褐藻糖胶对60Co-γ 射线照射小鼠造血系统的辐射防护作用研究简

目的观察褐藻糖胶对^60Co-γ射线照射小鼠体内造血系统的辐射防护作用。方法以BALB／c小鼠进行体内照射,一次性全身照射前腹腔注射给予褐藻糖胶3d,测定脾指数、脾脏内部结构以及内源性脾结节数（7．5Gy）、骨髓有核细胞计数（6．0Gy）、外周血象（5．5Gy）。结果小鼠体内造血系统实验显示7．5Gy^60Co-γ照射后,各给药照射组的脾指数及内源性脾结节数明显较对照组增多,中剂量照射组的脾脏大小以及脾脏内部组织结构均比对照组有显著的差别;6．0Gy^60Co-γ照射后,小鼠骨髓有核细胞数较正常对照组相比差异非常显著（P〈0．01）,各给药照射组与照射对照组比较,均高于照射对照组（P〈0．05或P〈0．01）：5．5Gy^60Co-γ照射后30d,小鼠外周血象测定中各给药照射组白细胞数明显高于对照组（P〈0．01）,而外周血红细胞、血红蛋白和血小板无明显影响。结论褐藻糖胶对^60Co-γ射线照射引起的小鼠造血系统损伤有保护作用。     

磷酸二酯酶5的短发夹RNA对肌细胞纤维化的作用抑制研究

目的通过短发夹RNA(shRNA)延长对磷酸二酯酶5(PDE5)的抑制作用,探索shRNA-PDE5对细胞存活率的影响以及对心肌梗死后心功能及心室重构的作用及其机制。方法(1)细胞实验:分离SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),将Ad-shRNA-PDE5和Ad-Null分别感染体外培养的MSCs,嘌呤霉素筛选稳定表达它们的细胞株,分为shPDE5组和空白对照载体(Ad-Null)组,另设正常组。缺口末端标记法染色检测各组缺氧缺糖(OGD)诱导的稳转MSCs细胞凋亡情况。(2)动物实验:通过结扎左冠状动脉前降支方法建立雄性SD大鼠心肌梗死模型。按照体重将大鼠随机分成6组:假手术组、模型组、对照组、第1转染组、第2转染组和第3转染组,在结扎前降支后,立即在心肌梗死区及周边区4个点各注射经不同处理的MSCs细胞。用蛋白质印迹法检测大鼠心肌中转化生长因子-β(TGF-β)和成纤维细胞生长因子2(FGF2)的蛋白表达水平(光密度值);Masson染色检测心肌梗死区及周边区组织的纤维化情况。结果(1)shPDE5组、Ad-Null组和正常组的凋亡细胞数分别为(6.00±1.00),(14.33±1.52)和(5.33±1.52)个,shPDE5组与Ad-Null组比较,凋亡细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)假手术组、模型组、对照组、第1转染组、第2转染组和第3转染组的FGF2蛋白表达水平分别为0.11±0.02,0.22±0.05,0.27±0.08,0.28±0.04,0.33±0.05和0.50±0.03;这6组的TGF-β蛋白表达水平分别为0.18±0.02,0.91±0.03,0.72±0.01,0.72±0.03,0.48±0.02和0.27±0.09。第2转染组、第3转染组与假手术组、模型组、对照组和第1转染组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、第1转染组、第2转染组和第3转染组与模型组比较,大鼠梗死周边区心肌组织细胞纤维化程度依次减弱。结论shRNA-PDE5可通过减少细胞凋亡,调节相关因子的表达,抑制心肌细胞纤维化,从而改善心功能。     

基于傅里叶变换红外光谱及化学计量学方法的不同产地锁阳药材分类鉴别

目的:基于傅里叶变换红外光谱(FTIR)及化学计量学方法实现不同产地锁阳药材的分类鉴别。方法:采集5个省(区) 12个市(区/州/旗)的106批锁阳药材,以透射方式采集样品的FTIR光谱数据并进行光谱预处理,建立锁阳FTIR指纹图谱并进行光谱解析,以相关系数法计算不同产地锁阳的FTIR相似度,求取不同产地锁阳FTIR平均光谱的一阶导数(1D)光谱,以预处理后的1D光谱数据建立基于主成分分析(PCA)的软独立建模分类(SIMCA)鉴别模型,以前6个主成分建立正交偏最小二乘法(OPLS)鉴别模型。结果:不同产地锁阳FTIR指纹图谱的走势及主要吸收峰位基本一致,共指认出了16个共有特征吸收峰;不同产地锁阳FTIR指纹图谱的相似度及1D光谱均有显著、唯一的特征;所建SIMCA模型可实现不同省级产区锁阳的分类鉴别,所建OPLS模型可实现不同市级产区锁阳的精确分类鉴别,12个产地锁阳的分类鉴别体现了明显的地域聚集性特点。结论:基于FTIR及化学计量学方法能够实现不同产地锁阳药材的分类鉴别。     

抗生素活性时程的评估指标:靶组织游离药物的浓度

评价抗生素临床疗效的常用参数包括:最低抑菌浓度(MIC)、抗生素后效应(PAE)以及一些基于MIC的药动学/药效学参数,如t>MIC,cmax/MIC,AUC/MIC等。但由于抗生素的蛋白质结合率不同、组织分布不均匀和各种屏障等因素的影响,上述参数都存在一定的局限性。靶组织游离药物浓度是一个重要的药动学/药效学模型参数,能够更好地说明抗生素的临床疗效。近年来,国内外报道的研究靶点药物分布的方法有很多,其常用方法是利用皮肤水疱研究、成像技术和透析技术测定抗生素在靶组织的分布浓度。总之,新技术的介入提供了更多的靶点药物分布的信息。     

红景天中8种成分体外抗氧化作用的比较

目的比较性研究红景天中8种苷及醇类化合物———芦丁苷、红景天苷、异槲皮苷、酪醇、络塞琳、熊果苷、络塞维、肉桂醇红景天的体外抗氧化作用。方法测定8种成分对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、一氧化氮自由基、羟自由基的清除能力,以及总抗氧化能力和抑制脂质过氧化反应的能力。结果除清除羟自由基实验外,异槲皮苷和芦丁苷作用明显强于其他化合物,其中在清除DPPH、超氧阴离子能力和抑制脂质过氧化实验中的IC50分别为5.72和10.46,23.63和36.39,10.78和56.49 mg.L-1;而在清除羟自由基实验中,酪醇和红景天苷的作用则强于其他化合物,IC50分别为10.84和18.97 mg.L-1。结论红景天中苷及醇类成分对多种自由基具有清除作用,有良好的综合抗氧化性和开发应用前景。     

海藻活性物质研究概况及抗辐射研究进展

辐射防护剂在放射治疗、太空探险甚至核战等辐射环境中的应用日益受到关注,但现今所使用的许多人工合成的辐射防护剂都不太理想,因此许多研究者将目标转移到了丰富的天然药用植物资源上,尤其是海洋资源得到普遍的重视。近年来,在海洋天然产物领域的大量研究中,从海藻中分离出大量生物活性物质,主要有多糖类、单萜、倍半萜、含卤素的多酚类化合物、含卤素的杂环化合物和生物碱等类型,其中多种化合物都具有抗菌、抗炎、细胞毒、抗辐射、清除自由基等生理活性。本文综述了海藻的生物活性物质及其在抗辐射研究的进展,为进一步研究开发海洋藻类资源提供了科学依据。     

柱前衍生化RP-HPLC同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量及其多元统计分析

目的:建立柱前衍生化反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量的方法并进行多元统计分析。方法:采用柱前衍生化RP-HPLC检测,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,采用Wonda Sil C18-WR色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相A为0.05 mol·L^-1乙酸钠缓冲液(pH 6.5),流动相B为乙腈-甲醇-水(3∶1∶1),梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温35℃。建立主成分分析(PCA)及系统聚类分析(HCA)模型进行多元统计分析并进行质量评价。结果:从锁阳中共分离鉴定了17种氨基酸,含7种人体必需氨基酸。17种氨基酸在各自质量浓度范围内呈良好线性关系,r在0.9990~0.9999;平均回收率在98.03%~103.89%,RSD均<3.5%。PCA和HCA结果基本一致,均可将12个市级产区明显区分为6个区域;PCA可根据不同市级或省级产区对锁阳进行聚类,而HCA可根据省级产区对锁阳进行归类,说明不同市级、省级产区锁阳的氨基酸含量具有产区差异性,且含量分布表现出明显的地域聚集性特点;PCA表明甘肃、内蒙古所产锁阳氨基酸含量较高,质量较佳。结论:所建方法可用于不同产区锁阳中17种游离氨基酸的含量测定,为其综合质量评价提供参考。     

红景天中苷及其醇类化合物抗辐射有效活性成分体外筛选研究

目的比较研究红景天中6种苷及醇类化合物红景天苷、异槲皮苷、酪醇、洛塞琳、熊果苷、络塞维的体外抗辐射活性。方法给予人淋巴细胞10 Gy60Coγ射线一次性照射,构建辐射防护模型。以MTS法检测6种苷及醇类化合物对辐射损伤人淋巴细胞增殖的保护作用。结果与正常组比较,4、6、8、10 Gy60Coγ模型组人淋巴细胞存活率显著降低,其中10Gy60Coγ模型组存活率为（55.43±4.69）%。与模型组比较,异槲皮苷（12.5μg.ml-1）、红景天苷（12.5μg.ml-1）、络塞维（12.5μg.ml-1）、洛塞琳（25μg.ml-1）、熊果苷（12.5μg.ml-1）、酪醇（50μg.ml-1）给药组均能够显著提高辐射损伤人淋巴细胞的增殖活性。结论红景天中苷及醇类成分对60Coγ射线照射所致人淋巴细胞损伤具有一定的保护作用,其中浓度为25μg.ml-1的络塞维抗辐射作用最强。     

褐藻多糖硫酸酯对H2O2诱导皮层神经元氧化应激损伤保护作用

目的 研究褐藻多糖硫酸酯对H2O2诱导小鼠皮层神经元氧化损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法 以含有B-27的Neurobasal培养基无血清体外原代培养新生小鼠大脑皮层神经元,H2O2 (50μtmol/L)诱导氧化应激损伤模型,MTT法检测不同质量浓度(0.01、0.1、1g/L)褐藻多糖硫酸酯对细胞存活的影响,生化法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量和丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果 与H2O2处理组比较,0.1、1g/L褐藻多糖硫酸酯能显著提高H2O2诱导损伤皮层神经元的存活率(P＜0.05),并且降低培养液中LDH的漏出量,抑制细胞内MDA的生成,提高细胞内SOD的活性.结论 褐藻多糖硫酸酯对H2O2损伤皮层神经元具有显著的保护作用,其机制与抗氧化作用有关.     

黄芪-当归药对配伍前后HPLC指纹图谱及主要化学成分变化

目的建立黄芪-当归(芪归)药对配伍前后HPLC指纹图谱及多指标成分同时测定的方法,探讨芪归药对配伍的物质基础。方法采用水煎煮-喷雾干燥法制备芪归药对及黄芪、当归提取物;采用Shim-Pack VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,以水-甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长280 nm,建立芪归药对配伍前后HPLC指纹图谱及毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、阿魏酸、Z-藁本内酯等多指标成分同时测定的方法;求取指纹图谱共有模式,标定共有峰并分析相对峰面积变化,进行色谱峰归属,分析药对配伍前后指标性成分含量变化。结果所建HPLC指纹图谱及多指标成分同时测定方法精密度良好,溶液中各待测成分在3d内稳定,各色谱峰RSD值均<3.0%,5种指标成分在各自线性范围内均有良好的线性关系,回收率均符合相关规定,各样品指纹图谱相似度均>0.9;芪归药对配伍后共标定出26个共有峰,其中9个来自黄芪,6个来自当归,7个同时来自黄芪和当归,4个色谱峰是新生成物质;芪归药对配伍共煎后,黄芪中毛蕊异黄酮及芒柄花素含量均显著降低(P<0.05),当归中阿魏酸及Z-藁本内酯含量均显著降低(P<0.01)。结论芪归药对配伍后HPLC指纹图谱变化显著,总体表现为多数化学成分含量减少、个别成分含量增加并有新化合物生成。