老年大鼠血脂、载脂蛋白-胆固醇、过氧化脂质含量及单胺氧化酶活性与还少丹的干预作用

目的:探讨由何首乌、熟地、肉苁蓉等中药组成的还少丹对大鼠血脂、载脂蛋白-胆固醇、过氧化脂质含量和单胺氧化酶活性的影响。方法:实验于2005-04在湖南中医学院分子生物学实验室完成。24只健康SD老年大鼠,随机分为对照组和药物组,每组12只。药物组用还少丹水煎液(由何首乌、熟地、肉苁蓉等中药组成)灌胃2mL(含生药7g)/(kg.d),对照组用等量生理盐水灌胃,5d/周,另2d自由饮水,给药80d。大鼠禁食12h后取血,检测血脂和载脂蛋白-胆固醇的含量,测定血清谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量,并取脑组织测定单胺氧化酶活性。结果:21只老年大鼠进入结果分析。①三酰甘油含量:药物组明显低于对照组[(0.97±0.11,1.50±0.93)mmol/L,(t=11.98,P<0.01)]。②低密度脂蛋白-胆固醇:药物组明显低于对照组[(1.99±0.11,2.94±0.12)mmol/L,(t=18.68,P<0.01)]。③谷胱甘肽过氧化物酶活性:药物组明显高于对照组[(37.34±2.00,31.51±2.33)nkat/L,(t=6.25,P<0.01)]。④丙二醛含量:药物组明显低于对照组[(13.79±1.01,17.70±1.41)nmol/mL,(t=5.12,P<0.01)]。⑤单胺氧化酶活性:药物组明显低于对照组[(0.07±0.01,0.24±0.02)nkat/g,(t=13.27,P<0.01)]。结论:①还少丹能降低大鼠血清中三酰甘油、总胆固醇的含量,提高高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白胆固醇的比值,起到抗动脉粥样硬化的效应。②有效地提高大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶活性,抑制大鼠脑内的单胺过氧化物酶活性,产生抗衰老的作用。     

还少丹对老年小鼠清除活性氧能力及DNA端粒长度的影响

目的：观察还少丹对老年小鼠衰老指标活性氧损害程度与DNA端粒长度的影响。方法：实验于2005—01／04在湖南中医学院分子生物学实验室完成，选择24只健康昆明种老年小鼠，随机分为对照组和药物组，各12只。药物组用还少丹水煎液(由何首乌、熟地、肉苁蓉等中药组成)灌胃10μL(含生药10g)／(g&;#183;d)，对照组用等量生理盐水灌胃，每周灌胃5d，共给药70d。小鼠断头取血，离心分离出红细胞，加蒸馏水制成溶血液。溶血液中超氧化物歧化酶含量采用光化学扩增法检测。溶血液中过氧化氢酶含量以过氧化氢分解法检测，同时采血测定溶血液血红蛋白的含量。小鼠肝组织DNA的平均端粒长度应用Southern印迹杂交检测。结果：实验过程中对照组死亡3只，药物组死亡2只。进入结果分析对照组和药物组分别为9和10只。①超氧化物歧化酶活性及过氧化氢酶活性：药物组小鼠显著高于对照组小鼠[(31．41&;#177;2．51)μkat／g，(22．95&;#177;3．69)K／g；(21．36&;#177;3．10)μkat／g，(14．12&;#177;1．96)K／g，(t=7．797，6．387，P&;lt;0．01)]。②肝组织DNA平均端粒长度：药物组小鼠长于对照组[(23．05&;#177;0．50)kb，(17．26&;#177;0．68)kb，(t=21．358。P&;lt;0．01)]。结论：服用还少丹后老年小鼠超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性增加，清除活性氧的能力加强，并可能通过此作用延缓了端粒的缩短，达到了延缓衰老的目的。     

抗衰延寿方对小鼠染色质结构与功能损害的影响

目的:探讨抗衰延寿方对小鼠染色质结构与功能损害的影响。方法:实验在湖南中医学院分子生物学实验室完成,选用60只小鼠,取小鼠骨髓细胞制片,镜检计数姊妹染色单体互换(SCE)、细胞分裂指数和细胞周期。结果:老年小鼠骨髓细胞SCE频率(1.79±0.35)显著高于青年小鼠(0.80±0.13),服用抗衰延寿方的老年小鼠SCE频率(1.16±0.21)显著低于对照组老年小鼠;环磷酰胺造成小鼠骨髓细胞增殖周期延长,SCE频率增加(3.73±0.57)。结论:结果表明,小鼠骨髓细胞SCE频率随增龄而增加,抗衰延寿方可阻抗小鼠骨髓细胞SCE的增龄性改变,并能有效地抑制环磷酰胺所引起的小鼠骨髓细胞分裂增殖与SCE的改变。     

补肾延年丹对老年大鼠全血细胞DNA修复能力的影响

补肾延年丹对老年大鼠全血细胞非程序DNA合成（UDS）的实验结果表明：40秒UF诱导下大鼠全血细胞UDS各组间差异无显著意义（P＞0.05），80秒UV诱导下大鼠全血细胞UDS各组间差异有显著意义（P＝0.05），补肾延年丹大、中、小剂量组UDS均高于老年空白对照组，说明补肾延年丹能提高老年大鼠对UV损伤时DNA的修复能力。     

还少丹对D-半乳糖衰老模型小鼠白介素-2及线粒体DNA含量的影响

目的:探讨还少丹对衰老模型小鼠白介素-2(IL-2)及线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)含量的影响。方法:将40只小鼠随机分成空白对照组、衰老模型组、低剂量药物组和高剂量药物组,每组10只。采用皮下注射D-半乳糖溶液(100 mg/kg)制备亚急性衰老模型,同时用还少丹水煎液灌胃6周。双抗夹心ELISA法测定血清IL-2的含量;分光光度法测定肝、脑组织中mtDNA含量。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠血清IL-2含量明显减少,肝和脑组织mtDNA含量明显增高(均P<0.01)。与模型组比较,还少丹低剂量和高剂量组都能提高衰老模型小鼠血清IL-2的含量,降低肝、脑组织mtDNA的含量,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。结论:还少丹能够提高衰老小鼠的机体免疫功能,降低肝、脑组织中mtDNA的含量,从而起到延缓衰老的作用。     

医学生物化学教学中案例教学法的探索与实践

案例教学法是一种成功的教学模式[1],在我国教育研究的应用中越来越广泛,从法学、到经济学、营销学、临床医学,乃至政治学及计算机……案例教学在教学实践中蓬勃发展,并取得了卓越的成就,推动了教学改革.     

还少丹对D-半乳糖衰老模型小鼠心肌线粒体DNA缺失的影响

目的 探讨还少丹对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老小鼠心肌线粒体DNA(mtDNA)缺失的影响.方法 将40只小鼠随机分为空白对照组、衰老模型组、还少丹低、高剂量组,用D-半乳糖建立衰老模型,分别给予蒸馏水和还少丹水煎液灌胃.连续给药6周后,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增心肌组织mtDNA,经琼脂糖凝胶电泳检测扩增条带,用光密度扫描定量各组mtDNA的缺失率.结果 空白对照组未见mtDNA缺失型扩增条带,其余各组均出现不同程度的缺失型扩增条带;与模型组比较,低、高剂量组小鼠心肌mtDNA缺失率明显降低,差异均具有统计学意义(P＜0.05);而低剂量与高剂量纽之间比较mtDNA的缺失率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 还少丹能减少D-半乳糖诱导的衰老小鼠心肌mtDNA的缺失程度,提示该方能降低mtDNA的氧化损伤,保护mtDNA的结构完整性,从分子水平上为还少丹抗衰老的作用机制提供了一定的实验依据.     

抗衰延寿方对老年小鼠活体骨髓细胞SCE的影响

将昆明种小鼠随机分为青年对照组、老年对照组和老年药物组,观察到老年小鼠活体骨髓细胞姊妹染色单体互换(SCE)频率显著高于青年小鼠:服用抗衰延寿方的老年小鼠SCE显著低于对照老年小鼠.结果表明,小鼠骨髓细胞SCE随增龄而增加;抗衰延寿方可以阻抗小鼠骨髓细胞SCE的增龄性改变.     

还少丹对大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量影响的研究

目的:探讨还少丹对SD大鼠血清及肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(glutath ione peroxidase,GSH-Px)活性及丙二醛(m alod ialdehyde,MDA)含量的影响。方法:测定老年药物组、老年对照组及青年对照组SD大鼠血清及肝组织中GSH-Px活性及MDA含量,GSH-Px活性测定采用DTNB法,MDA含量测定采用TBA法。结果:与青年对照组比较,老年对照组大鼠血清及肝中GSH-Px的活性下降,而MDA的含量升高(P<0.01);与老年对照组比较,老年药物组大鼠血清及肝组织中的GSH-Px活力增高,MDA的含量下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:还少丹能明显升高实验大鼠血清及肝组织中GSH-Px活性,降低MDA含量,说明还少丹有较好的抗衰老作用。     

还少丹对老年大鼠高脂血症模型血脂及体质量的影响

目的观察还少丹对老年大鼠血脂及体质量的影响。方法将老年大鼠随机分为空白组、模型组、药物组,拟用高脂饲料喂养(2%胆固醇、8%猪油、90%基础饲料)80d后分别检测血脂及各组体质量的变化。结果①与模型组比较,药物组能降低血脂中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,分别具有非常显著性意义(P<0.01)。②与模型组比较,药物组体质量下降,具有非常显著性意义(P<0.01)。结论还少丹对老年大鼠具有调节血脂和减肥作用,抑制动脉硬化发生。