光强对野菊生理生化特性的影响

通过分析光强对野菊生长及生理生化特性的影响,揭示适于野菊生长的光照强度,为野菊种植提供参考依据。分别在100%,80%,60%,40%,20%全自然光强水平下种植野菊,生长旺盛期测定野菊相关生长,光合色素含量、光合参数、荧光参数等光合生理及保护酶系统指标,采取透射电镜技术观察叶绿体超微结构。结果表明:野菊叶片在80%以上全自然光强下出现不同程度发黄现象,株高和茎粗在60%全自然光强达到最大值,60%以上全自然光强下野菊分枝数显著增加;光合色素含量和净光合速率均与光强负相关,光合参数与叶绿素荧光参数则随光强下降呈先上升后下降趋势,60%全自然光强下野菊气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率、水分利用效率及PSⅡ实际光化学量子产量等生理指标均处于最高水平;60%~80%全自然光强下野菊叶绿体结构无明显异常,全自然光强下基质片层破碎,20%~40%全自然光强下叶绿体数量、淀粉粒数量与体积均明显降低;随光强下降,SOD与CAT活性呈下降趋势,POD活性呈先上升后下降趋势,MDA含量呈上升趋势。综上,野菊在20%~100%全自然光强下均能生长,但在60%全自然光强下生长最佳。     

老鸦瓣芽茎发育相关MYB转录因子家族鉴定与分析

目的鉴定老鸦瓣Amana edulis MYB转录因子家族成员并分析其表达模式,以期发现老鸦瓣芽茎发育相关MYB基因。方法利用老鸦瓣转录组数据经Pfam和PlnTFDB数据库鉴定含有MYB保守结构域的MYB转录因子,通过构建系统进化树并根据拟南芥MYB分组信息为老鸦瓣R2R3-MYB基因划分亚组,进行2R-MYB结构域可视化分析和GO富集分析,挑选在芽茎中特异表达的MYB基因并用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证表达。结果共鉴定出93个含有MYB保守结构域的MYB转录因子,其中53个R2R3-MYB分为15个亚组,GO注释为生物过程的子类别最多,在芽茎中特异表达的12个MYB基因中有11个基因在芽茎发育前期至中期的表达量显著下降,有4个基因在芽茎发育中期至后期的表达量显著上升。结论获得的53个R2R3-MYB转录因子为进一步研究老鸦瓣MYB转录因子家族影响芽茎发育过程的分子机制奠定了基础。     

通关藤种子萌发条件的研究

目的研究通关藤Marsdenia tenacissima的生长发育规律,为通关藤的人工栽培育种以及规范化种植提供科学依据。方法以采自云南省马关县的当年成熟通关藤种子为材料,研究发芽床、浸种时间、温度、光照处理及p H值对种子萌发的发芽势、发芽率及根茎长的影响。结果砂床为通关藤种子适宜的发芽床;浸种时间对种子的发芽影响不显著;种子最适宜发芽的温度为25~30℃;适宜温度条件下,光照与否对通关藤种子发芽率的影响不明显,温度不适时,光照为影响种子发芽的主要因素;偏酸性的逆境对通关藤种子萌发的影响比碱性的逆境影响小。结论适合通关藤种子萌发的条件为发芽前浸种24 h、30℃、p H为7.0~7.5的砂床环境下光照培养。     

不同干燥方法对光慈姑加工性能和品质影响研究

为探索不同干燥方法对光慈姑加工性能和品质的影响,为光慈姑规范化加工方法提供依据,研究了普通晾晒、蒸制、水煮、恒温烘干(40,50,60℃)等8种不同干燥方法对光慈姑外观性状、折干率、硬度、复水率及水分、灰分、浸出物和多糖含量等指标的影响。结果表明,普通晾晒及40℃恒温干燥的光慈姑复水率最佳,但所需时间长、折干率小、硬度大,色泽差,且组织结构发生了明显的变形和皱缩;60℃恒温干燥的光慈姑干燥时间短、含水量低、多糖含量高,但其他各项指标均较差。烫制处理(蒸制和水煮)后的光慈姑虽干燥时间缩短、外观品质较佳,但浸出物及多糖含量降低。50℃恒温干燥光慈姑外观品质与市售光慈姑较接近,硬度最小,折干率最大,复水率较高,浸出物及多糖含量较高,且水分、灰分含量适中。综合考虑,建议选择50℃恒温干燥的方法,与传统方法相比,缩短了干燥时间,还能保证药材质量。     

药用菊花叶片主要活性成分比较

对不同栽培类型药用菊花叶片主要活性成分进行分析,为进一步中药新资源开发利用提供依据.该研究以UV-VIS测定不同栽培类型药用菊花叶片总黄酮(TF)含量,HPLC测定木犀草苷(GA),槲皮苷(QU),绿原酸(CA),3,5-O-二咖啡酰奎宁酸(CQ)的含量.结果显示安徽歙县晚贡菊TF量最高为7.13%;安徽亳州大亳菊GA量最高为33.45 mg·g^-1;江苏射阳红心菊QU量最高为29.25 mg·g^-1;江苏射阳长瓣菊CA量最高为13.14 mg·g^-1;浙江桐乡大洋菊CQ质量分数最高为7.35 mg·g^-1.不同产地不同栽培类型药用菊花叶片中主要活性成分含量差异显著,且不同产地相同栽培类型之间差异亦显著,结果表明药用菊花叶片可以作为中药新资源开发的新来源.     

杭菊黄酮醇合酶基因的原核表达与重组蛋白体外活性研究

从杭菊转录组数据库中筛选并通过RACE技术克隆出1条黄酮醇合酶基因(暂命名Cm FLS),简单序列分析表明Cm FLS基因全长1 235 bp,包含1个1 008 bp的开放阅读框(ORF),编码335个氨基酸。预测得到的Cm FLS编码的蛋白相对分子质量为37.96 k Da,等电点(p I)为5.41,构建进化树发现Cm FLS与菊科其他种植物同源性很高。利用原核表达技术成功诱导出大小43 k Da左右的重组融合蛋白,同时使用Ni-NTA树脂分离纯化出重组融合蛋白,并确定使用含250 mmol·L-1咪唑的Ni-native buffer洗脱效果最好。将纯化后的重组融合蛋白进行体外催化反应,然后将反应的产物萃取后进行HPLC分析,结果显示Cm FLS重组融合蛋白在特定缓冲液及反应条件下能够将二氢槲皮素催化生成槲皮素,表明Cm FLS编码的功能性蛋白在杭菊黄酮生物合成途径中具有双加氧酶活性。以上研究结果为进一步研究Cm FLS的功能、阐明FLS酶的功能机制奠定了基础,同时为从分子水平调控杭菊黄酮醇成分代谢及体外催化合成黄酮醇提供新思路。     

淹水胁迫对杭菊F3'H基因表达及其下游产物含量的影响

为探究淹水胁迫对杭菊黄酮合成途径中的关键基因类黄酮3'-羟化酶基因(F3'H)的表达和活性成分的影响,该实验克隆了杭菊F3'H基因(暂命名CmF3'H),并进行生物信息学分析;同时在杭菊花芽分化期进行淹水胁迫,以β-actin为内参基因,使用Real-time PCR检测CmF3'H的相对表达量;然后使用HPLC测定杭菊CmF3'H下游产物及其他指标成分含量。通过研究得到1条总长1 562 bp的CmF3'H基因,其中开放阅读框长1 527 bp,编码508个氨基酸,构建进化树发现CmF3'H与菊科其他种植物同源性很高;Real-time PCR结果表明CmF3'H对淹水胁迫有明显响应,在淹水24 h后表达量最高,约为对照组的9倍,解除胁迫12 d后恢复正常水平;HPLC结果显示淹水处理后的杭菊F3'H所催化形成的下游产物木犀草素和木犀草苷含量均显著高于对照组,同时发现其他2种指标成分绿原酸和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量也显著高于对照组。因此,杭菊在淹水胁迫下可以通过调节CmF3'H的表达来调控下游产物的合成,从而对淹水胁迫做出应答,而且花芽分化期进行淹水胁迫可以显著增强杭菊活性成分的积累。     

响应面法优化连钱草三萜酸类成分的超声辅助提取工艺

目的:采用响应面法优化超声辅助提取连钱草三萜酸类成分的工艺条件,提高连钱草中三萜酸类成分的得率。方法:以超声时间、液料比及乙醇浓度为主要因素,以齐墩果酸和熊果酸类成分得率为响应值,根据Box-Behnken原理,采用三因素三水平响应面试验设计进行优化。结果:液料比对连钱草中齐墩果酸和熊果酸的提取效果影响最大,其次是超声时间和乙醇浓度。响应面法优化超声辅助提取连钱草中三萜酸类成分的最佳工艺条件为:以88%乙醇为提取溶剂,超声时间为60 min,液料比为78 mL/g,在此条件下齐墩果酸和熊果酸的含量实测值分别为0.8504和1.7367 mg/g。经验证,并与同参数下热浸法、回流法的提取效果相比,超声提取效果最好,提取更为完全。结论:响应面法优化所得的连钱草三萜酸类成分提取工艺稳定可行,可用于连钱草的开发、利用及质量评价。     

不同产地野菊花及土壤中重金属元素含量比较研究

采用ICP-MS测定野菊花和土壤样品中铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、砷(As)、铜(Cu)5种重金属元素的含量。利用Pearson相关、通径分析分析经纬度、海拔对野菊花中重金属元素含量的影响。探讨野菊花中重金属元素含量与生长地经纬度、海拔以及土壤中重金属元素含量之间关系。结果表明野菊花对Cd元素具有较高富集性;野菊花对5种重金属元素的吸收具有协同作用;海拔直接作用于野菊花中Pb,Cd含量的积累并且为正效应;纬度直接正效应作用于野菊花中Hg,Cu含量的积累;经度对Cd含量的影响是经度直接作用的负效应。地理因素对野菊花中重金属元素含量的积累效应是不同的,直接作用和间接作用之间存在一定的交互性。野菊花药材对不同重金属种类具有不同的吸收富集特性,在控制野菊花重金属含量及药材质量时要充分考虑地理因素对药材质量的影响,选择合适的地理区域开展收购行为;选择生态环境良好的地区建立中药材种植基地,或采取一定的农业措施减少野菊花药材对重金属元素的吸收,在进行化学成分的研究的同时,加强对重金属有效形态的研究,关注药材安全性。     

大黄液对小鼠骨髓细胞保护作用的实验研究

大黄是一种用途广泛、生物效应明显的常用中药。近年来,随着化学分离技术及各种光谱分检技术的进展,对大黄的各种生物活性物质的药理作用机理及其应用的研究有了很大的收获。认为大黄不仅有泻下实热、通里攻下作用,还有消炎镇痛、收敛止血、抗菌、抗病毒及抗肺瘤作用。但大黄对骨髓细胞保护作用的研究尚未见报告。我们应用微核测定方法,检测大黄对小鼠骨髓细胞的保护作用,以探讨大黄新的药效价值。现报道如下: 材料与方法一、材料: 1.大黄提取液:大黄系青海产,经过酒精提取,制成大黄口服液。2.环磷酰胺:批号88418,上海第十二制