血栓素A_2受体在正常大鼠脑内的分布定位

目的探讨血栓素A2受体(TP)在正常大鼠脑内的表达分布特点。方法正常成年SD大鼠脑组织冰冻切片,TP免疫荧光染色,TP/神经核蛋白(Neu N),TP/胶质纤维酸性蛋白(GFAP),TP/谷氨酸脱羧酶67(GAD67)免疫荧光双标染色,观察TP在脑内分布表达情况。结果 TP免疫阳性产物主要分布在扣带回皮质、皮层Ⅲ~V层、下丘和小脑的浦肯野细胞层;免疫荧光双标结果显示TP与神经元胞核特异性标记物Neu N共存,但不与星形胶质细胞标记物GFAP共存;同时,所有TP阳性神经元表达γ氨基丁酸(GABA)能神经元标记物GAD67。结论 TP表达于大鼠扣带回皮质、皮层Ⅲ~V层、下丘脑和小脑的浦肯野细胞层,主要分布于GABA能神经元,提示TP可能参与了大鼠大脑GABA能神经元的功能调节和病变过程。     

NDRG2在小鼠胚胎脑组织的表达特点

目的:观察NDRG2 mRNA在小鼠胚胎脑组织的表达与分布。方法:采用胚胎期小鼠E10.5 d、E12.5 d、E16.5d和E18.5 d进行脑切片的原位杂交。结果:NDRG2 m RNA在小鼠胚胎发育各期均有持续性表达,主要定位于端脑、中脑、菱脑、间脑、眼原基、脊髓、小脑原基、海马原基、丘脑、下丘脑和许多神经核团,神经细胞定位主要集中在细胞质中。结论:脑内NDRG2作用贯穿了整个脑的发育阶段,提示该基因在小鼠胚胎组织发育过程中有重要作用。     

Ndrg2对成年大鼠皮层机械性损伤后神经发生的影响

目的:探讨Ndrg2对成年大鼠皮层机械损伤后神经发生的影响及可能作用机制。方法:选取成年雄性Sprague-Dawley大鼠24只,利用立体定位法对大鼠皮层进行针刺机械损伤。随后分为4组(n=6):对照组(注射生理盐水)、病毒对照组(注射空载体病毒)、上调Ndrg2组(注射AAV-Ndrg2病毒)及抑制剂组(注射AAV-Ndrg2病毒和-分泌酶抑制剂DAPT)。术后7 d免疫荧光检测损伤区周边Ndrg2及Nestin表达变化。结果:在对照组和病毒对照组,针道周边的Ndrg2+细胞明显增多,并表达神经干细胞标记物Nestin;与病毒对照组相比,上调Ndrg2组的Ndrg2+及Ndrg2+/Nestin~+细胞进一步增多(P0.01);注射Notch信号抑制剂DAPT后,与上调Ndrg2组相比,针道周边Nestin~+细胞数目明显减少(P0.01),但Ndrg2+细胞数目无明显改变(P0.05)。结论:大鼠皮层机械损伤后,Ndrg2可参与损伤区的神经发生过程;Notch信号通路可能在Ndrg2促神经发生中发挥关键作用。     

Ndrg2对培养大鼠神经干细胞增殖和分化的影响

目的:检测Ndrg2在培养大鼠神经干细胞(NSCs)中的表达情况,探索改变Ndrg2表达对NSCs增殖和分化的影响。方法:用免疫细胞化学染色和Western Blot法检测Ndrg2在培养NSCs中的表达;利用AAV-Ndrg2过表达病毒及LV-Ndrg2-RNAi干扰病毒感染大鼠NSCs后,通过BrdU掺入实验观察干预Ndrg2表达后NSCs增殖的变化,利用神经元标记物Tuj1和星型胶质细胞标记物GFAP的免疫细胞化学染色分析NSCs的分化情况。结果:Ndrg2高表达于大鼠NSCs中;与对照组(感染病毒空载体)相比,上调Ndrg2表达可显著增加BrdU~+和Tuj1~+细胞数(P0.05),但GFAP~+细胞数目无明显变化(P0.05);相反,下调Ndrg2表达可减少BrdU~+细胞数(P0.05),但不影响Tuj1~+和GFAP~+细胞数(P0.05)。结论:Ndrg2表达于大鼠NSCs,它可正性调控NSCs的增殖并促进NSCs向神经元分化。     

小儿躯干严重坏死性筋膜炎一例

患儿女,6岁,于2012年7月5日因全身多处出现红色斑丘疹伴有发热,在当地医院诊断为水痘,给予抗病毒治疗,治疗期间因发热间断应用了糖皮质激素,7月11日发现腰背部出现小片状红肿,且逐渐加重,局部皮肤变黑、坏死,且范围逐渐扩大,同时伴有高热,最高体温39.5℃,精神欠佳,因病情变化快,症状逐渐加重,于7月13日转入北京朝阳急诊抢救中心。入院查体:体温:39.3℃,脉搏:110次/min,呼吸:     

弹性髓内钉治疗大龄儿童尺桡骨双骨折

尺桡骨双骨折是一种常见骨折,临床对于儿童骨折治疗的要求不断提高,因而需要寻求微创性、并发症较少的内固定方法.弹性髓内钉治疗儿童长骨骨折,符合微创理念,具有创伤小、间接复位、生物学固定、保护局部血运、不易损伤骨骺等优点[1].2010年3月～2011年4月,我科采用闭合复位、弹性髓内钉经皮插钉技术治疗尺挠骨双骨折,取得良好效果,现报告如下.     

中西医结合治疗老年原发性骨质疏松症疗效评价

目的:探讨中西医结合治疗老年原发性骨质疏松症(POP)的临床疗效.方法:将入选的276例POP患者随机分为观察组和对照组各138例,两组患者均给予口服钙尔D、维生素D2,肌注依降钙素注射液;在此治疗基础上观察组给予口服自拟强骨汤.两组患者均以30 d为1个疗程,连续治疗3个疗程.观察两组患者临床症状、体征、骨密度(BMD)变化及不良反应.结果:观察组显效率44.9%,总有效率96.4%,明显高于对照组的28.9%和76.1%(P<0.001);两组患者治疗后BMD均比治疗前改善(P<0.001),但观察组改善程度明显优于对照组(P<0.001);在治疗期间两组各有3例患者出现恶心、呕吐、颜面潮红现象,两组患者治疗前后检测血尿常规、肝肾功能均未发现异常.结论:中西医结合治疗POP所取得的疗效比较满意,在增强疗效、改善症状、提高患者生活质量等方面具有独特的优势,值得临床推广应用.     

人胰腺核糖核酸酶的基因克隆、蛋白表达与活性测定

目的：构建人胰腺核糖核酸酶（hpRNase）原核表达载体、获得纯化hpRNase蛋白，为构建乳腺癌单链免疫毒素奠定基础。方法：针对编码hpRNase成熟蛋白基因的cDNA序列设计相应的引物，通过反转录PCR技术，从一例胰腺切除患者的组织标本中，扩增出编码hpRNase成熟蛋白的cDNA序列，亚克隆入表达载体pPROEX—HTb；在大肠杆菌BL21中经1PTG诱导融合蛋白表达，并用镍离子交换树脂进行蛋白纯化；通过RNA水解实验验证hpRNase重组蛋白的活性。结果：经PCR、酶切、测序等方法鉴定，hpRNase cDNA正确克隆人pPROEX—HTb表达载体；IPTG可诱导载体表达分子量约20kD的蛋白产物，经Westerm blot验证可与抗hpRNase抗体发生特异性反应；经镍离子交换树脂纯化后的重组蛋白可有效降解RNA。结论：成功构建hpRNase原核表达载体，并获得有RNA降解活性的hpRNase重组蛋白，为进一步构建乳腺癌单链免疫毒素奠定了基础。     

如何追踪隐秘在遗传病背后的突变基因？

遗传性疾病是人的遗传物质在数皱、结构或功能上发生改变,干扰了正常的生命活动过程而引起的疾病,也是一类能够通过生殖细胞传递给后代的疾病。目前基因诊断是明确遗传性疾病致病摹因的惟一手段,通过分析致病基网可以帮助临床医师解释遗传性疾病复杂的临床表现。本文针对发表在《新英格兰医学杂志》（N Engl J Mad）2009年5月的一篇文章,就kcaj10基因突变引发癫痫的原因进行了认真分析,期望能够给医学同仁提供参考。     

EGCG对16Hz,155dB次声诱导的大鼠小胶质细胞过度激活的影响

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对次声诱导的大鼠小胶质细胞过度激活的抑制作用,探讨EGCG潜在的次声对脑损伤的防护作用。方法:16 Hz,155 dB次声刺激原代培养的小胶质细胞,通过细胞因子表达量和免疫荧光染色,观察不同浓度(1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L)的EGCG在不同时程(12 h和24 h)对次声激活的小胶质细胞的抑制作用。结果:1μmol/L或10μmol/L EGCG预孵可显著抑制次声后大鼠小胶质细胞IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α表达的上调,且10μmol/L组的作用最强(P<0.01)。10μmol/L EGCG可以减少次声诱导的小胶质细胞过度激活的形态变化。结论:EGCG对次声诱导的大鼠小胶质细胞过度激活具有显著的抑制作用。