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目的研究含人连接蛋白Connexin26(Cx26)基因的真核表达载体构建及其在非洲猴肾细胞(COS-7)中获得稳定、高效表达的方法。方法提取人外周血淋巴细胞RNA,经逆转录制备成cDNA,设计特异性引物,用PCR方法从cDNA中扩增Cx26基因,将其定向插入真核表达载体pCI-neo中获得pCI-Cx26重组子-采用酶切法和测序法鉴定。用脂质体将pCI-Cx26转染COS-7细胞,经G418筛选,获得阳性克隆。用RT-PCR和SDS-PAGE检测对表达产物进行检测。结果从人外周血RNA制备而成的cDNA中可扩增出预期大小的Cx26基因片段,pCI-Cx26经双酶切测序证实构建成功。RT-PCR和SDS-PAGE检测到pCI-Cx26在COS-7细胞中获得稳定、高效表达。结论本研究成功构建了人连接蛋白Cx26基因重组真核表达载体pCI-Cx26:pCI-Cx26脂质体转染COS-7细胞,可见Cx26基因在COS-7细胞中获得稳定、高效的表达。该结果为今后进行pCI-Cx26基因治疗Cx26基因突变引起的遗传性耳聋的研究奠定了实验基础。 相似文献
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[目的]描述并分析广东省1990~2005年狂犬病流行特征,为狂犬病的预防与控制提供科学依据。[方法]分析广东省1990~2005年狂犬病监测资料和犬用狂犬病疫苗销售资料,对2003-2004年资料完整的244例病例的个案资料进行分析,用EXCEL12.0软件对相关资料进行分析。[结果]狂犬病发病率波动于0.02/10万~0.38/10万;1990~1996年共报告狂犬病病例364例,以清远市(54例)和佛山市(48例)最多,2001~2004年共报告661例,以茂名市(117例)和梅州市(84例)最多:8月份发病人数最多。个案调查结果表明:87.71%病例暴露后伤口未经及时正确处理,97.55%病例未及时规范接种人用狂犬病疫苗,97.13%病例未及时局部注射抗狂犬病免疫球蛋白。[结论]进入上世纪90年代以来,广东省狂犬病发病率曾逐年下降,但1996年以后,狂犬病疫情呈逐年上升趋势。犬只免疫率低;暴露后伤口处理不规范及未及时全程免疫接种是造成狂犬病疫情反弹的重要原因 相似文献
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目的:探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的药物治疗方案及临床药师实施药学监护方法.方法:以2013年12月收治的1例AECOPD患者为例,临床药师结合最新的诊治指南,协助医师为AECOPD患者制订治疗方案并实施全程的药学监护.结果:临床药师通过实施药学监护,参与整个治疗过程,及时发现和解决了患者药物治疗的问题,为临床合理用药提供了意见.结论:临床药师对AECOPD患者实施药学监护工作,可以提高药物治疗效果,避免和减少药品不良反应/事件. 相似文献
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目的 筛选出青黛炮制过程中显著影响靛蓝生成的因素,优化最佳水平组合,确定生成靛蓝的最佳工艺。方法 应用HPLC法测定粗靛中靛蓝;并以鲜叶产靛蓝的量(即靛蓝的转移率)为指标,采用Plackett-Burman设计,Box-Behnken设计效应面分析等统计学方法,筛选出显著影响因素及最佳水平组合。结果 青黛的浸泡、打靛工艺确定为浸泡前不除蜡,浸泡液pH 3.5,溶剂用量与鲜叶质量比例为13,避光、浸泡24 h,温度25 ℃,通气时间30 min,加氨水调节打靛前pH值至9。结论 系统地优化了青黛浸泡、打靛环节的工艺,阐明了青黛炮制过程中各个影响因素对有效成分靛蓝的影响,为炮制原理的研究奠定了基础。 相似文献
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青黛炮制过程中靛蓝定向生成的工艺设计与优化 总被引:5,自引:2,他引:3
目的筛选出青黛炮制过程中显著影响靛蓝生成的因素,优化最佳水平组合,确定生成靛蓝的最佳工艺。方法应用HPLC法测定粗靛中靛蓝;并以鲜叶产靛蓝的量(即靛蓝的转移率)为指标,采用Plackett-Burman设计,Box-Behnken设计效应面分析等统计学方法,筛选出显著影响因素及最佳水平组合。结果青黛的浸泡、打靛工艺确定为浸泡前不除蜡,浸泡液pH 3.5,溶剂用量与鲜叶质量比例为13,避光、浸泡24 h,温度25℃,通气时间30 min,加氨水调节打靛前pH值至9。结论系统地优化了青黛浸泡、打靛环节的工艺,阐明了青黛炮制过程中各个影响因素对有效成分靛蓝的影响,为炮制原理的研究奠定了基础。 相似文献
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目的分析广州市某区2008年疑似麻疹病例血清IgM抗体的检测情况,为进一步制订麻疹防制策略提供科学依据。方法采用酶联免疫吸附试验对2008年广州市某区疑似麻疹病例进行麻疹血清IgM抗体检测。结果共采集疑似麻疹病例血清406例,实验室确诊病例157例,阳性率为38.67%。不同性别、年龄组、免疫史组间IgM抗体阳性率差异有统计学意义,女性IgM抗体阳性率较高、8月龄组IgM抗体阳性率较高、有免疫史组的阳性率低于无免疫史及免疫史不详组;不同采样时间IgM抗体阳性率不同,出疹后1d采集的血清阳性率最低。结论检测麻疹IgM抗体对病例的快速确诊、及时采取控制措施起到关键作用,建议加强麻疹的常规免疫和强化免疫,加强对流动儿童计划免疫管理,减少易感人群。 相似文献
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目的建立pNPG法测定马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的活性,研究马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质,为进一步阐明青黛炮制原理提供依据。方法采用pNPG法考察马蓝叶中β-葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件。结果最适反应条件为总反应体积1 mL,反应时间45 min,底物pNPG体积0.2 mL,浓度25 mmol/L,缓冲液pH值6,反应温度55℃。在此条件下研究马蓝叶的粗酶液中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质,结果表明该酶在30~60℃热稳定性较差。该酶在pH 5.0~7.0比较稳定,而在酸性条件下酶活下降较快,酶的pH值稳定性范围较窄。酶在4℃下的保存稳定性较好。结论确定了测定马蓝叶中β-葡萄糖苷酶活性的最佳条件,探索了马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的酶学性质,该酶的热稳定性、pH值稳定性和保存稳定性的研究为青黛炮制原理的研究奠定了理论依据。 相似文献