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肝素寡糖通过抑制PKC-α影响血管平滑肌细胞增殖的作用(英文) 总被引:1,自引:0,他引:1
为考察肝素寡糖对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用,并探索其相关细胞内信号转导机制,采用cell-based ELISA法、RT-PCR法、Western blotting法和免疫细胞化学法检测细胞内PKC-α蛋白水平和mRNA水平;采用RT-PCR法检测c-jun、c-myc和c-fos等3种原癌基因的mRNA水平。结果显示,肝素寡糖可以抑制新生牛血清诱导的PKC-α和原癌基因的表达,这可能是肝素寡糖抑制血管平滑肌细胞增殖的机制之一;流式细胞实验结果显示,肝素寡糖能将细胞阻滞于G0/G1期,从而阻断细胞周期进程。综上所述,肝素寡糖可能通过抑制PKC-α表达,进而抑制原癌基因的表达,阻断细胞G1/S期转换,从而抑制血管平滑肌细胞的增殖。 相似文献
2.
番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用及作用机制 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用及作用机制。方法:采用组织块法体外培养牛胸主动脉平滑肌细胞,以含10%小牛血清的培养基制备牛胸主动脉平滑肌细胞增殖模型。细胞分为正常组、阴性对照组、模型组及1、0.1和0.01μmol·L^-1三个不同浓度的番茄红素实验组。实验采用MTT法测定牛胸主动脉平滑肌细胞的增殖活性,采用流式细胞术测定细胞周期分布,并测定了细胞内的SOD活性和MDA含量。结果:番茄红素在三个实验浓度下都能显著抑制血管平滑肌细胞的增殖。一方面,番茄红素抑制了G1期细胞进入S期;另一方面,番茄红素在1和0.1μmol·L^-1的浓度下,能明显增强细胞中的SOD活性,同时,在三个给药浓度下,细胞内的MDA含量都显著降低。这些作用都具有浓度依赖性,并且与模型组比较均有统计学差异。结论:番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞的增殖有抑制作用,并且这种抑制作用可能与它能够抑制细胞进程和它的强抗氧化性能够抑制细胞中的脂质过氧化和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的形成有关。它有望成为防治动脉粥样硬化的一种新的药物。 相似文献
3.
采用HPLC法对低分子量肝素钠(LMWH)分子量及其分布进行了测定.流动相选用2.84%的硫酸钠溶液,采用紫外检测器与示差折光检测器串联连接,紫外检测波长234 nm,色谱柱为Protein-Pak Φ8 mm×300 mm.结果表明:所测三批LMWH的重均分子量分别为3 158 D,4 387D,4 226D;其中分子量小于8 000D的量分别为86.2%,89.4%,87.8%,符合英国药典1993年增补版标准. 相似文献
4.
山药水溶性多糖的化学及体外抗氧化活性 总被引:47,自引:0,他引:47
山药经热水提取、去蛋白、乙醇沉淀,SephadexG-100纯化得山药多糖(RP),分子量为8.1×104。气相色谱分析RP主要含葡萄糖及少量岩藻糖。经过碘酸氧化及Smith降解后气相色谱分析结果显示各组分的摩尔比为岩藻糖-丙三醇-赤藓醇是1:1.24:6.42,证明RP主要由带有分枝的1→4连接的吡喃糖苷骨架构成,同时含有少量1→3键型的岩藻糖。该多糖能降低维生素CNADPH及Fe(2+)-半胱氨酸诱发的微粒体过氧化脂质的含量,并对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧自由基(O(2-))及Fenton反应体系产生的羟自由基(OH-)有清除作用。 相似文献
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西红花苷对氧化性低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:探讨西红花苷对氧化性低密度脂蛋白(Ox-LDL)致内皮细胞损伤的保护作用.方法:在体外培养牛主动脉内皮细胞中,加入不同剂量的西红花苷培养12h后,再加入50μg·mL-1的Ox-LDL继续培养24h,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)的含量,测定细胞中一氧化氮合酶(NOS)的活性;利用流式细胞仪观察其对Ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡的影响.结果:西红花苷(10,10-7,10-6mol·L-1)可剂量依赖性地抑制LDH活性及外漏(P<0 01),提高细胞内NOS的活性(P<0.01),使细胞分泌的NO含量升高(P<0.01);西红花苷对Ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡有抑制作用.结论:西红花苷对Ox-LDL致内皮细胞损伤有保护作用. 相似文献
6.
酶法制备低分子量肝素及其活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用肝素酶Ⅰ(heparinaseⅠ,EC 4.2.2.7)对肝素进行控制性降解,分别在反应16,32,48 h终止反应,超滤离心粗分级后,用Bio-Gel P6低压柱色谱分离纯化,得到3组不同分子量范围的肝素寡糖混合物。用生色底物法和羊血浆法测定抗Ⅹa活性和抗Ⅱa活性。不同反应时间得到的肝素寡糖的抗Ⅹa和抗Ⅱa活性分别为82.4/40.3、21.5/11.8和5.6/4.5 IU/mg,其抗Ⅹa/抗Ⅱa活性值分别为2.04、1.82和1.24。结果表明降解16 h所得寡糖可供制备符合小分子肝素药物质控要求的产品。 相似文献
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国产与进口低分子量肝素钠注射液治疗不稳定性心绞痛的比较 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:比较国产与进口低分子量肝素钠注射液(LMWH)在治疗不稳定性心绞痛方面的临床疗效。方法:治疗组与对照组各30例,腹壁皮下脂肪内注射,剂量为100抗XaIU/(kg·12h),连续7d。结果:国产LMWH治疗不稳定性心绞痛显效率及有效率分别为33.3%和83.3%,与进口低分子量肝素钠注射液(法安明)的30.0%和80.0%无显著差异。结论:国产LMWH对不稳定性心绞痛的治疗安全有效,且与进口同类产品相一致。 相似文献
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肝素寡糖对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞炎症的影响及分子机制研究 总被引:1,自引:1,他引:0
以脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞HUVECs炎症损伤,探讨肝素寡糖对炎症的影响及其分子机制。实验分为空白组(0.5%血清培养基)、模型组(LPS+0.5%血清培养基)及给药组(LPS+0.5%血清培养基+0.01、0.1、1 μmol/L HDO),采用活性氧实验检测细胞内活性氧簇水平,Western blot检测VCAM-1、p38、p-p38及核转录因子NF-κB等关键蛋白的表达水平。结果显示0.01、0.1和1 μmol/L的HDO可抑制100 μg/mL LPS诱导的HUVECs炎症因子VCAM-1表达水平,较弱的影响细胞中NF-κB分布,并下调信号通路中关键蛋白p38和p-p38表达。结果表明,HDO可能通过抑制炎症信号通路中关键蛋白的表达水平来抑制炎症因子的表达,从而起到抗炎作用。 相似文献
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目的: 构建重组巴氏杆菌透明质酸合成酶(rPmHAS)原核表达系统,获取高纯度、有活性的rPmHAS。方法: 利用大肠杆菌BL-21 pET32a(+)表达重组蛋白,镍亲和柱纯化,夹心竞争ELISA法检测酶活性。结果: Western blotting 检测显示特异性条带,重组蛋白正确表达,镍亲和柱纯化后得到重组蛋白的纯度可达90%。结论: 成功构建了pET32a(+)/rPmHAS重组质粒并实现了目的蛋白高效可溶表达,为PmHAS性质相关研究及单一相对分子质量寡聚透明质酸的合成奠定了基础。 相似文献
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目的:制备复方维生素B6缓释微丸胶囊,并建立其含量测定方法以控制质量.方法:采用单因素实验法,对复方维生素B6缓释微丸的制备工艺进行优选,并采用高效液相色谱法同时测定最佳工艺条件下制备的胶囊中维生素B6和叶酸的含量.结果:复方维生素B6缓释微丸胶囊由微丸A、B、C灌装而成,其中微丸A、B采用粉末上药法制备,最佳工艺为:主机转速200~350 r·min-1、喷浆泵速20~40 r·min-1、供粉速度40~60 r·min-1、喷雾压力0.1~0.3 Mpa;微丸C采用溶液上药法制备,最佳工艺为:流化温度40~60 ℃、雾化压力0.1~0.3 Mpa、蠕动泵速10~20 mL·min-1、沸腾负压0.2~0.5 Mpa.测得所制备胶囊中维生素B6和叶酸分别在74.20~593.6 mg·L-1 (r=0.999.9)和1.022~8.162 mg·L-1 (r=0.999 8)范围内呈线性关系,平均回收率分别为99.53%(RSD=0.44%)和98.38%(RSD=0.87%)(n=3).3批样品中维生素B6的平均质量分数分别为99.68%、98.53%和98.98%,叶酸的平均质量分数分别为98.54%、 98.63%和99.04%.结论:优选工艺稳定,定量方法简便准确、可靠且专属性强,可用于复方维生素B6缓释微丸胶囊的质量控制. 相似文献