壮药透骨香抗类风湿关节炎药物活性部位筛选及机制研究

目的 探讨壮药透骨香抗类风湿关节炎作用的药物活性部位及作用机制。方法 体外培养法制备BALB/c小鼠脾淋巴细胞,经刀豆蛋白A（CoA）刺激作用后,以透骨香各药物部位进行干预, 细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞增殖情况,计算刺激指数;体外培养小鼠脾细胞,刀豆蛋白A刺激T淋巴细胞增殖,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测观察透骨香活性部位对细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL-10）含量的影响。结果 小鼠脾细胞经刀豆蛋白A刺激后,细胞计数试剂盒-8检测光密度（OD）值与刺激指数显著升高（P＜0.05）,透骨香正丁醇部位及水溶部位能明显降低光密度值及刺激指数,其中水溶部位（5 μg·mL^-1）作用最强（P＜0.05）;刀豆蛋白A刺激脾淋巴细胞增殖后,细胞因子白细胞介素-2、白细胞介素-10分泌显著增强,透骨香水溶部位干预后能明显抑制白细胞介素-2分泌,提高白细胞介素-10含量（P＜0.05）。结论 透骨香水溶部位对T淋巴细胞增殖具有较强抑制作用,是透骨香抗RA活性部位,其机制可能与调节细胞因子白细胞介素-2、白细胞介素-10分泌有关。     

保肝片对大鼠肝纤维化模型的影响

目的: 探讨中药保肝片对四氯化碳(CCl₄)复合因素改良法所致大鼠肝纤维化的治疗作用。 方法: 将雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,中药保肝片高、中、低剂量组及秋水仙碱组,除空白组外,其余各组应用CCl₄复合因素改良法制备肝纤维化模型,并于造模同时予中药保肝片高、中、低剂量(27.55,13.78,6.89 g·kg^-1)和秋水仙碱片(0.2 mg·kg^-1)进行抗肝纤维化干预,共6周。通过计算肝脏指数,检测肝功能丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)水平,观察肝脏病理切片并进行肝纤维化分级,评价药物的抗纤维化作用。 结果: 与空白组比较,模型组大鼠肝脏指数增加,血清AST,ALT升高,ALB含量降低,且肝脏病理呈现明显肝纤维化,具有显著性差异(P<0.01);与模型组比较,保肝片(27.55 g·kg^-1)组ALB含量明显升高,且肝脏病理肝纤维化程度显著改善,差异具有显著性(P<0.01或P<0.05)。 结论: 保肝片可明显改善模型大鼠肝纤维化程度,具有抗肝纤维化作用。     

宫血净胶囊毒理学研究

目的观察宫血净胶囊的急性毒性和长期毒性。方法（1）急性毒性试验：昆明种小鼠40只,用随机数字表法分成2组,每组20只,实验组用宫血净胶囊粉,采用最大给药法灌胃给药;对照组用等体积蒸馏水灌胃观察14d,记录小鼠的体重及毒性反应;（2）长期毒性试验：Wistar种大鼠80只,用随机数字表法分成4组,每组20只,3个实验组用宫血净胶囊生药81．6、49．0、24．5g／kg连续灌胃3个月;对照组用等体积蒸馏水灌胃停药14d后分另q称量大鼠体重、计算脏器系数、血液学指标、血液生化学指标并做病理组织学检查。结果宫血净胶囊的最大给药量为生药450g／kg,未见小鼠行为异常,体重增长正常。长期毒性试验：给药期间各组大鼠毛色、活动、二便、摄食、饮水与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;但大剂量组部分大鼠体重、血液学、血液生化学指标和脏器系数有异常变化,停药后,上述异常变化指标均恢复正常。给药期和恢复期重要脏器病理组织检查均未发现明显异常变化。结论宫血净胶囊的最大给药量为生药450g／ks;长期大剂量灌胃给予宫血净胶囊对大鼠有一定毒性,但停药后均恢复正常。该药按使用剂量和疗程给药是安全的。     

三养胶麦减肥、降脂及降血糖作用的实验研究

目的对三养胶麦成分进行减肥、降血脂、降血糖动物实验研究。方法通过喂养营养饲料建立大鼠肥胖模型,观察三养胶麦成分的减肥作用;通过喂养高脂饲料建立脂代谢紊乱大鼠模型,观察三养胶麦成分的降脂作用;通过尾静脉注射四氧嘧啶制备糖尿病小鼠模型,观察三养胶麦成分的降血糖作用。结果减肥实验中三养胶麦成分各剂量组大鼠体重明显低于模型组,且高、中剂量组体脂及体脂/体重指数明显低于模型组,差异有显著性意义（P〈0.05或P〈0.01）;降脂实验中三养胶麦成分高、中剂量组体重、血清三酰甘油（TG）含量明显低于模型组,差异有显著性（P〈0.05或P〈0.01）;降糖实验中三养胶麦成分高剂量组空腹血糖明显低于模型组,差异有显著性（P〈0.05）,但糖耐量实验中各组AUC没有显著性差异（P〉0.05）。结论三养胶麦成分具有辅助减肥、降血清三酰甘油及降空腹血糖的保健作用。     

玉郎伞黄酮对心肌缺血再灌注损伤心肌组织ATP酶和凋亡蛋白的影响

目的 :研究玉郎伞黄酮(FYLS)对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤(I/R)心肌组织Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶和凋亡蛋白的影响。 方法 :离体大鼠心脏采用Langendorff法灌流,停灌30 min再灌30 min造成I/R模型。测定心肌组织Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶活性。同时观察药物对缺血再灌注后心肌组织病理形态、凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax表达的影响。 结果 :FYLS高剂量(8×10^-3g ·L^-1)可显著改善缺血-再灌注所致的心功能损伤,增加Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶的活性;与模型组比较,FYLS高剂量组病理结果显示心肌组织受损程度明显减轻(P<0.05),且明显降低心肌Bax蛋白表达(P<0.01),对Bcl-2蛋白表达无明显影响,但能显著增加Bcl-2/Bax的比率(P<0.05)。 结论 :FYLS对I/R具有保护作用,其机制可能与减轻钙超载、下调Bax蛋白表达、增加Bcl-2/Bax的比率有关。     

玉郎伞黄酮类化合物对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用

目的 研究玉郎伞黄酮类化合物(YLSF)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用及其作用机制.方法 采用Langendorff法灌流离体大鼠心脏,停灌30min后再灌30min,造成心肌缺血-再灌注损伤模型.于大鼠左心室插入水囊导管,记录YLSF对血流动力学指标的影响,测定冠脉流量(CF)和冠脉流出液中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸脱氧酶同工酶-1(LDH-1)的活性及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量.结果 YLSF高剂量可显著改善缺血-再灌注所致大鼠的心功能损伤,减少CK、CK-MB、LDH、LDH-1的释放和MDA的产生,增加SOD的活性.结论 YLSF对心肌缺血-再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与清除氧自由基、减少脂质过氧化反应有关.     

瑶药厚叶南五味子逆转肝纤维化活性部位的体外筛选及化学成分研究

目的:体外筛选出厚叶南五味子逆转肝纤维化作用的最佳活性部位,并对其化学成分进行解析。方法:厚叶南五味子经天然药物化学方法提取得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水层共4个部位,采用CCK-8法检测不同溶剂提取物对大鼠肝星状细胞HSC-T6的增殖作用、ELISA法检测不同溶剂提取物对细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)成分的影响,从中筛选出逆转肝纤维化活性最佳的部位。Western blot检测最佳活性部位处理细胞后磷酸化c-jun氨基端激酶(P-JNK)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(P-p38)的含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;采用气相-质谱(GC-MS)方法对该活性部位进行解析。结果:厚叶南五味子石油醚部位对HSC-T6细胞的增殖抑制作用最强,IC_(50)为35.73μg/mL;进一步筛选显示石油醚部位可显著降低细胞外基质成分Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的表达;厚叶南五味子石油醚部位作用后,HSC-T6细胞磷酸化JNK、p38蛋白表达较空白对照组显著降低(P0.01),细胞凋亡率显著升高(P0.05);从厚叶南五味子石油醚部位中分离出27个成分,并鉴定出其中20个成分,主要成分为石竹烯(25.329%)、δ-杜松烯(13.211%)和β-石竹烯(10.076%)。结论:厚叶南五味子石油醚部位具有较好的逆转肝纤维化活性,其作用机制与抑制磷酸化JNK、p38表达及诱导细胞凋亡有关,石竹烯、δ-杜松烯及β-石竹烯可能是其发挥逆转肝纤维化作用的物质基础。     

藤茶双氢杨梅素对动脉粥样硬化大鼠的炎症因子及主动脉弓sPLA2-ⅡA表达的影响

目的:探讨藤茶双氢杨梅素对动脉粥样硬化(AS)大鼠血清炎症因子水平和ⅡA分泌型血小板型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2of groupⅡA,s PLA2-ⅡA)mRNA表达的影响,以了解藤茶双氢杨梅素对AS的作用机制。方法:取健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为5组,即正常组、模型组、辛伐他汀组(5 mg·kg-1·d-1)、及藤茶双氢杨梅素低、高剂量组(10,40 mg·kg-1·d-1),每组12只,除正常组大鼠喂以基础饲料外,其他组给大鼠饲养高脂饲料,并ip维生素D3,复制AS模型,给药组ig给予相应药物,正常组与模型组给予等体积的生理盐水,连续24周后,观察藤茶双氢杨梅素对模型大鼠血清C-反应蛋白(CRP),血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1(IL-1)的水平,RT-PCR观察主动脉弓s PLA2-ⅡA mRNA表达的变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血管管壁增厚,内皮粗糙,中膜平滑肌纤维明显增生,大鼠血清CRP,TNF-α和IL-1水平明显增高(P<0.05,P<0.01),主动脉弓s PLA2-ⅡA mRNA的表达明显增强(P<0.01);与模型组比较,藤茶双氢杨梅素低剂量组大鼠血管病变范围及内膜增厚程度略有减轻,高剂量组大鼠血管仅见局部内皮粗糙,内膜光滑,中膜平滑肌纤维轻度增生,藤茶双氢杨梅素高剂量组可明显降低AS大鼠血清CRP和IL-1水平(P<0.05),能显著降低AS大鼠主动脉弓s PLA2-ⅡA mRNA的表达(P<0.05)。结论:藤茶双氢杨梅素对AS具有一定的防治作用,其作用机制是通过改善AS大鼠炎症因子水平,抑制s PLA2-ⅡA mRNA的表达。