及时给予相应处理，术后密切观察，恢复良好。所有患者术后恢复良好，均顺利出院，对切口愈合后的美容效果满意度高。出院后随访发现患者月经量明显减少，痛经症状明显改善，生存质量均显著提高。 结论严格把握手术适应证的情况下，单孔腹腔镜子宫腺肌病病灶大部切除术可能是安全、可行的。     

甲状腺抗体水平与急性缺血性卒中患者颈动脉粥样硬化斑块的相关性

目的 探讨血清甲状腺抗体水平与急性缺血性卒中患者颈动脉粥样硬化斑块的相关性.方法 回顾性纳入连续的急性缺血性卒中患者.根据颈部动脉彩超结果分为无斑块组和斑块组,斑块组再分为稳定斑块组和不稳定斑块组.应用化学发光法测定各组血清抗甲状腺过氧化物酶抗体(thyroidperoxidase antibody,TPOAb)和抗甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)水平并进行比较.结果 共纳入383例急性缺血性卒中患者,116例(30.3％)无斑块,267例(69.7％)存在斑块,其中68例为稳定斑块,199例为不稳定斑块.斑块组血清TGAb水平显著高于无斑块组(Z=-4.826,P＜0.001).多变量logistic回归分析显示,TGAb水平可能是颈动脉斑块的独立危险因素(优势比1.007,95％可信区间1.001 ～ 1.012;P=0.016).稳定斑块组血清TPOAb水平显著高于不稳定斑块组(Z=-2.114,P=0.035),但多变量logistic回归分析显示其并非不稳定斑块的独立危险因素(优势比1.001,95％可信区间0.996 ～1.006;P =0.786).结论 急性缺血性卒中患者血清甲状腺抗体升高,尤其是TGAb水平升高可能与颈动脉粥样硬化斑块的发生和发展相关,但与斑块稳定性无关.