朱砂根多糖的分离纯化和结构初步分析

目的对朱砂根多糖进行分离、纯化和结构初步分析。方法采用DEAE-cellulose-52纤维素层析对其进行分离纯化,并通过GPC、GC-MS、1H NMR和13C NMR等方法对其结构进行初步分析。结果得到两个主要多糖组分Z-C1和Z-C2,均由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、核糖和半乳糖等单糖组成,并都含有糖醛酸。Z-C1的数均相对分子量和重均相对分子量分别为5.46×103和9.47×103;Z-C2的数均和重均相对分子量分别为2.52×104和3.37×104。结论朱砂根多糖组分Z-C1和Z-C2都是由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、核糖和半乳糖等单糖和糖醛酸组成的酸性杂多糖,但单糖的摩尔比不同。     

抗流感中药冰香散提取工艺的正交实验研究

目的优选冰香散的最佳提取工艺。方法以得油率为评价指标,采用正交试验设计法考察颗粒粒度、加水量、浸泡时间、蒸馏时间4个因素对提取效果的影响,通过综合评分筛选出冰香散的最佳提取工艺。结果综合考虑各因素的影响及生产实际需要,确定的最佳提取工艺为：冰香散药材打成中粉,加入10倍量水,浸泡1．5小时,共水蒸馏提取6小时。结论该工艺条件对冰香散挥发油的生产具有一定的指导和参考意义。     

中药艾可清胶囊的质量标准研究

[目的]建立中药复方制剂艾可清胶囊的定性定量分析方法.[方法]采用硅胶薄层色谱对复方制剂中淫羊藿、虎杖、女贞子、黄芩、甘草等药材进行定性鉴别;采用反相高效液相色谱测定制剂中相应的指标成分淫羊藿苷、虎杖苷、黄芩苷、甘草酸的含量.[结果]采用硅胶薄层色谱能检出药材指标成分;高效液相色谱法测定,淫羊藿苷在0.18～1.41μ...     

HPLC-ELSD法测定艾可清胶囊中毛冬青皂苷甲的含量

目的:建立艾可清胶囊中毛冬青皂苷甲的硅胶薄层色谱(TLC)鉴别方法和高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)检测的含量测定方法。方法:自药材中分离鉴定毛冬青皂苷甲;确定TLC条件;采用ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)及保护柱,以甲醇-0.2%冰醋酸(67∶33)为流动相,ELSD检测器,漂移管温度95℃,载气流速2.5 L.min-1,柱温30℃,流速1.0 mL.min-1作为HPLC条件。结果:设立的TLC条件可以从复方制剂中检出毛冬青皂苷甲;建立的HPLC含量测定方法,毛冬青皂苷甲在1.92～9.60μg呈良好线性关系(r=0.999 5),平均回收率为99.85%,RSD 1.04%。结论:建立的毛冬青皂苷甲的硅胶TLC鉴别方法和HPLC-ELSD含量测定方法具有操作快捷、方法准确的特点,可作为毛冬青药材及其复方制剂的质量控制方法。     

中药体外防治甲型H1N1流感病毒实验研究

目的研究中药防治流感的体外效果。方法采用鸡红细胞凝集实验以及MTT法观察三种常见的代表性预防流感的方药("扶正"预防类-玉屏风制剂;祛邪预防类-银翘散制剂;外用芳香辟秽类制剂-冰香散)对流感病毒A/FM/1/47(H1N1)鼠肺适应株的预防作用。结果冰香散在最小无毒浓度15.6μg/ml时对流感病毒A/FM/1/47(H1N1)鼠肺适应株有良好的预防作用。银翘散和玉屏风散仅在毒性浓度下对流感有预防作用,无毒浓度下均不能抑制病毒。阳性对照药利巴韦林在0.25～2 mg/ml浓度内均有较好的抑制流感病毒作用。冰香散提前加药,冰香散对病毒的半数抑制浓度(IC50)为5.89μg/ml,治疗指数(TI)为3.28;冰香散与病毒同时加药,冰香散挥发油对流感病毒的直接抑制作用的IC50为9.56μg/ml,TI为2.02。而先加流感病毒吸附后再加冰香散,则未能对流感病毒有抑制作用,其治疗指数TI小于0.05。结论冰香散体外对甲型流感病毒FM1有预防作用。玉屏风散制剂和银翘散制剂仅在毒性浓度下对流感有预防作用,无毒浓度下均不能抑制病毒。其防治流感病毒的作用可能通过体内免疫机制而实现。     

牛蒡子苷与苷元诱导人前列腺癌PC3细胞非凋亡性死亡的研究

[目的]观察牛蒡子苷(ARC)与牛蒡子苷元(ARG)对人前列腺癌PC3细胞增殖的影响,并探讨其相关机制.[方法]采用不同浓度的ARC与ARG作用于PC3细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测其对细胞增殖的影响;瑞姬氏染色观察用药前后细胞形态变化;Annexin V-异硫氰酸荧光素-碘化丙啶(FITC/PI)双染结合流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况;Western-blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase 3的表达情况.[结果]ARC与ARG均能抑制PC3细胞的增殖,此抑制作用具有时间和浓度依赖性,两药物作用48 h组细胞存活率均显著低于24 h组(P＜0.01);ARC与ARG处理组的细胞形态变化表现为细胞膜回缩,细胞质减少,胞膜紧贴胞核,胞液纤维网状结构;流式细胞术检测发现:与空白对照组比较,ARC组与ARG组可显著增加Annexin V-FITC/PI双染阳性率(P＜0.05或P＜0.01),PI单染阳性率在浓度为20μmol/L和5μmol/L时也显著增加(P＜0.01),但Annexin V-FITC单染阳性率均无显著变化(P＞0.05).Western-blot分析结果显示:ARC或ARG作用细胞48 h时,可显著降低Bcl-2表达水平(P＜0.01),但对Bax和Caspase-3蛋白的表达无显著影响(P＞0.05).[结论]ARC与ARG可诱导PC3细胞发生非凋亡性死亡,其作用机制可能与诱导Bcl-2表达下调相关.     

树豆菧类化合物longistylin A和longistylin C的检测

目的:建立以药物活性和专属性菧类成分longistylin A与longistylin C为评价指标的树豆(木豆)药材质量控制方法.方法:采用硅胶柱色谱分离纯化有关成分,光谱技术鉴定化学结构;反相高效液相色谱法测定指标成分的含量.结果:从树豆叶分离鉴定了2种指标成分longistylin A和longistylin C;采用Thermo BDS Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水(80:20)为流动相可使指标成分获得良好分离;longistylin A和longistylin C分别在0.002 88～0.057 6μg和0.011 2～0.224 μg呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.9％,97.2％,RSD分别为2.4％,2.2％.结论:建立了以树豆叶中药物活性菧类成分为指标的药物分析方法,可用于树豆(木豆)药材的质量控制.     

通痹合剂乙酸乙酯部位调节CIA大鼠细胞免疫的作用机制研究

目的评价通痹合剂乙酸乙酯部位(TBHJ)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠的影响,揭示其抗炎抗风湿的作用机制。方法牛Ⅱ型胶原混合弗氏完全佐剂于Wistar大鼠尾根部注射造模,随机分为模型组,甲氨蝶呤(MTX)组和TBHJ治疗组,容积法评价后肢肿胀度;给药后30 d,乳腺钼靶机大鼠四肢摄片,计分法评价各组大鼠X光片四肢96块骨侵蚀和100个关节间隙变化;处死动物,取后肢踝关节苏木素-伊红染色,观察中性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润,滑膜细胞增生和软骨破坏的情况;免疫组化法观察关节内IL-17和CD28表达;RT-PCR法比较CD28 mRNA表达。结果 CIA大鼠出现严重的关节炎症和破坏,TBHJ给药后7 d即可明显抑制CIA大鼠关节肿胀;给药后30 d,TBHJ和MTX可明显抑制大鼠关节肿胀和关节破坏,与模型组比较有统计学差异(P<0.01);TBHJ可明显抑制CIA大鼠中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞的浸润、滑膜增生和软骨破坏(P<0.05),MTX可抑制滑膜增生和软骨破坏;CIA大鼠IL-17,CD28 mRNA和蛋白表达明显增加,TBHJ可明显抑制IL-17和CD28。结论 TBHJ具有抑制关节免疫炎症和关节破坏的作用,其机制可能是通过抑制T细胞第二信号分子CD28的表达,减少IL-17的产生实现的。     

艾可清胶囊提取工艺

目的:优选中药复方制剂艾可清胶囊的提取工艺.方法:以淫羊藿苷、虎杖苷、甘草酸、黄芩苷的提取率为指标,采用正交试验设计筛选提取工艺条件,结合综合评分优选最佳工艺条件.结果:优选出的提取条件为30倍量65％乙醇加热回流提取淫羊藿2次,每次3h,提取液减压浓缩至相对密度为1.10(60℃);3倍量20％乙醇室温放置8h去除叶绿素;10倍量80％乙醇提取虎杖、黄芩、甘草等混合药材粗粉3次,每次2h.结论:经中试验证,指标成分提取率为66％ ～ 88％,表明优选工艺可行.     

牛蒡子苷对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响及其作用机制

【目的】探讨牛蒡子苷(arctiin)对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响及其作用机制。【方法】采用不同浓度牛蒡子苷作用于3T3-L1前脂肪细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测其对细胞增殖的影响;油红O染色及分光光度法分析脂肪细胞的分化程度;实时荧光定量PCR检测细胞过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators activatedreceptorγ,PPARγ)和CCAAT/增强子结合蛋白α(CCTTA enhancer binging proteinα,C/EBPα)的表达情况。【结果】牛蒡子苷对3T3-L1细胞增殖无显著性影响(P>0.05),但可显著抑制3T3-L1前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化(P<0.05或P<0.01),且呈一定剂量依赖关系;与空白对照组比较,牛蒡子苷可显著降低PPARγmRNA、C/EBPαmRNA表达水平(P<0.05或P<0.01)。【结论】牛蒡子苷能抑制3T3-L1前脂肪细胞的成脂分化,其机制可能与其能抑制脂肪细胞分化相关调控因子PPARγ和C/EBPα的表达有关。