基于均匀设计法对酸枣仁镇静催眠有效组分的配伍研究

目的 优选酸枣仁中3种具有镇静催眠作用的主要有效组分(总皂苷、总黄酮、总生物碱)最佳配伍.方法 采用均匀设计法将70只小鼠随机分为7组,分别为对照组及给药A～F组,观察各组小鼠自主活动情况;采用阈上剂量戊巴比妥钠(45 mg/kg)协同睡眠试验,以小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间为评价指标,筛选酸枣仁镇静催眠有效组分的最佳配伍.对所得有效组分最佳配伍的药效进行比较和验证实验.结果 与对照组比较,给药A、C、E组小鼠自主活动减少(P＜0.05、0.01),C、D组小鼠站立次数略有减少(P＜0.05).在阈上剂量戊巴比妥钠协同试验中,给药组C～F睡眠潜伏期显著缩短(P＜0.01),B～F组睡眠时间显著延长(P＜0.01).经多元统计分析,酸枣仁镇静催眠有效组分的最佳配伍组合为总皂苷200mg/kg、总黄酮0 mg/kg、总生物碱20 mg/kg.结论 应用均匀设计与药效学相结合确定中药有效组分配伍的方法是可行的.验证实验表明,酸枣仁有效组分的最佳配伍组合可以达到与原药材相同的疗效.     

冬凌草多糖RPPSIIa的分离纯化及其性质研究

目的从冬凌草Rabdosia rubescens中提取分离获得多糖组分RPPSIIa,并分析其结构性质和探讨免疫活性,为冬凌草临床应用与进一步开发利用提供参考。方法主要采用水提醇沉透析得冬凌草多糖,经分级醇沉,Sephdex G-100凝胶色谱柱纯化得RPPSIIa,应用HPLC、IR、LC、UV等方法对冬凌草多糖进行组成结构分析及理化性质研究,通过MTT比色法观察该组分在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果冬凌草多糖RPPSIIa为均一组分,其单糖组成为鼠李糖、葡萄糖,二者比为7︰93,RPPSIIa具有典型的多糖吸收峰,其结构中存在α-型糖苷键;RPPSIIa在5～100μg/mL能有效刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,5、50μg/mL均能有效增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的淋巴细胞增殖反应。结论多糖RPPSIIa是由冬凌草中提取的均一葡聚糖,具有较强的免疫生物活性。     

HIV-1蛋白酶与其抑制剂相互作用的分子动力学研究

目的:研究抑制剂利托那韦与HIV-1蛋白酶相互作用的分子识别机制。方法:利用HIV-1蛋白酶与利托那韦晶体结构复合物和HIV-1蛋白酶晶体结构进行4 ns的分子动力学模拟。结果:利托那韦对HIV-1蛋白酶骨架运动影响不大,与HIV-1蛋白酶Ile50、Asp128和Asp129形成稳定氢键作用。利托那韦与Asp25、Ala28、Asp29、Gly49、Ile50、Asp124、Asp128、Asp129、Gly148、Ile149、Val181和Ile183总相互作用能均较大。结论:HIV-1蛋白酶通过上述12个残基的非价键作用对利托那韦进行生物识别。     

蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B活性位点Asp48突变理论研究

目的：利用点突变研究PTP1B中Asp48的重要性。方法：理论研究采用分子力学原理,使用HyperChem7．0的AMBER99力场。首先对门P1B中Asp48进行点突变,然后利用Polak—Ribiere共轭梯度法对复合物结构进行优化。计算优化结构的静电相互作用能、范德华相互作用能、二面角等指标,并通过比较突变后这些指标的变化,分析酶与底物的相互作用变化。结果：突变后活性位点的形状、PTP1B的空间构象及底物与催化相关残基的相互作用能均未发生显著变化。而D48K、D48I和D48T则导致底物与非催化相关残基的相互作用降低。结论：点突变对活性位点的形状、PTP1B的空间构象和催化活性的影响较小,但D48K、D48I和D48T会导致底物与PTP1B的结合能力下降。     

冬凌草多糖RPPSIIa的分离纯化及其性质研究

目的 从冬凌草Rabdosia rubescens中提取分离获得多糖组分RPPSIIa,并分析其结构性质和探讨免疫活性,为冬凌草临床应用与进一步开发利用提供参考。方法 主要采用水提醇沉透析得冬凌草多糖,经分级醇沉,Sephdex G-100凝胶色谱柱纯化得RPPSIIa,应用HPLC、IR、LC、UV等方法对冬凌草多糖进行组成结构分析及理化性质研究,通过MTT比色法观察该组分在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果 冬凌草多糖RPPSIIa为均一组分,其单糖组成为鼠李糖、葡萄糖,二者比为7︰93,RPPSIIa具有典型的多糖吸收峰,其结构中存在α-型糖苷键;RPPSIIa在5～100 μg/mL能有效刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,5、50 μg/mL均能有效增强刀豆蛋白A（ConA）诱导的淋巴细胞增殖反应。结论 多糖RPPSIIa是由冬凌草中提取的均一葡聚糖,具有较强的免疫生物活性。     

基于均匀设计法对酸枣仁镇静催眠有效组分的配伍研究

目的 优选酸枣仁中3种具有镇静催眠作用的主要有效组分（总皂苷、总黄酮、总生物碱）最佳配伍。方法 采用均匀设计法将70只小鼠随机分为7组,分别为对照组及给药A～F组,观察各组小鼠自主活动情况;采用阈上剂量戊巴比妥钠（45 mg/kg）协同睡眠试验,以小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间为评价指标,筛选酸枣仁镇静催眠有效组分的最佳配伍。对所得有效组分最佳配伍的药效进行比较和验证实验。结果 与对照组比较,给药A、C、E组小鼠自主活动减少（P＜0.05、0.01）,C、D组小鼠站立次数略有减少（P＜0.05）。在阈上剂量戊巴比妥钠协同试验中,给药组C～F睡眠潜伏期显著缩短（P＜0.01）,B～F组睡眠时间显著延长（P＜0.01）。经多元统计分析,酸枣仁镇静催眠有效组分的最佳配伍组合为总皂苷200 mg/kg、总黄酮0 mg/kg、总生物碱20 mg/kg。结论 应用均匀设计与药效学相结合确定中药有效组分配伍的方法是可行的。验证实验表明,酸枣仁有效组分的最佳配伍组合可以达到与原药材相同的疗效。