海洋纤溶活性化合物FGFC1和FGFC2影响血小板聚集特性的研究

目的：研究新型海洋双吲哚纤溶活性化合物FGFC1对血小板聚集的影响,发现纤溶活性化合物FGFC1与血小板相关因子变化的关系,同时比较双吲哚化合物FGFC1和单吲哚化合物FGFC2作用于血小板的异同。方法：从新鲜兔血收集血小板,调整反应体系血小板密度,以乙酰水杨酸为阳性对照,采用微量比浊法分析FGFC1和FGFC2对血小板聚集率的影响,用酶联免疫法测定FGFC1和FGFC2对血小板生理因子含量的变化。结果：FGFC1对ADP和AA诱导的血小板聚集具有抑制作用,最大抑制率分别达到42.58%±1.7%和47.82%±2.18%;FGFC2对ADP、AA和胶原诱导的血小板聚集均具有抑制作用,最大抑制率分别为50.12%±1.02%、45.28%±1.09%和50.28%±2.12%。FGFC1与FGFC2均能提升血小板内环磷酸腺苷含量,且FGFC2能明显降低血小板内血栓素A2含量。结论：海洋双吲哚纤溶活性化合物显著抑制血小板聚集,FGFC1通过影响血小板环磷酸腺苷的含量实现抑制血小板聚集,FGFC2可能通过不止一种途径抑制血小板聚集。吲哚化合物抑制血小板聚集与分子结构密切相关。     

纳洛酮在新生儿肺炎呼吸衰竭抢救中的应用

目的探讨纳洛酮在新生儿肺炎呼吸衰竭抢救中的应用效果。方法随机选择2011年12）1—2012年12月收治的新生儿肺炎呼吸衰竭患者68例,分为对照组和观察组各34例。对照组实施常规治疗,观察组在此基础上加上纳洛酮治疗。结果观察组总有效率94．12％,对照组总有效率76．47％,差异有统计学意义（P〈0．05）;观察组患儿的肌张力、呼吸频率以及发绀改善情况,均明显优于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在新生儿肺炎呼吸衰竭抢救中应用纳洛酮,有助于改善患者呼吸功能及肌张力,提高临床抢救效果。     

海绵共附生真菌Nigrospora sp.的次级代谢产物及PD-1/PD-L1抑制活性研究

目的 研究海绵Callyspongia sp.共附生真菌Nigrospora sp.中化学成分以及生物活性。 方法 利用正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和半制备型反相高效液相色谱(RPLC)等方法对该菌株乙酸乙酯提取物进行分离纯化;通过核磁共振谱(NMR)、质谱(MS)等技术并结合文献报道数据分析鉴定化合物结构;采用均相时间分辨荧光(HTRF)法检测化合物的PD-1/PD-L1结合抑制活性。结果 分离得到7个已知化合物,分别为punctaporonin D (1),punctaporonin E (2),punctaporonin F (3),desuccinoylpunctaporonin C (4),(20S, 22E, 24R)-麦角甾-7, 22-二烯-3β, 5α, 6β-三醇 (5),(22E, 24R)-麦角甾-3β-羟基-5α, 9α-环氧-7, 22-二烯-6-酮 (6),麦角甾-7, 22-二烯-6β-甲氧基-3β, 5α-二醇 (7)。在体外生物活性检测中,化合物6显示出PD-1/PD-L1结合抑制活性,其IC50值为22.5 μmol/L。结论 化合物4为新天然产物,化合物1-3和化合物6为首次从该属真菌中分离得到。化合物6显示PD-1/PD-L1结合抑制活性。     

海洋双吲哚化合物溶解大鼠脑微血栓的纤溶作用

目的 检测海洋双吲哚生物碱FGFC1对大鼠脑微血栓的纤溶作用。方法 静脉注射异硫氰酸荧光素-纤维蛋白诱导大鼠脑微血栓形成，低场核磁共振血栓成像和组织切片评价脑微血栓动物模型构建；颈静脉注射给药FGFC1，荧光比色法检测大鼠血浆荧光强度，ELISA方法检测纤维蛋白降解产物和纤溶酶原活性。结果 低场核磁共振血栓成像和HE染色组织切片显示异硫氰酸荧光素-纤维蛋白诱导大鼠脑部密度增强和脑血管管壁增厚；冷冻组织切片显示脑血管存在荧光亮斑；血浆荧光强度显示2 h时异硫氰酸荧光素-纤维蛋白诱导大鼠脑微血栓形成；当FGFC1给药剂量为5 mg/kg时，给药后2 h大鼠血浆FDP、D-D及PLG活性分别为595.24 ng/mL、5.70 ng/mL和86.98 IU/L，与空白对照组差异显著。结论 异硫氰酸荧光素-纤维蛋白诱导大鼠形成脑微血栓模型，FGFC1能够增强脑微血栓动物模型的纤溶活性，实现脑微血栓溶解；海洋纤溶化合物FGFC1具有发展为溶解脑微血栓药物的潜力。     

一株产类胡萝卜素海洋细菌的分离及系统分类学研究

目的 对一株分离自我国东海海域160 m深处产类胡萝卜素的海洋细菌进行形态学、生理生化特性及分子水平的系统分类学研究.方法 通过细菌形态学特征观察、生长条件、生理生化特征测定、全细胞脂肪酸成分分析、16S rRNA序列扩增、测序、比对及构建系统发育进化树,研究了该菌株的系统分类学特性;并通过高效液相色谱对该菌株的类胡萝卜素产出特性进行了分析.结果 该菌株与考克氏菌属(Kocuria sp.)相似度最高,顺-7-棕榈油酸/顺-6-棕榈油酸为该菌株的主要脂肪酸组分.结论 该菌株属于考克氏菌属,暂定名为考克氏菌CAR-red(Kocuria sp.CAR-red)株.     

水鲨头皮胶原蛋白分离及其部分特性研究

目的从水鲨头皮分离得到胶原蛋白并研究其部分生化特性。方法水鲨头皮用不同浓度的氢氧化钠溶胀，去离子水清洗至中性，经胃蛋白酶限制性酶解，离心，上清液经透析后冷冻干燥，得到胶原蛋白制品。用聚丙烯酰胺凝胶电泳、差式扫描量热仪（DSC）、圆二色谱仪等研究了分离得到的胶原蛋白的特性。结果胶原蛋白的回收率为鲜重的2．9％-4．1％；在十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电脉（SDS—PAGE）上呈现清晰的3条谱带，相对分子质量分别为205000、134000、118000，热变性温度为69℃。结论分离得到的胶原蛋白可进一步用于微囊剂、纳米材料等生化材料的研究。     

阿克拉霉素A毫微囊制备工艺及抑瘤试验

本文以氰基丙烯酸正丁酯（ＢＣＡ）为囊材制备了阿克拉霉素Ａ毫微囊（ＡＣＭ－Ａ－ＮＣ），利用均匀设计方案选出了较佳处方，加冻干赋型剂制得了阿克拉霉素Ａ毫微囊冻干品，冻干前后的平均粒经分别为（１２０±３４）ｎｍ和（１４６±３３）ｎｍ，应用凝胶过滤色谱法得阿克拉霉素Ａ的包封率为４７．６％，并进行了ＡＣＭ－Ａ－ＮＣ的ＬＤ５０测定以及对Ｓ１８０肉瘤，Ｐ３８８白血病的抑瘤实验，结果表明，ＡＣＮ－Ａ－ＮＣ降低了ＡＣＭ－Ａ的毒性，其抗癌活性也有所改善。     

加味双黄连颗粒剂解热作用的实验研究

1　实验材料　动物 :Ｗｉｓｔａｒ大白鼠 ,体重 15 0～ 2 0 0ｇ ,110只 ,雄性 ,由哈尔滨医科大学动物学部提供。药品与试剂 :加味双黄连颗粒剂 (由双花、黄芩、连翘、人工牛黄等组成 ) ,哈尔滨医科大学附属第一医院药剂部提供 ,批号 :970 42 5 ;双黄连冲剂 ,哈尔滨中药一厂生产 ,批号 :96 0 70 2 ;2、4—二硝基苯酚 ,上海试剂三厂生产 ,批号 :95 12 18;鲜啤酒酵母悬浊液 ,哈尔滨啤酒厂提供。2　方法与结果2 1　加味双黄连颗粒剂对 2、4—二硝基苯酚所致大鼠发热体温的影响[2 ] 　取大鼠 5 5只 ,随机分为 5组 ,每组 11只 ,分别为阴性对照组(…     

盐效应分离纤溶活性化合物FGFC1

目的探索通过盐效应分离长孢葡萄穗霉FG216(Stachybotrys longispora 216)发酵液中纤溶活性化合物FGFC1(fungi fibrinolytic compound 1)的方法。方法长孢葡萄穗霉FG216经过种子液培养和发酵培养获得的发酵液经浓缩后添加氯化钠、氯化铵和氯化钙至不同饱和度,用乙酸乙酯萃取,通过HPLC检测FGFC1的分离效果,并分析FGFC1的质谱和光谱特性。结果随着氯化钠、氯化铵和氯化钙的饱和度从20%升高到90%,氯化钠和氯化钙的盐效应分离作用效果呈现逐渐增强的趋势,60%饱和度的氯化钠能达到18.8 mg/mL的FGFC1提取率,是甲醇分离方法的118%,采用盐效应分离和用甲醇分离获得的FGFC1的质谱和光谱特性一致。结论用氯化钠盐效应分离长孢葡萄穗霉FG216发酵液中FGFC1是一种有效的分离方法,该盐效分离结果符合盐效分离的基本理论。     

温和条件下分离马胶鲨皮胶原蛋白的方法及其部分特性研究

目的探讨分离马胶鲨皮胶原蛋白的方法以及马胶鲨皮胶原蛋白的部分生物化学特性。方法马胶鲨皮经清洗、浸泡、匀浆、离心得上清液。沉淀重复上述的提取过程，合并上清液，加硫酸铵沉淀胶原蛋白，回收的沉淀溶于磷酸盐缓冲液，经葡聚糖凝胶过滤后，蛋白溶出液被冷冻干燥。用聚丙烯酰胺凝胶电泳法、差示扫描量热仪法、圆二色谱仪法表征了通过上述磷酸盐缓冲液溶胀分离法获得的胶原蛋白的特性。结果用磷酸盐缓冲液溶胀分离法从马胶鲨皮分离得到胶原蛋白，胶原蛋白的回收率为鲜重的3．2％～3．4％；分离的胶原蛋白在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现清晰的三条谱带，分子质量分别为205000、134000、118000；马胶鲨皮胶原蛋白的最高热变性温度为47℃；分离的马胶鲨皮胶原蛋白在空间结构上以β-折叠为主，并包含有大量的无规卷曲。结论本研究所制备的高纯度胶原蛋白可用于生物医学材料的进一步研究。