治疗性血管新生的中西医研究进展

血管新生与血管内皮祖细胞和内皮细胞的关系极其密切,主要分为两种类型:一种是在胚胎期,由血管母细胞通过原位分化增殖形成初步的血管网络结构,即血管形成;另一种是在已有血管网络结构的基础上,经过内皮细胞的迁移、增生,最后以芽生的方式扩展出更多的血管网,称为血管生成.先前认为成体后的血管新生以血管生成方式出现,但随着研究深入,发现受损或闭塞的血管周围也存在着血管形成[1].     

The Effect of Xuefu Zhuyu Decoction(血府逐瘀汤) on in vitro Endothelial Progenitor Cell Tube Formation

<正>Objective:To observe the effect of Xuefu Zhuyu Decoction(血府逐瘀汤)-containing serum (XFZYD-CS) on endothelial progenitor cell(EPC) tube formation in vitro.Methods:Mononuclear cells from rat bone marrow were prepared in a Ficoll density gradient centrifuge.EPCs were separated by the differential attachment method,and observed with inverted microscope for the effect of XFZYD-CS on EPC tube formation. Results:After one day,EPCs exposed to the serum containing 5%,10%and 15%XFZYD-CS formed typical tubes or vessel networks.The tube formation time was two days ahead of the control group and the size of most tubes in the serum groups was smaller than in the control group.Conclusion:XFZYD-CS could induce EPC angiogenesis and hasten tube formation,especially in capillary vessels.The study provides experimental evidence for the plausibility of Xuefu Zhuyu Decoction in the treatment of ischemic diseases.     

血府逐瘀汤诱导内皮细胞血管新生中一氧化氮的作用

目的研究血府逐瘀汤促进内皮细胞参与血管新生的作用机制。方法选择SD大鼠12只,随机分为血府逐瘀汤组和空白对照血,每组6只。分别制备血府逐瘀汤含药血清和空白对照血清,采用1.25%、2.5%、5.0%不同浓度血府逐瘀汤含药血清和空白对照血清诱导内皮细胞48h,检测不同浓度血清对内皮细胞ECV304增殖、迁移和体外成血管的影响,并检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)浓度、胞内NO浓度和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)活性及表达。结果与空白对照组相同血清含量比较,1.25%、2.5%药物浓度下细胞增殖明显增加(P<0.05),2.5%、5.0%药物浓度下迁移细胞数明显增加(P<0.01),各药物浓度下管腔个数均明显增加(P<0.01);各浓度药物均可显著提高内皮来源的胞内、胞外NO浓度及eNOS表达(P<0.05或P<0.01),1.25%、2.5%浓度药物还可显著提高eNOS的活性(P<0.05或P<0.01)。结论血府逐瘀汤通过促进eNOS的表达和活性,提高胞内、外气体分子NO水平发挥促血管新生作用。     

A microarray analysis of angiogenesis modulation effect of Xuefu Zhuyu Decoction (血府逐瘀汤) on endothelial cells

Objective:To study the angiogenesis modulation mechanism of Xuefu Zhuyu Decoction(血府逐瘀汤) on the endothelial cell line ECV304.Methods:ECV304 cells were treated with 2.5%Xuefu Zhuyu Decoctioncontaining serum(XFZYD-CS) for 24 h,48 h or 72 h.Thiazolyl blue tetrazolium bromide(MTT),fluorescence activating cell sorter(FACS),migration,adhesion and in vitro tube formation assays were conducted to confirm an angiogenesis effect of XFZYD at 3 time points.An analysis of angiogenesis regulator profiles was performed at 3 times with real-time polymerase chain reaction(RT-PCR) superarray.Results:At 48 h,XFZYD-CS induced ECV304 significantly improved cell viability,number in S phase,migration,adhesion and tube formation.At 24 h and 72 h, only cell migration was elevated.Microarray results showed that the expression of 27 angiogenesis-related genes was changed.Conclusion:XFZYD-CS treatment induced angiogenesis on ECV304 cells with significant cellcular changes occurring at 48 h and genetic changes as early as 24 h.     

血府逐瘀汤诱导内皮细胞迁移的机制研究

目的:探讨血府逐瘀汤促进内皮细胞迁移作用及其机制。方法:运用血清药理学方法,以1.25%,2.5%,5%的血府逐瘀汤含药血清和空白血清培养内皮细胞ECV304,采用划痕损伤法和侵袭实验检测药物对细胞迁移作用的影响,并分别通过酶联免疫法和硝酸还原酶法检测细胞培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和一氧化氮(NO)浓度,荧光探针法检测胞内NO浓度,eNOS酶活性以及RT-PCR法检测VEGF,bFGF,eNOS基因的表达,以进一步阐明药物的作用机制。结果:1.25%含药血清可促进细胞在划痕平面上的迁移作用,5.0%含药血清可显著提高细胞侵袭穿越的迁移作用,而2.5%含药血清对这两类迁移均有促进作用。1.25%,2.5%,5.0%含药血清均可明显提高上清液中bFGF、胞内外NO浓度和胞内eNOS活性,只有2.5%含药血清能提高上清液中VEGF的含量。RT-PCR结果显示,1.25%,2.5%,5.0%含药血清均可提高bFGF的转录;2.5%和5.0%含药血清可上调eNOS的表达;而药物对VEGF的影响较复杂,仅2.5%含药血清上调VEGF的表达,1.25%含药血清却呈抑制作用。结论:血府逐瘀汤通过上调VEGF,bFGF,NO的表达与分泌,诱导内皮细胞迁移,从而发挥促血管新生功能。     

血管内皮生长因子通路在血府逐瘀汤影响内皮祖细胞功能中的作用研究

目的:观察血府逐瘀汤对内皮祖细胞(EPC)功能以及血管内皮生长因子-血管内皮生长因子受体(VEGF-VEGFR)的影响。方法:血府逐瘀汤含药血清和空白对照血清诱导处理内皮祖细胞后,采用MTT,Boyden小室、黏附试验和RT-PCR技术分别观察药物对EPCs增殖、迁移、黏附以及VEGF-VEGFR转录的影响。结果:与空白对照组相比,10%含药血清对EPC增殖和黏附均有明显促进作用;药物对细胞迁移的影响表现为从5%含药血清的显著抑制到10%和15%含药血清的显著促进作用,且10%和15%含药血清均可明显上调VEGF和VEGFR的转录。结论:血府逐瘀汤通过上调VEGF-VEGFR通路,影响内皮祖细胞功能,具有诱导内皮祖细胞参与血管新生的作用。     

血府逐瘀汤诱导内皮细胞促血管新生的基因调控研究

目的 研究血府逐瘀汤促进内皮细胞参与血管新生的机制。方法 通过血府逐瘀汤含药血清对内皮细胞ECV304增殖、细胞周期、迁移和体外成血管的影响,明确药物具有显著的促血管新生作用,并运用基因芯片技术分析药物对血管新生各调控因子的作用。结果 2.5%血府逐瘀汤含药血清作用48 h能显著促进ECV304细胞活性、增加S期细胞数目,诱导内皮细胞迁移和促体外成血管作用。在此药物作用条件下,血府逐瘀汤上调4个,下调10个血管新生调控基因的表达。结论 血府逐瘀汤促ECV304参与血管新生的机制复杂,呈多途径、多靶点现象。     

血府逐瘀汤促血管新生中VEGF通路的作用研究

目的:探讨VEGF通路在血府逐瘀汤促血管新生中的作用.方法:运用血清药理学方法,以1.25％,2.5％,5％的血府逐瘀汤含药血清和空白血清诱导处理血管内皮细胞ECV304,分别采用MTT比色法,Boyden小室迁移法和体外成血管实验检测内皮细胞增殖、迁移和成血管能力,并通过酶联免疫法、免疫组化和RT-PCR检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2)分泌和表达的情况.结果:1.25％含药血清除了能提高体外成血管能力外,对其余指标均无影响；2.5％含药血清明显促进内皮细胞增殖、迁移及成血管,并能显著提高VEGF及VEGFR2的表达；5％含药血清仅上调胞内VEGF的表达,进而促进内皮细胞的迁移和黏附.结论:血府逐瘀汤通过上调VEGF-VEGFR2途径,诱导内皮细胞增殖、迁移和血管形成,部分说明了药物促血管新生的作用机制.     

治疗性血管新生的中西医研究进展

血管新生与血管内皮祖细胞和内皮细胞的关系极其密切，主要分为两种类型：一种是在胚胎期，由血管母细胞通过原位分化增殖形成初步的血管网络结构，即血管形成；另一种是在已有血管网络结构的基础上，经过内皮细胞的迁移、增生，最后以芽生的方式扩展出更多的血管网，称为血管生成。先前认为成体后的血管新生以血管生成方式出现，但随着研究深入，发现受损或闭塞的血管周围也存在着血管形成。血管新生不仅是机体正常发育、生殖和组织修复的基础，而且与某些疾病息息相关，若病变过程伴有血管新生不足，则无法满足机体生长需要，如闭塞性脉管炎、冠心病、心肌梗死、脑血栓等缺血性疾病；反之，血管新生过度的疾病有糖尿病性视网膜病变、类风湿性关节炎、银屑病、动脉粥样硬化、肿瘤等。因此，通过某种外源干预如移植内皮祖细胞或药物等手段促进或抑制血管新生而开展的治疗性血管新生已经成为缺血性疾病和肿瘤等疾病的治疗新策略。     

血府逐瘀汤动员骨髓内皮祖细胞的影响因素分析

目的探讨血府逐瘀汤影响血管新生的相关因素。方法将24只SD大鼠随机分成血府逐瘀汤高、中、低剂量组和空白对照组,分别检测各组大鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)、促红细胞生成素(EPO)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)和一氧化氮(NO)的含量,观察血府逐瘀汤对内皮祖细胞动员因素的影响。结果与空白对照组比较,血府逐瘀汤高剂量组对血清VEGF、血府逐瘀汤中剂量组对血清SDF-1和GM-CSF,3个药物剂量组对血清NO的水平均有显著提高(P0.05或P0.01),但高、中剂量组均能降低血清G-CSF的含量(P0.05)。结论血府逐瘀汤可通过提高VEGF、SDF-1、GM-CSF和NO的水平动员骨髓内皮祖细胞参与血管新生,动员途径呈现多样性和复杂性。