基于3′/5′端表达不平衡策略的荧光定量PCR法检测非小细胞肺癌患者血浆游离循环RNA中ALK融合基因

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆游离循环RNA(cfRNA)中的ALK融合基因的表达水平,为指导临床个体化用药提供依据。方法选取经高通量测序验证的已知ALK融合基因的NSCLC患者13例、ALK融合基因阴性的NSCLC患者16例和30例体检健康者,采集各组血液样本并分离血浆cfRNA,用荧光定量PCR检测各组ALK基因3'端第20外显子(E20)和5'端3外显子(E3)的表达量,并计算ALK融合基因的表达水平。结果已知ALK融合基因的NSCLC患者、ALK融合基因阴性的NSCLC患者和体检健康者血浆cfRNA中ALK融合基因表达水平分别为278.3(45.3,987.4),4.08(0.38,9.04),3.77(0.34,8.37),各组间差异有统计学意义(H=29.93,P0.01);组间两两比较结果表明,已知ALK融合基因的NSCLC患者血浆中ALK融合基因的表达水平高于ALK融合基因阴性的NSCLC患者或体检健康者(U分别为0,0,P均0.01),而后两组间差异无统计学意义(U=232,P=0.86)。结论基于3'/5'端表达不平衡策略的荧光定量PCR法可以快速检测NSCLC患者血浆cfRNA中ALK融合基因。     

1162例／次丙戊酸钠血药浓度监测与影响因素分析

目的：分析丙戊酸钠血药浓度监测情况,探讨影响丙戊酸钠血药浓度的因素,为临床合理用药提供科学依据。方法采用均相酶放大免疫法（EMIT）对该院门诊和住院部服用丙戊酸钠的癫痫患者进行血药浓度监测,对监测结果行统计分析。结果监测的1162例／次中,588例／次（50．60％）血药浓度位于50～100 mg·L －1,359例／次（30．90％）＜50 mg·L －1,215例／次（18．50％）＞100 mg·L －1。丙戊酸钠血药浓度与性别、年龄及合并用药相关（P ＜0．05）。结论应加强和重视丙戊酸钠血药浓度监测并实施个体化给药,以期提高临床疗效,保障患者用药安全。     

老年患者铜绿假单胞菌感染及耐药监测

目的　分析铜绿假单胞菌引起老年患者感染的特点及对 2 2种抗菌药物的耐药谱 ,为临床治疗用药提供合理方案。方法　用VITEK32型全自动细菌分析系统对我院老年住院患者临床分离细菌进行鉴定 ,共分离出 1 70株铜绿假单胞菌 ,并采用Kirby Bauer法选用 2 2种抗菌药物进行体外药物敏感试验。结果　 1 70株铜绿假单胞菌主要来源于痰标本 ,占 76 .5 % ;其在临床病区分布中居前 2位者依次为呼吸内科、老年病科。 1 70株铜绿假单胞菌对阿米卡星、左氧氟沙星、环丙沙星、哌拉西林 /他唑巴坦、亚胺培南和妥布霉素的耐药率较低 ,均小于 40 % ;其对氯霉素、复方新诺明、氨苄西林、头孢噻吩、萘啶酸、阿莫西林 /克拉维酸和头孢西丁则表现出高度耐药。结论　铜绿假单胞菌是引起医院感染的最常见病原菌之一 ,尤易侵袭老年患者 ,对抗菌药物呈多重耐药 ,临床治疗应结合老年患者的特点合理选用抗菌药物 ,以减少耐药株的出现与扩散     

儿童急性呼吸道感染病毒和非典型病原体的检测

目的了解急性呼吸道感染(ARI)患儿呼吸道病毒和非典型病原体感染的情况。方法收集17 048例拟诊断为ARI患儿的血清,采用间接免疫荧光法(IFA)检测9种常见的病毒和非典型病原体,包括肺炎支原体(MP)、乙型流感病毒(FluB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、副流感病毒(PIV)、腺病毒(ADV)、甲型流感病毒(FluA)、嗜肺军团菌(LPN)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CPn)的IgM抗体。结果 9种病原体的总体检出率为60.24%(10 269/17 048)。其中,MP的检出率最高,为47.78%(8 146/17 048),其次是FluB,检出率为30.87%(5 262/17 048)。MP各季节检出率都较高;FluB主要在夏季和冬春季有小流行;RSV在冬春季检出率较高;ADV春季检出率较高;FluA在春夏季出现了小流行;PIV和LPN季节性不明显。ADV、CPn、FluA、FluB、LPN、MP、PIV、RSV病原体检出率在各年龄组之间差异有统计学意义(P<0.05)。2种病原体混合感染以MP+FluB最多,占39.58%;3种病原体混合感染以MP+FluB+RSV多见,占13.68%。4种病原体混合感染,以MP+FluB+RSV+PIV居多,占3.84%。其他混合感染模式的阳性例数较少。结论武汉地区引起儿童ARI的病毒和非典型病原体主要是MP、FluB和RSV;各种病原体检出率具有一定季节性且不同年龄段间有一定差异;混合感染比较普遍,主要是MP+FluB混合感染。     

大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶现状和基因型研究

目的调查临床分离大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶株的分布情况、基因型特征及耐药现状。方法收集临床分离大肠埃希菌，对头孢西丁耐药株以酶提取物改良三维试验筛选高产AmpC酶株；PCR和DNA测序分析质粒ampC基因型；碱裂解法提取质粒，并用质粒接合试验确证ampC基因是否位于可接合质粒上；最后用K—B法测定菌株对12种常用抗菌药物的敏感度。结果114株大肠埃希菌中共检出产质粒AmpC酶株10株（8．7％）。各质粒ampC基因型中EBC5株，DHA4株，CIT2株，EBC和DHA同时阳性1株。1株EBC阳性株和1株CIT阳性株测序证实为新的ampC基因型。10株菌均含有1个约54．2kb的大质粒，其中7株质粒接合试验阳性。产酶株对除头孢吡肟和亚胺培南外的大多数B内酰胺类抗生素高度耐药。结论大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶检出率已较高，并存在多种基因型，产酶株的多重耐药和交叉耐药现象十分严重，应高度重视产质粒介导AmpC酶细菌的监测与控制。     

LNA PCR检测骨髓增殖性疾病JAK2基因V617F突变

目的:建立一种检测酪氨酸激酶2(JAK2)基因V617F突变的锁核酸PCR(LNA PCR)方法,并探讨其对骨髓增殖性疾病(MPD)的临床应用价值。方法:收集68例确诊为MPD患者外周血或骨髓标本,其中真性红细胞增多症(PV)37例、原发性血小板增多症(ET)22例、原发性骨髓纤维化(MF)9例。根据JAK2基因V617F突变位点设计引物和LNA,建立快速检测JAK2基因V617F突变的LNA PCR方法,同时以DNA直接测序法进行验证,并检测上述标本JAK2基因V617F突变率。结果:所建立的LNA PCR方法能有效检测JAK2基因V617F突变,其特异性和灵敏度明显高于DNA测序法(P<0.05);LNA PCR方法可以检测出1%的JAK2基因V617F突变型杂合子。68例MPD患者标本共检测出JAK2基因V617F突变55例,检出率80.88%。其中37例PV中JAK2基因V617F突变34例(91.89%),22例ET中JAK2基因V617F突变15例(68.18%),9例MF中JAK2基因V617F突变6例(66.67%)。结论:LNA PCR方法检测灵敏度高,能有效提高JAK2基因V617F突变检出率。     

奥硝唑与替硝唑治疗口腔厌氧菌感染的观察

奥硝唑 (ornidazole)为硝基咪唑类化合物衍生物 ,是继替硝唑后研制成的第三代硝基咪唑类新药。我们应用奥硝唑片剂对 3 0例口腔厌氧菌感染患者进行治疗 ,以替硝唑作对照 ,采用双盲随机方法进行临床研究。一、材料和方法1.一般资料 :我院口腔科牙周炎、冠周炎患者 60例 ,男2 8例 ,女 3 2例。随机分为受试组 (奥硝唑 ) 3 0例和对照组(替硝唑 ) 3 0例。两组间性别、年龄无统计学差异。年龄 18～ 65岁。无严重全身性疾病 ,1周内未服用其他抗厌氧菌药物。病例选择和临床疗效标准参照《牙周病学》[1]。2 .细菌学检查 :(1)标本采集 :分别在初诊和复…     

289株铜绿假单胞菌医院感染现状及体外耐药监测

目的：研究铜绿假单胞菌医院感染现状、分布特征，并分析其耐药谱及多重耐药性，指导临床合理用药。方法：用VITEK32型全自动细菌鉴定分析系统对临床标本中分离的289株铜绿假单胞菌进行鉴定，并采用Kitty—Bauer法选用22种抗菌药物进行药物敏感试验。结果:289株铜绿假单胞菌主要来源于痰标本，占77．2％，其次为分泌物和尿液；其在临床病区分布中居前3位者依次为呼吸内科、神经外科、老年病科。289株铜绿假单胞菌对环丙沙星、阿米卡星、亚胺培南、头孢吡肟、头孢他啶和哌拉西林／他唑巴坦的耐药率较低，均小于40％；而对氯霉素、复方新诺明、氨苄西林、头孢噻吩、萘啶酸、阿莫西林／克拉维酸和头孢西丁则表现出高度耐药；且铜绿假单胞菌多重耐药率呈上升趋势。结论:铜绿假单胞菌临床分离株耐药现状严重，应合理选择和使用抗菌药物，以减少耐药株的出现与扩散。     

基于慢性乙型病毒性肝炎诊断路径的实验诊断学教学模式初探

探讨建立涵盖慢性乙型病毒性肝炎(CHB)诊断与鉴别诊断、治疗、药物选择及毒副作用预测、疗效监测、预后评估等全过程的疾病临床检验诊断路径的教学模式。根据CHB临床诊疗指南, 制订与疾病不同阶段相关的实验室检查检测策略, 建立CHB临床检验诊断路径, 以武汉大学第一临床学院2016级和2017级八年制本科生为研究对象, 通过随堂问卷比较其课堂教学效果。本研究首先建立了获得临床医生认可的CHB临床检验诊断路径, 其涵盖CHB疾病的诊断与鉴别诊断、治疗、药物选择及毒副作用预测、疗效监测、预后评估等全过程。该路径应用于2017级临床医学本科生课堂教学后, 教学质量评估指标均有较大程度的提升。此外, 随堂测验得分也有显著提高。综上, 基于CHB临床检验诊断路径的实验诊断学教学模式, 实现了实验诊断学与临床医学的融合, 提升了学生对CHB诊疗中各种实验室检查检测的整体认识, 教学质量得到了提高。     

一种基于本体的网格服务匹配方法

传统的网格服务匹配一般是基于关键字匹配,这种匹配方法缺乏语义信息,灵活性差,查全率低.本文提出了一种新的基于本体的网格服务匹配方法,该方法使用本体语言OWL-S来描述网格服务,充分考虑了服务的语义信息,同时利用OWL推理机对网格服务进行服务分层,以提高服务匹配的效率.实验结果表明,与其他网格服务匹配方法相比,本文所提出的匹配方法具有较高的查全率和查准率及较短的服务匹配时间等优点.