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1.
目的 构建重组腺病毒Ad-APN-EGFP,研究其转染效率和对种植体周围成骨的影响。方法 构建含脂联素(APN)基因的的重组腺病毒Ad-APN-EGFP,并测序鉴定和酶切鉴定。体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),检测转染效率和APN基因mRNA表达;建立大鼠股骨干骺端羟磷灰石涂层种植体植入动物模型。植入种植体前,实验组于植入体窝注入10 μL的Ad-APN-EGFP悬浮液;对照组注入10 μL的PBS。4周后取材,光镜下观察种植体周围成骨。结果 测序鉴定和酶切鉴定表明,成功构建重组腺病毒Ad-APN-EGFP;转染大鼠BMSCs效率可达90%以上,并能高表达APN基因mRNA;体内实验显示实验组种植体周围成骨明显高于对照组。结论 重组腺病毒Ad-APN-EGFP可以提高大鼠BMSCs的APN基因表达,具有促进种植体周围成骨的作用。 相似文献
3.
目的:探讨小鼠环状RNA-42398(mmucirc42398)对肝星状细胞活化的影响及机制是否与调节TGF-β1/Smads信号通路有关。方法:小鼠肝星状细胞株JS1,分成正常对照组、空载体阴性对照组(vector组)和mmucirc42398过表达组(mmucirc42398组),体外构建mmucirc42398过表达载体,通过脂质体瞬时转染法转入JS1细胞,48 h后RT-qPCR检测mmucirc42398的表达变化,PCR产物经一代测序验证其环化位点,Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3、p-Smad2和p-Smad3蛋白表达。结果:与vector组相比,mmucirc42398组的mmucirc42398表达增加(P<0.01),PCR产物测序验证了其环化位点,提示mmucirc42398过表达质粒成功转入JS1细胞并高效表达;在JS1细胞中过表达mmucirc42398后,α-SMA和Col I蛋白表达显著降低(P<0.01),TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白表达无显著变化(P>0.05),但p-Smad2和p-Smad3蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论:mmucirc42398能抑制肝星状细胞的活化,其机制与调控TGF-β1/smads信号通路有关。 相似文献
4.
目的对1个隐性营养不良型大疱性表皮松解症家系进行基因检测及产前诊断。方法利用PCR-Sanger测序技术检测患者COL7A1基因的全部外显子及其侧翼区的潜在变异,之后进行家系验证及产前基因诊断。结果Sanger测序显示患者COL7A1基因存在c.7289delC(p.Pro2430Glnfs*36)及c.7474C>T(p.Arg2492*)复合杂合变异,分别遗传自其母亲和父亲,在100名健康对照中未检测到上述变异。产前诊断胎儿COL7A1基因c.7289位置未见变异,c.7474位置存在C>T杂合变异,判断为携带者。结论明确了1例隐性营养不良型大疱性表皮松解症家系COL7A1基因的致病性变异,并成功进行了产前诊断。 相似文献
7.
8.
目的:为探讨硅油填充治疗儿童复杂性视网膜脱离手术的护理方法,以提高手术成功率。方法:观察并总结了18例15岁以下儿童复杂性视网膜脱离手术后患儿护理经验。结果:体位护理、预防窒息及眼部并发症的观察及护理可有效提高手术成功率,结论规范、周全的护理是保证硅油填充治疗儿童复杂性视网膜脱离手术成功的关键之一。 相似文献
9.
目的建立马方综合征(MFS)临床实验室基因诊断流程, 对MFS家系进行临床实验室基因诊断。方法利用二代高通量测序对2020年1月至12月到阜外华中心血管病医院(河南省人民医院心脏中心)就诊的2个MFS家系患者FBN1基因进行测序分析, 然后利用Sanger测序验证二代高通量测序结果, 同时对家系正常人及100名健康人进行突变位点Sanger测序以明确家系中FBN1基因致病性突变, 并于2个家系孕妇孕中期指导其进行产前诊断。结果 MFS临床实验室诊断显示2例MFS患者FBN1基因分别存在c.2560T>C 杂合突变、c.6772T>C杂合突变的致病性突变, 2个家系中正常人及100名健康人均未见此突变;产前诊断显示家系一胎儿存在FBN1基因c.2560T>C杂合突变, 为MFS患儿, 家系二胎儿FBN1基因未见突变, 建议继续妊娠, 产后随访结果与临床实验室诊断结果一致。结论成功建立了MFS临床实验室基因诊断流程, 对明确MFS临床诊断提供重要的参考依据。 相似文献
10.