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目的:用核素掺入结合放射自显影和液体闪烁计数方法,研究抗真菌药物氟康唑对真菌麦角甾醇生物合成的影响.方法:取新鲜培养的新生隐球菌标准株分别与不同浓度氟康唑预培养10 min后,加[1-14C]乙酸钠振荡培养3 h,经皂化、提取、薄层展开,使角鲨烯、羊毛甾醇和麦角甾醇等分离后,用液体闪烁计数法测定上述各成分中14C的掺入量,并计算药物对真菌麦角甾醇生物合成的半数抑制浓度(IC50).结果:在空白对照组中,14C主要掺入麦角甾醇,而经氟康唑作用后,真菌的麦角甾醇生物合成受阻,14C在麦角甾醇中的掺入减少,但在羊毛甾醇及其上游成分角鲨烯环氧化物中的积累增多,其含量变化均呈剂量依赖性.氟康唑对真菌麦角甾醇生物合成的IC50为32.17 nmol/L.结论:核素掺入法能定量考察羊毛甾醇14α-去甲基化酶抑制剂氟康唑对羊毛甾醇去甲基化反应的抑制作用,为其他抗真菌药物的作用机制和抑酶活性研究提供了新方法. 相似文献
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绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一种来源于水母的生物发光蛋白。GFP基因作为报告基因已被广泛应用于各种生物的研究中。白念珠菌感染在临床真菌感染中占有很大的比例,因此对白念珠菌进行深入研究具有重要意义。GFP在白念珠菌的研究中已得到广泛的应用。GFP基因可与目的基因融合形成融合基因,融合基因可表达融合蛋白,该融合蛋白可发出荧光信号,进行基因表达和蛋白定位等方面的研究。本文综述了GFP在白念珠菌研究中的应用。 相似文献
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白念珠菌多药耐药蛋白Cdr1p和Cdr2p的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
ABC转运蛋白(ATP—binding cassette transporter,ABCT)属于膜转运蛋白,存在于哺乳动物、细菌、真菌等多种细胞中,且与多种细胞的多药耐药(multidrug resistance,MDR)有关。白念珠菌(Candida albicans)含有多种ABCT,但只有Cdr1p、Cdr2p与MDR有关;另外,Cdr1p、Cdr2p具有外排泵、磷脂易位等功能。本文对白念珠菌耐药蛋白的研究进展作一综述。 相似文献
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气-质联用研究氟康唑对白念珠菌甾醇生物合成的抑制作用 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 为抗真菌药物作用机理的研究提供有力的工具。方法 白念珠菌经药物作用后提取未皂化脂 (NSLs) ,其中的甾醇组分经衍生化后GC MS分析 ,测定各组分的结构和含量。结果 经氟康唑作用的真菌 ,CYP5 1酶受抑制 ,使细胞膜内羊毛甾醇和2 4 (2 8) 亚甲基 2 4 ,2 5 二氢羊毛甾醇累积 ,后者更为明显 ,而麦角甾醇合成受阻。结论GC MS分析获满意的效果 ,可对抗真菌药物阻断真菌麦角甾醇合成通路所引起各甾醇组分的含量变化进行研究。 相似文献
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目的:研究肠炎冲剂对三硝基苯磺酸(TNBS)所致慢性溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗作用。方法:TNBS的50%乙醇溶液一次性注人大鼠直肠,造成大鼠的慢性溃疡性结肠炎模型后,连续给药,观察腹泻率、死亡率,分别于连续给药3周及4周后麻醉处死动物,测定组织髓过氧化物酶(MPO)活力。地塞米松为阳性对照药。结果:地塞米松组动物症状减轻,但解剖学检查可见胸腺明显萎缩;连续给予不同剂量的肠炎冲剂药液(给药剂量为11.4、5.7、2.9g生药/kg体重),各剂量组动物腹泻明显缓解,动物死亡率、腹泻率、结肠组织MPO活力明显降低,病理学检查或尸检可见结肠组织溃疡面积明显缩小,水肿缓解,坏死减轻,未见肠壁增厚。肠炎冲剂能显著缓解TNBS所致慢性溃疡性结肠炎症状,且未见地塞米松所致免疫器官萎缩的免疫抑制作用。结论:肠炎冲剂连续给药,对慢性溃疡性结肠炎模型大鼠治疗作用明显,并且未见地塞米松所致严重不良反应,是治疗慢性溃疡性结肠炎的较合适药物。 相似文献
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Caplp是由白念珠菌CAP1基因编码的碱性亮氨酸拉链转录因子,既和耐药性有关,又在白念珠菌的氧化应激反应中发挥着举足轻重的作用。Cap1p在AP-1家族转录因子中属于和Yap1p、Yap2p及Pap1p同样的亚家族,其调控靶基因转录的机制是核定位机制。近年来,Cap1p调控的可能靶基因逐一被发现,其与Yap1p之间的异同也逐步被揭示,但是Cap1p和白念珠菌耐药性之间的关系至今尚未阐明。当前抗病原真菌研究领域的两大热点问题正是白念珠菌的氧化应激机制和耐药性产生,因此Cap1p的重要性显得尤为突出。本课题组长期从事白念珠菌转录因子Cap1p的研究工作,本文对Cap1p的研究进展作一介绍。 相似文献
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随着耐药致病真菌的临床检出率不断攀升,其死亡机制的探讨也成为了热点.致病真菌的凋亡是由许多信号通路、调节因子和效应物质组成的复杂网络.致病真菌的凋亡与真菌的自体吞噬、线粒体凋亡通路、内源性和外源性因素的变化等密切相关.凋亡通路作为抗真菌药物研究的新靶点,其临床意义十分重大.因此,本文对致病真菌凋亡通路做一综述. 相似文献