外周血单个核细胞内人类免疫缺陷病毒DNA和RNA定量对病毒转录活性的区分

目的基于人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中HIV-1总DNA和RNA定量检测结果对感染细胞内病毒的转录活性进行区分。方法采集2017年10月至2018年12月于哈尔滨医科大学附属第四医院感染科就诊的HIV-1感染者血液样本,分离PBMCs细胞,采用PCR荧光探针法对PBMCs细胞内HIV-1总DNA和RNA进行定量检测,并计算两者比值(Ratio)。根据Ratio值筛选出HIV-1转录活跃组样本和相对非活跃组样本,另外选择健康人PBMCs样本作为对照组。对3组样本进行基因转录组表达谱检测以及人口特征差异性检验,并对基因表达谱检测结果进行主成分分析以验证对3组样本病毒转录活性区分的准确性。结果从60例感染HIV-1患者的PBMCs样本中筛选出HIV-1转录活跃组样本(10例)和相对非活跃组样本(11例),另外选择6例健康人PBMCs样本作为对照组。其中转录活跃组样本Ratio值为165.2~738.93,平均为(339.27±189.68);相对非活跃组Ratio值为4.67~42.39,平均为(17.65±11.78)。转录活跃组和相对非活跃组样本间的CD4+T细胞计数(P=0.049)和Ratio值(P<0.001)差异均具有统计学意义;3组样本年龄(P=0.989)和性别(P=0.650)分布差异无统计学意义。对3组样本的PBMCs基因表达谱主成分分析结果显示:对照组与HIV-1感染者(包括转录活跃组和相对非活跃组)间区分明显。转录活跃组和相对非活跃组间有部分样本重合,同时结果也显示当HIV-1感染者的CD4+T淋巴细胞计数与健康人无显著差异时,其细胞内的基因表达与健康人接近。结论基于HIV-1总DNA和RNA定量检测结果及两者间比值可以较好地区分PBMCs内病毒转录活性。HIV-1感染细胞内部病毒的不同转录激活状况可导致其基因表达谱的异质性。     

2型糖尿病视网膜病变患者血清白脂素水平的变化及意义

目的 观察糖尿病视网膜病变(DR)患者血清白脂素(asprosin)水平的变化，探讨asprosin在DR中的作用及意义。方法 选取2型糖尿病(T2DM)患者75例，其中糖尿病无视网膜病变(NDR)患者21例(NDR组),糖尿病非增殖期视网膜病变(NPDR)患者34例(NPDR组),增殖期视网膜病变(PDR)患者20例(PDR组);纳入同期健康对照者19例(NC组)。收集其一般资料及生化指标并比较，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清asprosin水平。Asprosin与各指标之间的相关性分析采用Spearman相关分析。PDR的影响因素分析采用logistic回归分析。结果与NC组比较，T2DM组患者血清asprosin水平明显升高(P<0.01)。与NDR组比较，PDR组患者血清asprosin水平明显升高(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示，T2DM组患者血清asprosin水平与性别具有明显相关性，女性高于男性，与空腹C肽呈负相关(P<0.05);PDR患者血清asprosin水平与收缩压(SBP)、空腹胰岛素(FINS)、空腹C肽呈负相...     

如何提高皮肤科临床实习生教学质量的探索

皮肤病与性病学是一门直观性很强的形态学科,皮损形态多样,病种复杂繁多,不容易辨别,皮肤性病的诊治又与其他学科差别大,专业性极强。临床实习是医学生临床工作开始的重要阶段,故而临床实习教学是高等医学教育的关键环节,是理论结合实际、培养高素质医学人才的重要环节。文章在皮肤科的实习教学中探索采用多种模式(包括PBL教学模式、多媒体辅助教学、翻转课堂等)相结合的方法,激发学生对皮肤病与性病学的学习兴趣和学习热情,培养和提高学生的临床思维能力、临床实践技能以及独立学习的能力,从而进一步探索如何提高皮肤科临床实习生的教学质量。     

腺样囊性癌TrkC差异表达的PDX模型的建立与鉴定

目的：建立并鉴定腺样囊性癌（Adenoid cysticcar cinma,ACC）关于ＴｒｋＣ差异表达的人源肿瘤异种移植模型（Patient-Derived tumor Xenograft,ＰＤＸ）。方法：收集北京同仁医院头颈外科收治的腺样囊性癌患者的新鲜肿瘤组织，皮下接种至免疫缺陷鼠体内，并不断传代至新一批的小鼠体内直至肿瘤稳定生长。分析患者ACC肿瘤组织在免疫缺陷动物体内自然生长状态下的组织病理特征。结果：本次实验共收集ACC标本10例，其中5例成功建立PDX模型，3例完成鉴定。建立的PDX模型病理形态和组织结构与患者肿瘤组织保持一致；3例PDX模型TrkC表达呈现不同的特点。结论：PDX模型可以很好地保留患者的肿瘤异质性，有助于深入研究ACC发病机理，为以TrkC为靶点的临床前药物筛选提供动物模型。     

利奈唑胺治疗难治性耐药结核性脑膜炎1例及文献复习

目的:提高对利奈唑胺治疗难治性耐药结核性脑膜炎的认识。方法:报道1例利奈唑胺治疗难治性耐药结核性脑膜炎患者的临床表现、影像所见、治疗和预后,并复习相关文献进行讨论。结果:患者为青年女性,临床表现为发热、头痛,影像学提示"双肺弥漫性粟粒性阴影、脑实质弥漫性结节影、脑积水",脑脊液培养结核分枝杆菌阳性,药敏提示耐多药,应用利奈唑胺后,患者临床症状逐渐缓解,肺部阴影吸收,脑脊液多次培养均阴性,随访至今,未再复发。结论:利奈唑胺在耐药结核性脑膜炎中可能有较好地应用前景。     

固相萃取-超快速液相色谱串联质谱测定食品中五氯酚

目的建立了食品中五氯酚的固相萃取-超快速液相色谱串联质谱分析方法。方法样品用8%三乙胺的乙腈水溶液(70/30,V/V)提取,用MAX固相萃取小柱净化。以乙腈和5 mmol/L乙酸铵(内含0.1%甲酸)为流动相,采用梯度洗脱方式在Shim-pack XR-ODS Ⅲ色谱柱(150 mm×2.0 mm,2.2μm)上进行分离,以电喷雾负离子模式进行质谱检测,内标法定量。结果五氯酚在0.5~50.0μg/L范围内具有良好的线性关系(r0.999),方法的定量限为0.4~0.5μg/kg,检出限为0.12~0.15μg/kg,样品的回收率为82.0%~108.0%,精密度为1.89%~5.09%(n=6)。结论该方法灵敏度高、重现性好,可用于多种食品中五氯酚的检测。     

第六讲 避免误诊的思维方法

编者按刘振华、陈晓红两位作者是国内首次提出误诊学理论,主编第一部<误诊学>专著,并创建了"中国误诊文献数据库"的学者.在10年的误诊学理论与误诊文献调查研究工作的基础上,总结提出了导致误诊与避免误诊的系统思维方法.本刊特辟专栏陆续刊登系列讲座,供临床医生参考.