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1.
目的建立生鳖甲与醋鳖甲抗肝纤维化有效物质部位的高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱,探讨其炮制前后药效物质的差异。方法运用毛细管区带电泳法,75um×57cm未涂层石英毛细管,运行缓冲液为20mmol/L磷酸氢二钠-100mmol/L三羟甲基氨基甲烷(1mol/LNaOH调pH值至12.0),分离电压为18kV,检测波长为254nm,柱温为20℃,分别建立了10批生鳖甲和10批醋鳖甲有效物质部位的指纹图谱,并进行对比研究。结果生鳖甲指纹图谱共标定了17个共有峰,HPCE图谱相似度均大于0.94;醋鳖甲指纹图谱共标定了19个共有峰,HPCE图谱相似度均大于0.93;而10批生鳖甲图谱与醋鳖甲对照指纹图谱的相似度降低,为0.86~0.92;且10批醋鳖甲图谱与生鳖甲对照指纹图谱的相似度亦降低,为0.86~0.93。结论鳖甲炮制前后化学成分及其含量发生了变化,且炮制后产生了一些新的有效成分。  相似文献
2.
鳖甲抗肝纤维化有效部位的初步筛选研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:筛选鳖甲抗肝纤维化的有效部位。方法:传代培养的LX-1与鳖甲提取物的Bj1~Bj8共8个部位共同培养72h后,3H-TdR法检测对TGF-β1刺激的LX-1细胞增殖的影响,再将传代培养的HSC-T6与鳖甲的Bj61~Bj68(为Bj6的进一步的分离部位)共同培养72 h后,采用MTT比色法测定各浓度组HSC-T6的增殖情况。结果:3H-TdR法检测结果表明Bj4、Bj6、Bj7部位抑制LX-1细胞增殖,MTT比色法结果表明Bj66和Bj67部位有较强的抑制HSC-T6细胞增殖的作用。结论:Bj66和Bj67为鳖甲的有效部位。  相似文献
3.
目的:实验研究鳖甲水煎液药物血清对肝星状细胞的影响和作用机制。方法:双抗夹心ELISA法检测鳖甲水煎液药物血清对TGF-β1刺激的LX-1细胞胶原及调节因子表达的影响,MTS法检测鳖甲水煎液药物血清对TGF-β1刺激的LX-1细胞增殖的影响,Westernblot检测鳖甲水煎液药物血清对TGF-β1刺激的LX-1细胞活化、胶原合成及细胞外基质等表达的影响。结果:鳖甲水煎液药物血清能明显抑制TGF-β1刺激的LX-1细胞的增殖;显著下调TGF-β1刺激的LX-1细胞Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原、HA与α-SMA蛋白表达;并作用于TGF-β1下游信号通道蛋白,抑制Smad3及P-smad3等因子表达,从而阻断TGF-β1等因子的生物学效应;能显著上调MMP1、MMP3蛋白表达,同时通过抑制TIMP-1蛋白表达、更有利于改善胶原酶活性,从而促进ECM的降解。在实验浓度范围内,鳖甲水煎液药物血清对肝星状细胞的作用呈现量效关系,作用显著优于目前有效的抗肝纤维化药物或细胞因子IFN-γ,与扶正化瘀胶囊作用相当。结论:鳖甲水煎液药物血清能抑制肝星状细胞活化增殖及细胞外基质合成分泌、促进细胞外基质降解吸收,调控细胞因子水平及信号传导通路,从而发挥抗肝纤维化的作用。本实验进一步验证了鳖甲抗肝纤维化药效学的有效性,为鳖甲抗肝纤维化的药效物质基础研究及其活性组分抗纤维化新药研发、保健品开发和临床医疗提供科学依据和研究思路。  相似文献
4.
目的比较鳖甲生品和醋制品对大鼠肝星状细胞(HSC—T6)增殖的影响,为鳖甲醋制品抗肝纤维化的临床应用提供依据。方法传代培养的HSC—T6与鳖甲生品和醋制品超声提取物,鳖甲生品和醋制品回流提取物共同培养72h后,采用MTT比色法测定各浓度组HSC—T6的增殖情况。结果两种提取方式相互验证了鳖甲生品和醋制品对HSC—T6细胞增殖均有抑制作用,且鳖甲醋制品的作用优于鳖甲生品。结论鳖甲醋制品的抗肝纤维化作用优于鳖甲生品。  相似文献
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