中药配方颗粒辅料麦芽糊精的HPLC定量检测与中红外光谱半定量检测

目的 建立中药配方颗粒辅料麦芽糊精的检测方法,为中药配方颗粒质量评价提供分析技术支持。方法 建立配方颗粒中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的HPLC定量检测方法,根据样品经糖化酶水解后的葡萄糖增加量换算出麦芽糊精含量。基于中药浸膏与麦芽糊精不同比例混合物的中红外光谱（mid-infrared spectroscopy,MIRS）特征峰差异,建立配方颗粒中麦芽糊精的半定量检测方法。结果 所建立的HPLC方法可以准确定量检测配方颗粒中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖。如果中药浸膏自身含有较多可经糖化酶水解产生葡萄糖的成分（淀粉、蔗糖等）,HPLC检测配方颗粒中麦芽糊精时存在系统性正误差,可通过中药浸膏酶解后葡萄糖增加量、待测样品酶解后蔗糖减小量等部分修正正误差。如果中药浸膏自身少含或不含淀粉、蔗糖等可经糖化酶水解产生葡萄糖的成分,HPLC检测配方颗粒中麦芽糊精时存在系统性负误差,换算公式偏差、麦芽糊精纯度、样品处理损失等导致根据样品酶解后葡萄糖增加量计算的麦芽糊精“检测含量”预期低于根据生产投料计算的麦芽糊精“名义含量”。麦芽糊精含量越高,配方颗粒MIRS中1200～900 cm-1区域的...     

1,8-桉叶油素自微乳给药系统的制备及质量评价和细胞摄取研究

目的优化1,8-桉叶油素(1,8-cineole,1,8-Cin)自微乳给药系统(1,8-cineole self-microemulsion drug delivery system,1,8-Cin-SMEDDS)处方,对其进行表征并进行细胞摄取考察。方法通过绘制伪三元相图,确定1,8-Cin-SMEDDS有效自乳化区域,进行初步处方筛选。以粒径和载药量为指标,采用星点设计-效应面法对1,8-Cin-SMEDDS处方进行优化并验证。荧光显微镜观察高糖损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对1,8-Cin-SMEDDS的摄取情况。结果 1,8-Cin-SMEDDS的最佳处方是大豆油(7.5%)与1,8-Cin(22.5%)为混合油相,HS15(56%)为乳化剂,乙醇(14%)为助乳化剂,滴加纯水至8m L得半透明略带蓝色乳光液体。透射电镜观察其外观呈球形液滴,激光粒度Zeta电位测定仪测得平均粒径为(131.68±1.44)nm,Zeta电位为(-10.03±1.63)m V;HPLC法测得包封率为(99.890±0.012)%,载药量为(224.750±0.028)mg/g。HUVEC...     

湖北地区不同年龄、不同性别人群新型冠状病毒核酸检测结果回顾性分析

目的:回顾性分析湖北地区新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)核酸检测结果在不同年龄、不同性别间的差异,为新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)疫情防控提供依据。方法:选定84 611名受检者为研究对象,分为0～、10～、20～、30～、40～、50～、60～、70～和80～共9个年龄段组,每个年龄段又分为男性组和女性组。将每组各个受检者的2019-nCoV核酸检测结果进行统计分析。结果:全部受检人群2019-nCoV核酸的阳性率为5.33%,以仅N基因阳性为主,占全部阳性病例的比重为66.42%。2019-nCoV核酸阳性率随着受检者年龄的增长而逐步增高,峰值出现在60～年龄段。女性2019-nCoV核酸整体阳性率(6.21%)明显高于男性(4.64%),差异有统计学意义(P<0.05),主要是20～60岁年龄段的女性2019-nCoV核酸阳性率比男性高(各年龄段组内女性与男性比较,均P<0.05)。结论:2019-nCoV核酸阳性率与年龄、性别相关,20～60岁女性比男性更易感染,...     

血清胱抑素C与尿转化生长因子β1在重度子痫前期患者中的临床意义

目的探讨重度子痫前期患者血胱抑素C（Cys C）及尿转化生长因子β1（TGF—β1）的临床意义。方法选择重度子痫前期患者35例为实验组，正常晚孕妇女35例为对照组，测定两组血清中的CysC与尿液中的TGF—β1水平。结果重度子痫前期患者血清Cys C与尿TGF-β1较对照组均明显增高（均P〈0．01）；重度子痫前期患者组中，血清CysC水平与尿TGF-β1呈正相关（r=0．581，P〈0．05）。结论在重度子痫前期中检测血清CysC与尿TGF-β1水平，有助于评价肾功能损害程度，对重度子痫前期的诊断和治疗具有一定的指导意义。     

基于蛋白质相对分子质量与二级结构的阿胶珠炮制程度评价方法研究

目的 探索根据蛋白质相对分子质量与二级结构评价阿胶珠炮制程度的可行性。方法 使用凝胶渗透色谱（GPC）表征阿胶与阿胶珠的蛋白质相对分子质量分布,使用傅里叶变换红外光谱（FTIR）表征蛋白质二级结构。根据阿胶与阿胶珠的蛋白质相对分子质量与二级结构对温度的响应行为,评估阿胶珠炮制阶段的蛋白质变性程度。结果 阿胶珠正常炮制过程中,蛋白质相对分子质量无明显变化,蛋白质二级结构随炮制程度增加而逐渐改变。炮制太过的阿胶珠中物质发生明显的热解,凝胶色谱上出现低相对分子质量的热解产物峰,红外光谱上蛋白质与油脂特征峰也有改变。结论 阿胶炮制成阿胶珠的过程中,蛋白质分子的二级结构逐渐改变。红外光谱酰胺Ⅱ带峰位置的移动,能够反映蛋白质二级结构的变化程度,可用于阿胶珠炮制程度连续评价与终点判断。凝胶色谱是否具有低相对分子质量的热解产物峰,可用于判断阿胶珠炮制是否太过。     

结核病3种实验诊断方法比较与分枝杆菌耐药性分析

目的 比较结核病3种实验诊断方法,分析目前深圳市分枝杆菌耐药情况.方法 统计2009～2010年深圳市第三人民医院临床确诊结核病患者痰标本涂片镜检、培养和PCR检测结果,并对分枝杆菌菌种及对治疗药物耐药情况进行统计分析.结果 共有640例资料齐全的结核病确诊病例入选,其中肺结核537例、结核性胸膜炎82例、结核性脑膜炎21例,分枝杆菌涂片镜检阳性率分别为44.1%、5.3%和13.3%,分枝杆菌培养法阳性率分别为59.9%、12.9%和30.0%,PCR检测阳性率分别为52.2%、16.7%和26.3%.经分枝杆菌菌种鉴定,人型结核分枝杆菌占67.0%、牛型结核分枝杆菌占16.8%、非结核分枝杆菌占16.2%,人型结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素的耐药率分别为16.4%、14.8%、4.7%和15.6%.结论 目前结核病实验诊断方法主要有涂片镜检、培养和PCR检测,病原菌以人型结核分枝杆菌为主,对3种主要抗结核药物的耐药率较高.另外,菌阴结核约占40%,目前对菌阴结核、活动性结核与陈旧性结核的诊断和鉴别诊断困难,期待新的方法.     

某地区结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药相关基因突变特征分析

目的了解深圳地区结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼的耐药相关基因的突变特点。方法 60株结核分枝杆菌临床分离株通过全自动快速分枝杆菌培养鉴定系统(BACTEC-MGIT960)进行鉴定和药敏分析。在这60株菌株中,针对包括利福平耐药决定区(RRDR)在内的rpoB基因和异烟肼耐药相关位点katG315、inhA-15、kasA269、kasA312进行PCR扩增,并将扩增产物T-A克隆后进行测序。结果在60株结核分枝杆菌临床分离株中,检出利福平耐药株45株,敏感株15株;异烟肼耐药株41株,敏感株19株;利福平和异烟肼同时耐药的有14株。在45株利福平耐药株中,rpoB基因RRDR突变发生率为91.1%(41/45),共检测到12种突变形式,主要突变位点在531、526、516、533,以Ser531Leu突变最常见,占rpoB发生基因突变株的51.2%(21/45)。在41株异烟肼耐药株中,katG315位点有29株发生突变,包括28株katG315(AGC-ACC)和1株katG315(AGC-AAC)突变,突变发生率为70.7%(29/41);inhA-15位点有9株发生突变,均为(C-T)突变,突变发生率为21.95%(9/41)。kasA基因未发现常见突变形式。结论深圳地区结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药相关基因突变位点与国内外研究基本一致,但各位点频率有所不同。     

广东地区2126例泌尿生殖道支原体感染及药敏结果分析

目的 了解广东地区泌尿生殖道支原体感染的情况以及对药物的敏感性.方法 采用支原体培养、鉴定、计数及药敏一体化试剂盒对2126例泌尿生殖系感染患者进行检测及药物敏感性试验.结果 2126例中支原体阳性1080例,阳性率为50.80%.其中解脲支原体(Uu)、人型支原体(Mh)及解脲和人型支原体(Uu Mh)混合感染的阳性率分别为37.53%(798例)、2.72%(58例)、10.54%(224例).Uu对12种抗菌药物敏感性依次是克拉霉素(89.15%)、美满霉素(87.00%)、强力霉素(86.00%)和四环素(81.80%),Mh敏感性较高的依次是强力霉素(95.20%)、美满霉素(95.20%)和交沙霉素(84.10%),Uu Mh对12种抗生素的敏感性均较差.结论 广东地区支原体感染主要以Uu为主.其次是Uu Mh混合感染;Uu、Mh和Uu Mh三者对抗生素的敏感性存在一定的差异,临床上应根据支原体培养及药敏试验结果合理用药,以最大限度地控制新耐药菌株的产生.     

PCR-RFLP分析16s-23srDNA间区序列鉴定分枝杆菌菌种

目的探讨16S～23srDNA间区序列DNAPCR扩增和限制性酶切分析在分枝杆菌分类鉴定中的价值。方法对19种分枝杆菌标准株的16S～23SrDNA间区序列DNA进行PCR扩增并对扩增产物进行限制性内切酶HaeⅢ、MSP1消化反应，分析不同菌种扩增片段及其限制性片段长度多态性的差异。结果，PCR扩增结果显示：分枝杆菌一般扩增出1～2条带，缓慢生长分枝杆菌扩增片段在340～480bP，快速生长分枝杆菌扩增片段集中在470～575bP，单从扩增产物的琼脂糖凝胶电泳只能鉴定33．3％的受试菌种，酶切结果显示：分枝杆菌的酶切图谱彼此不同。结论16S～23SrDNA间区序列DNAPCR扩增和RFLP分析是分枝杆菌分类鉴定的一种快速、有效的方法。     

心理应激对大鼠血清铁浓度的影响及其机制

目的了解心理应激对大鼠血清铁浓度的影响,并在此基础上探讨心理应激影响血清铁浓度的可能机制。方法将大鼠分为:正常对照组、心理应激组,心理应激组又分为应激1w、2w和应激2w后脱离应激环境1w组。给予正常饲料喂养,适应性饲养1w后开始应激实验,持续1w和2w,持续2w后脱离应激原正常饲养1w。分别以原子吸收法检测血清铁和肝、脾组织铁含量,Western blot法检测肝组织铁调素(hepcidin)表达。结果(1)大鼠心理应激1w和2w血清铁浓度与对照组比明显下降;(2)大鼠脱离应激环境1w血清铁浓度变化与正常对照组比无显著差异;(3)心理应激组大鼠肝、脾组织铁含量与正常对照组比均明显升高,同时伴有肝组织铁调素表达增高。结论心理应激引起大鼠血清铁浓度明显降低,这可能与应激使肝组织铁调素表达增高导致肝、脾铁含量增多有关。