低温诱导黄花蒿中青蒿素的生物合成及其机制研究

目的 研究低温处理对黄花蒿中青蒿素及其他萜类合成通路的影响。方法 以4 ℃为胁迫条件,利用高效液相色谱法测定青蒿素量;硫酸钛沉淀法和N, N-二甲基-对-亚硝基苯胺漂白反应分别检测黄花蒿叶片过氧化氢（H²O²）和单线态氧（¹O²）量;紫外分光光度法检测过氧化氢酶（CAT）活性;实时荧光定量PCR技术定量分析青蒿素合成途径及竞争途径关键酶基因的表达。结果 4 ℃处理4 h后黄花蒿叶片中¹O²和H²O²量升高,并伴随着青蒿素量和CAT活性逐步提高,4、24、48 h后青蒿素量分别提高20%、65%、80%;4 ℃处理24 h后,青蒿素合成相关基因（HMGR、FPS、ADS、CYP71AV1、CPR和DBR2）的表达普遍上调,其中ADS基因的表达提高16倍;而青蒿素合成竞争途径酶（β-石竹烯合酶）基因（CS）表达则下调近20倍。结论 低温刺激可能通过产生高浓度活性氧（ROS）促进青蒿素合成前体转化,上调青蒿素合成相关基因表达并抑制竞争途径基因表达等途径促进青蒿素合成。     

环孢素A对肾移植术后病人血脂的影响

目的 :观察环孢素A对肾移植术后患者血脂的影响。方法 :对 60名肾移植术后患者 ,测定其环孢素、胆固醇及甘油三酯水平 ,按不同的环孢菌素A浓度将患者进行分组 ,并将术前与术后的水平进行比较。结果 :肾移植前后 ,胆固醇和甘油三酯水平改变显著 ,有统计学意义 (P <0 .0 5)。结论 :服用环孢素A可能是导致肾移植术后高脂血症的原因之一。     

中药艾可清胶囊的质量标准研究

[目的]建立中药复方制剂艾可清胶囊的定性定量分析方法.[方法]采用硅胶薄层色谱对复方制剂中淫羊藿、虎杖、女贞子、黄芩、甘草等药材进行定性鉴别;采用反相高效液相色谱测定制剂中相应的指标成分淫羊藿苷、虎杖苷、黄芩苷、甘草酸的含量.[结果]采用硅胶薄层色谱能检出药材指标成分;高效液相色谱法测定,淫羊藿苷在0.18～1.41μ...     

HPLC-ELSD法测定艾可清胶囊中毛冬青皂苷甲的含量

目的:建立艾可清胶囊中毛冬青皂苷甲的硅胶薄层色谱(TLC)鉴别方法和高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)检测的含量测定方法。方法:自药材中分离鉴定毛冬青皂苷甲;确定TLC条件;采用ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)及保护柱,以甲醇-0.2%冰醋酸(67∶33)为流动相,ELSD检测器,漂移管温度95℃,载气流速2.5 L.min-1,柱温30℃,流速1.0 mL.min-1作为HPLC条件。结果:设立的TLC条件可以从复方制剂中检出毛冬青皂苷甲;建立的HPLC含量测定方法,毛冬青皂苷甲在1.92～9.60μg呈良好线性关系(r=0.999 5),平均回收率为99.85%,RSD 1.04%。结论:建立的毛冬青皂苷甲的硅胶TLC鉴别方法和HPLC-ELSD含量测定方法具有操作快捷、方法准确的特点,可作为毛冬青药材及其复方制剂的质量控制方法。     

小叶榕叶有效成分表阿夫儿茶精的分析方法研究

目的：研究小叶榕叶有效成分表阿夫儿茶精的定性定量分析方法。方法：采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，以氯仿-甲醇（8：1）为展开剂、3％香草醛-6％高氯酸溶液为显色剂，检测表阿夫儿茶精的存在与否；采用反相高效液相色谱法，使用Phenomenex C18（250mm&#215;4．6mm，5μm）色谱柱，以甲醇-水（22：78，v／v）为流动相，流速为1mL&#183;min^-1，在208nm波长处测定表阿夫儿茶精的含量。结果：采用薄层色谱法可以清晰检出表阿夫儿茶精；采用反相高效液相色谱法，表阿夫儿茶精进样量在0．0176—0．3334μg范围内呈良好的线性关系（相关系数0．9999），平均加样回收率101．4％（RSD=2．5％）。结论：建立了小叶榕叶中黄烷类主要有效成分的定性定量分析方法，可作为小叶榕叶药材的质量控制方法。     

树豆菧类化合物longistylin A和longistylin C的检测

目的:建立以药物活性和专属性菧类成分longistylin A与longistylin C为评价指标的树豆(木豆)药材质量控制方法.方法:采用硅胶柱色谱分离纯化有关成分,光谱技术鉴定化学结构;反相高效液相色谱法测定指标成分的含量.结果:从树豆叶分离鉴定了2种指标成分longistylin A和longistylin C;采用Thermo BDS Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水(80:20)为流动相可使指标成分获得良好分离;longistylin A和longistylin C分别在0.002 88～0.057 6μg和0.011 2～0.224 μg呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.9％,97.2％,RSD分别为2.4％,2.2％.结论:建立了以树豆叶中药物活性菧类成分为指标的药物分析方法,可用于树豆(木豆)药材的质量控制.     

低温诱导黄花蒿中青蒿素的生物合成及其机制研究

目的研究低温处理对黄花蒿中青蒿素及其他萜类合成通路的影响。方法以4℃为胁迫条件,利用高效液相色谱法测定青蒿素量;硫酸钛沉淀法和N,N-二甲基-对-亚硝基苯胺漂白反应分别检测黄花蒿叶片过氧化氢(H2O2)和单线态氧(1O2)量;紫外分光光度法检测过氧化氢酶(CAT)活性;实时荧光定量PCR技术定量分析青蒿素合成途径及竞争途径关键酶基因的表达。结果 4℃处理4 h后黄花蒿叶片中1O2和H2O2量升高,并伴随着青蒿素量和CAT活性逐步提高,4、24、48 h后青蒿素量分别提高20%、65%、80%;4℃处理24 h后,青蒿素合成相关基因(HMGR、FPS、ADS、CYP71AV1、CPR和DBR2)的表达普遍上调,其中ADS基因的表达提高16倍;而青蒿素合成竞争途径酶(β-石竹烯合酶)基因(CS)表达则下调近20倍。结论低温刺激可能通过产生高浓度活性氧(ROS)促进青蒿素合成前体转化,上调青蒿素合成相关基因表达并抑制竞争途径基因表达等途径促进青蒿素合成。     

艾可清胶囊提取工艺

目的:优选中药复方制剂艾可清胶囊的提取工艺.方法:以淫羊藿苷、虎杖苷、甘草酸、黄芩苷的提取率为指标,采用正交试验设计筛选提取工艺条件,结合综合评分优选最佳工艺条件.结果:优选出的提取条件为30倍量65％乙醇加热回流提取淫羊藿2次,每次3h,提取液减压浓缩至相对密度为1.10(60℃);3倍量20％乙醇室温放置8h去除叶绿素;10倍量80％乙醇提取虎杖、黄芩、甘草等混合药材粗粉3次,每次2h.结论:经中试验证,指标成分提取率为66％ ～ 88％,表明优选工艺可行.     

高效液相法测定复方磷酸哌喹片中磷酸哌喹的含量

 目的 建立高效液相色谱法测定复方磷酸哌喹片中磷酸哌喹含量的方法。方法 采用Luna C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为乙腈-水（13∶87，每100 mL水含三氟乙酸50 μL，磷酸40 μL，三乙胺50 μL）；柱温30 ℃；流速1.0 mL·min-1；检测波长345 nm。样品分析结果与药品标准中非水滴定法对照。结果 磷酸哌喹在0.08～0.80 g·L-1内呈现良好的线性关系，r=0.999 9；精密度RSD为0.79% （n=6）；低、中、高3种浓度的回收率分别为105.2%，100.6%，103.6%，RSD分别为0.52%，0.31%，0.28%。结论 与药品标准非水滴定法相比，高效液相色谱法操作简便，节省时间，利于卫生环保；而且专属性强，重现性好，准确度高。     

低温诱导青蒿素生物合成

目的:研究低温处理对青蒿素及其他萜类合成通路的影响。方法:以4℃为胁迫条件,利用高效液相色谱法测定青蒿素含量;硫酸钛沉淀法和N,N-二甲基-对-亚硝基苯胺漂白测定法分别检测黄花蒿叶片过氧化氢(H2O2)和单线态氧(1O2)含量;紫外分光光度法检测过氧化氢酶(CAT)活性;实时荧光定量PCR技术定量分析青蒿素合成途径及竞争途径关键酶基因的表达。结果:4℃处理4h后黄花蒿叶片中1O2和H2O2含量升高,并伴随青蒿素含量和CAT活性逐步提高,4、24和48h后青蒿素含量分别提高20%、65%和80%;4℃处理24h后,青蒿素合成相关基因[3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因(HMGR)、法呢基焦磷酸合酶基因(FPS)、紫穗槐二烯合酶基因(ADS)、细胞色素P450单加氧酶基因(CYP71AV1)、细胞色素P450氧化还原酶基因(CPR)、青蒿醛Δ11(13)双键还原酶基因(DBR2)]的表达普遍上调,其中ADS的表达提高16倍;而青蒿素合成竞争途径的β-石竹烯合酶基因(CS)表达则下调近20倍。结论:低温刺激可能通过产生高浓度活性氧(ROS)促进青蒿素合成前体转化、上调青蒿素合成相关基因表达并抑制竞争途径基因表达等途径促进青蒿素合成。