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目的:探讨建立一种新型的脂肪变性HepG2细胞模型的方法,并对细胞线粒体能量代谢障碍程度进行评价。方法予25%的胎牛血清和0.1%的医用脂肪乳DMEM培养基初步诱导12 h后,进一步予油酸和棕榈酸组成的0.1 mmol/L游离脂肪酸( FFA) DMEM培养基再次诱导12 h,建立脂肪变性HepG2细胞模型,并以无血清DMEM培养基作为对照比较。诱导成功后,采用油红O染色观察细胞内脂滴沉积状况,并用全自动生化仪检测细胞上清液丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶含量和细胞内三酰甘油( TG)含量;采用流式细胞仪测定细胞内活性氧( ROS)和线粒体膜电位的变化,采用磷钼酸比色法测定细胞内三磷酸腺苷( ATP)含量,综合评测脂肪变性细胞线粒体能量代谢障碍的程度。结果与对照组比较,模型组细胞内橘红色脂滴大量形成,且TG和ROS含量明显增高(P<0.01),而线粒体膜电位及细胞内ATP含量显著降低(P<0.01)。结论采用25%胎牛血清、0.1%中/长链脂肪乳和0.1 mmol/L FFA分阶段诱导HepG2细胞,可以成功在体外建立脂肪变性细胞模型,该模型会引起细胞线粒体能量代谢紊乱,与非酒精性脂肪性肝病临床发病机制存在相似性。 相似文献
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目的 观察三七总皂甙(PNS)对脂肪变性L02肝细胞内甘油三酯(TG)含量及解耦联蛋白2(UCP2)mRNA表达的影响及机制.方法 采用50%小牛血清诱导L02肝细胞48 h建立肝细胞脂肪变性模型,采用MTT法测定PNS作用于脂肪变性肝细胞的适宜浓度,随后将其分为5组,模型组、自然恢复组、PNS低剂量组(10 μg/ml)、PNS高剂量组(50 μg/ml),并设正常组.药物作用24 h后,油红O染色观察肝细胞内脂滴变化,全自动生化仪检测肝细胞内TG含量,运用RT-PCR法检测肝细胞内UCP2 mRNA的表达.结果 与正常组比较,油红O染色示模型组肝细胞内橘红色脂滴明显增加,并出现脂滴融合现象,模型组TG含量明显升高(P<0.01).PNS治疗24 h后,PNS各治疗组与自然恢复组比较,肝细胞内TG含量均明显减少(P<0.05),以低剂量组下降更为显著(P<0.01);油红O染色显示,PNS低剂量组肝细胞内脂滴数减少最为明显.与正常组比较,模型组肝细胞UCP2 mRNA的表达明显上调(P<0.01);与自然恢复组比较,PNS各治疗组肝细胞UCP2 mRNA的表达量均有下降,以高剂量组下降具有显著性差异(P<0.05).结论 PNS能显著降低脂肪变性肝细胞内TG含量,减轻肝细胞脂肪变性.UCP2 mRNA的高表达与肝细胞脂肪蓄积密切相关,PNS可能是通过下调UCP2 mRNA的表达来改善肝细胞的脂肪变性. 相似文献
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雷火灸对含铂类药物化疗所致消化道反应25例 总被引:6,自引:1,他引:5
目的:观察雷火灸对含铂类药物化疗所致消化道的临床反应。方法:雷火灸的成分:沉香、木香、乳香、茵陈、羌活、干姜、穿山甲各9g,麝香少许、纯净艾绒。灸神阙穴至上脘穴,上脘穴至天突穴等。结果:对化疗引起恶心、呕吐有显著疗效,自身前后对照P<0.05。结论:雷火灸施灸部位选用腹部任脉穴位及胃经、脾经,起到和脾胃、调中焦,降呕逆,同时调补脾肾。可使药物借助灸火的热力,通过经络腧穴的作用,综合达到益气助阳,温散寒邪,健脾温肾的功效。 相似文献
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目的:观察复方苦参注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法:常规体外培养人鼻咽癌CNE-2细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度复方苦参注射液分别处理CNE-2细胞24、48和72 h后时细胞增殖抑制率,计算复方苦参注射液对CNE-2细胞的半数抑制浓度(IC50)。CNE-2细胞分为对照组(不照射、不给药)、放射组(给予剂量为2和4 GyX射线照射)和联合组(给予不同浓度复方苦参注射液处理后再接受X射线照射)。MTT法检测各组CNE-2细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组CNE-2细胞凋亡率,克隆形成试验检测各组CNE-2细胞存活率。结果:不同浓度复方苦参注射液处理CNE-2细胞24、48和72 h后,细胞增殖抑制率较未经复方苦参注射液处理的CNE-2细胞升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;复方苦参注射液处理48 h时细胞增殖抑制率高于24 h时(P<0.05)。放射组CNE-2细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),联合组CNE-2细胞凋亡率较放射组升高(P<0.05);联合组CNE-2细胞存活率低于放射组(P<0.05)。结论:复方苦参注射液能促进放射线诱导的鼻咽癌CNE-2细胞凋亡,从而对CNE-2细胞具有放射增敏作用。 相似文献
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目的: 观察柴胡疏肝散对高脂饮食建立的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织脂质代谢和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/sirtuin 1(SIRT1)通路相关蛋白的影响。方法: 选用SPF级SD大鼠24只,随机分为正常(NC)组、高脂(HFD)组和柴胡疏肝散(CSP)组,每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型,用药组大鼠同时灌服柴胡疏肝散浸膏剂(9.6 g·kg-1·d-1)进行干预,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清和肝匀浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)以及血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)含量;HE染色观察肝组织病理损伤变化;油红O染色观察肝组织脂质蓄积程度,透射电镜观察肝细胞内超微结构变化;Western blot法检测肝组织AMPK、磷酸化AMPK(pAMPK)、SIRT1和解偶联蛋白2(UCP2)的蛋白水平。结果: 大鼠肝组织HE染色、油红O染色和电镜结果证实肝细胞脂质蓄积严重,提示NAFLD大鼠模型建立成功。与NC组比较,HFD组血清和肝组织匀浆TC、TG含量显著升高(P < 0.01),血清AST含量显著升高(P < 0.01),肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著降低(P < 0.01),UCP2蛋白水平显著升高(P < 0.01);与HFD组比较,CSP组大鼠肝组织脂质蓄积程度明显改善,血清和肝匀浆TC和TG含量呈下降趋势,其中肝匀浆TC和TG含量下降显著(P < 0.05),血清AST含量显著降低(P < 0.05),肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05),UCP2蛋白水平显著下调(P < 0.01),但各组大鼠总AMPK蛋白水平差异无统计学显著性。结论: 柴胡疏肝散能够改善16周高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与其激活AMPK/SIRT1通路有关。 相似文献
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目的:为了进一步说明在鼻咽癌放疗过程中使用金麦喷喉方药剂对临床不良反应有削减效果。方法:放射线科治疗过的鼻咽癌患者100例。将其分为对比组和治疗组,每组50例,对比组采用庆大霉素合剂喷喉,治疗组采用金麦喷喉方喷喉,对比两组患者用药后放射性急性口咽黏膜脉滴注不良反应的削减效果,口腔黏膜反应等级,不良反应发生率等情况。结果:治疗组用药后对鼻咽癌放疗过程中所产生不良反应的削减效果要明显优于对比组中的用药效果,治疗后对比组中有一级反应症状的患者9例,有二级反应症状的患者16例,有三级反应症状的患者19例,有四级反应症状的患者6例;治疗组中有一级反应症状的患者14例,有二级反应症状的患者20例,有三级反应症状的患者13例,有四级反应症状的患者3例。另外,治疗组患者在用药后食欲情况、口舌干燥情况、咽喉疼痛情况、口腔溃烂情况以及便体秘结情况的改善均要优于对比组。两组对比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在鼻咽癌的放疗过程中使用金麦喷喉方药剂,具有十分理想的防治不良反应效果,能够有效地减少口腔以及咽喉部位不良反应发生率,有正面影响,无药物不良反应和用药反应,在临床治疗过程中可大力推广。 相似文献
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目的探讨局部中晚期鼻咽癌组织DNA修复基因ERCC1、hMLH1的蛋白表达水平与调强放疗(IMRT)治疗敏感性的关系。方法纳入50例局部中晚期鼻咽癌初治患者,应用免疫组化检测在接受IMRT前ERCC1、hMLH1蛋白的表达情况,分析ERCC1、hMLH1表达水平与鼻咽癌临床特征、IMRT疗效的相互关系,及其对鼻咽癌患者接受IMRT后生存期的影响。结果 ERCC1、hMLH1表达水平与复发、转移有关,复发、转移组的ERCC1、hMLH1阳性表达率明显低于无复发、转移组(2=6.649、2=5.880,均P<0.05),而与年龄、性别、T分期、N分期及临床分期无关;ERCC1、hMLH1的阳性表达率与IMRT放疗敏感性呈负相关(rs=-0.352、rs=-0.376,均P<0.05);ERCC1、hMLH1阳性表达组生存期少于阴性组(P<0.05)。结论 ERCC1、hMLH1蛋白表达水平与IMRT敏感性呈负相关,治疗前可根据ERCC1、hMLH1蛋白的表达水平评估局部中晚期鼻咽癌组织IMRT敏感性。 相似文献
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目的:探讨局部晚期鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者肿瘤组织中受体相关蛋白80(receptor-associated protein 80,Rap80)mRNA的表达及其与西妥昔单抗联合放化疗治疗疗效的关系。方法:收集2005年1月至2008年10月在我院诊治的NPC患者111例,采用Real-time PCR检测NPC患者瘤组织中Rap80 mRNA的表达,采用log-rank检验分析Rap80 mRNA的表达与NPC患者的生存期和无进展生存期的相关性。Cox’s回归模型作多因素预后分析。结果:NPC患者中Rap80 mRNA表达水平<0.79(低表达)38例,中位生存时间36个月,死亡的风险比为0.75(p=O.56),3年总生存率42.7%;而Rap80 mRNA表达水平0.79~1.41(中表达)的患者40例,中位生存时间33个月(95%CI=19.1-36.8),死亡风险比为1,3年总生存率28.25%;Rap80 mRNA表达>1.41(高表达)的患者33例,中位生存时间26.5个月,死亡风险比为2.49(P=0.037),3年总生存率14.4%。Rap80 mRNA水平显著影响死亡率(风险比4.527,P<0.001)和无进展生存期(风险比3.582,P<0.001)。Cox’s回归分析显示,Rap80 mRNA为独立预后影响预后因素。结论:Rap80mRNA的表达与中位生存时间,死亡的风险比及3年总生存率显著相关,可作为预测预后的一个重要指标。 相似文献