海马类药材的分子遗传标记鉴定研究

应用古DNA研究技术从5种海马药材中提取DNA,用PCR技术扩增约450bp的12SrRNA基因片段和约490 bp的细胞色素b基因片段。对扩增产物进行了限制性片段长度多态性(RFLP)分析和DNA序列分析。用RFLP分析方法可以鉴别2种海马,用DNA序列分析方法得到的分子遗传标记可以鉴别所有5种海马。对其它动物类药材的鉴定有一定参考价值。     

中药材龟板和鳖甲中DNA的提取与扩增

中药材龟板和鳖甲中ＤＮＡ的提取与扩增王亚明，周开亚，吴平，徐珞珊（南京师范大学生物系，南京２１００９７；中国药科大学生药学研究室，南京２１０００９）龟鳖类药材在我国使用历史悠久，具补阴益气的功效。《中国药典》（１９９０年版）规定龟甲（龟板）的原动物为...     

蛇类药材的药源调查

对1990年版《中国药典》收载的3种蛇类药材的药源调查表明，乌梢蛇的主要产区为江苏、浙江、安徽、江西、湖南、湖北和四川等省。蕲蛇主产区为浙江、江西、湖南、福建等省。金钱白花蛇主产区为广东、湖南、江西等省。目前蛇类药材直接或间接来自野生蛇类，在人工养殖条件下尚未实现大规模的人工繁殖。     

蛇类药材的性状鉴别

鉴于目前流通领域中蛇类药材的品种混乱情况比较严重,缺少简便而有效的鉴别手段,本文对收集自全国10个省区的263件蛇类药材及其伪、混品标本共14种进行了生药性状描述,归纳了《中国药典》(1995年版)所载三种正品蛇类药材的鉴别要点,并编制了蛇类药材及其常见伪、混品的性状鉴定检索表。     

少棘蜈蚣水提取物的抗菌活性

用含有大肠杆菌Escherichia coli K12D31、poly IC和昆虫生理盐水注射液诱导3~4 d的少棘蜈蚣Scolo-pendra subspinipes mutilans水提取物表现出较高的抗菌活性,经测定发现在设定的不同温度、pH值及离子强度条件下表现出良好的抗菌活性;对不同的蛋白酶表现出不同的敏感程度;除了对Proteus mirobilis未表现出抑菌外,对其它9种革兰氏阳性菌和阴性菌、真菌都有抗菌作用,表明有广谱抗菌活性;在600μg/m l以下,没有表现出溶血和凝集活性;电镜观察表明可损伤大肠杆菌的外壁,内容物外泄,菌体死亡。     

从高温高压蒸煮过的中华鳖甲和骨骼中提取及扩增DNA

为验证经高温加工过的鳖甲是否可以用ＤＮＡ分子标记鉴定,选取经高温高压蒸煮过的中华鳖鳖甲和骨进行ＤＮＡ提取,并用通用引物Ｌ１０９１和Ｈ１４７８扩增。结果表明经高温高压蒸者过的商业甲也可以提得较高质量的片段,同时还讨论了ＤＮＡ提取和扩增过程中应注意的问题,为分子遗传标记技术广泛应用于同类药材的鉴定和积累了基础资料。     

Lipocalin型前列腺素D合成酶在大鼠睾丸和附睾中的分布与定位

目的 分析大鼠睾丸和附睾中Lipocalin型前列腺素D合成酶(LPGDS)的分布与定位，探讨LPGDS在男性生殖中的作用。方法 选用2月龄SD大鼠睾丸与附睾，运用Western blot方法分析LPGDS在大鼠睾丸与附睾头、附睾体和附睾尾中的表达及其差异；运用免疫组织化学方法分析LPGDS在睾丸与附睾头、附睾体和附睾尾中的分布。结果 Western blot研究发现，LPGDS在大鼠睾丸中没有表达，在附睾中有较强表达，附睾头表达量最高，附睾体次之．附睾尾最低。免疫组织化学结果显示，免疫阳性产物定位于附睾上皮细胞的胞质和纤毛上。结论 LPGDS在大鼠睾丸中没有表达，在附睾中有较强表达，表达量存在差异。提示，LPGDS在精子成熟过程中起着一定的作用。     

江豚味蕾的分布及超微结构

目的：了解江豚味觉器官味蕾在口腔中的分布方式和味蕾的超微结构。方法：用石蜡切片观察江豚味蕾的分布，用透射电镜观察味蕾的超微结构。结果：江豚味蕾仅分布于舌小窝侧壁上皮层及舌小窝内疣状突起上皮层中；江豚味蕾主要包括明细胞和暗细胞，味孔表面由暗细胞细胞体的上行突起构成，明细胞细胞体上行突起不到达味孔表面。结论：脊椎动物味蕾在体内外的分布特点与动物的分类地位相关，而脊椎动物舌表面的形态学特点与动物的栖息环境相关。     

F型、H型居群的铁皮石斛rDNAITS区序列差异及SNP现象的研究

目的 :研究铁皮石斛主产区F型和H型居群rDNAITS碱基序列的差异。方法 :运用PCR直接测序法对广西、贵州、云南铁皮石斛主要居群的rDNAITS区 (包括ITS1,5 .8SrDNA ,ITS2 )碱基序列进行了序列测定。结果 :在铁皮石斛各居群中 ,F型居群与H型居群植株的rDNAITS区碱基序列有 2个位点差异 ,且变异分别发生在ITS1区及 5.8S区内。研究表明 :铁皮石斛居群内部rDNAITS区的差异与植物生活型的差异呈一定的相关性 ,H型居群的铁皮石斛是F型的变种。在F型与H型居群间 ,其 5.8SrDNA区存在单核苷酸多态 (SNP)现象。首次报道了铁皮石斛ITS区的碱基序列 ,ITS区总长度为 634bp ,其中ITS1为 231bp ,5.8S为 163bp ,ITS2为 240bp。结论 :rDNAITS区碱基序列的比较分析进一步证明铁皮石斛F型居群与H型居群间具有显著的差异性。     

塞隆骨原动物高原鼢鼠核基因18SrRNA序列测定与分析

目的 :测定仓鼠科动物高原鼢鼠Myospalax baileyi的核rDNA基因序列 ,为塞隆骨正品基原检定提供分子依据。方法 :采用PCR直接测序技术测定高原鼢鼠 18S rRNA基因核苷酸序列并作序列特征分析。结果 :高原鼢鼠的 18Sr RNA序列长度为 1851bp。根据排序比较 ,高原鼢鼠与 2种鼠科动物间的DNA序列同源性为 72.04%～72.18%。结论 :通过基因序列分析 ,DNA测序技术可成为塞隆骨正品基原检定的准确有效手段。