扇贝裙边糖胺聚糖对SH-SY5Y细胞氧化及凋亡影响

目的探讨扇贝裙边糖胺聚糖（SS-GAG）对6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导的SH-SY5Y细胞丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）含量及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-9表达的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞,随机分为对照组、6-OHDA损伤组和SS-GAG（200、400和800mg/L）处理组,测定各组细胞中MDA含量、LDH活性,实时荧光（real-time）PCR检测细胞Bcl-2、Bax mRNA表达的变化,流式细胞技术（FCM）检测活化Caspase-9蛋白表达。结果与对照组相比较,6-OHDA损伤组的MDA含量、LDH活性增加,Bcl-2mRNA表达降低,Bax mRNA表达升高,表达活化Caspase-9蛋白的细胞数增加,差异均有统计学意义（F=27.699-280.567,P〈0.01）。与6-OHDA损伤组比较,各浓度SS-GAG处理组SH-SY5Y细胞中MDA含量、LDH活性降低,Bcl-2mRNA表达升高,Bax mRNA表达降低,活化的Caspase-9蛋白表达量减少,并且呈剂量依赖性,差异均有显著意义（F=27.699-280.567,P〈0.01）。结论 SS-GAG能降低6-OHDA诱导的氧化应激水平,保护生物膜的完整性。SS-GAG通过上调Bcl-2基因的表达和下调Bax基因的表达,抑制Caspase-9蛋白的活化,从而抑制6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。     

补肝散不同分离组份抗抑郁活性筛选

目的 对补肝散醇提物不同分离组份的抗抑郁活性进行筛选。方法 采用慢性不可预知温和应激（chronicunpredictable mild stress,CUMS）对小鼠进行为期8周的造模,造模4周后,分别以盐酸帕罗西汀（paroxetine hydrochloride,PX）、补肝散醇提物、石油醚（A）、二氯甲烷（B）、乙酸乙酯（C）及正丁醇（D）4个分离组份进行为期4周的灌胃治疗,考察各组小鼠的行为学及脑内神经递质含量的变化。结果 连续给药4周（造模8周）后,PX组（0.026 g·kg^-1）、补肝散醇提物组（1.92 g·kg^-1）及其分离组份C（0.232 g·kg^-1）、D（1.04 g·kg^-1）和B（0.160 g·kg^-1）组均能明显逆转模型小鼠的抑郁表现如糖水偏好率下降、强迫游泳不动时间延长等抑郁症状。能不同程度地增加其脑内额叶皮质中5-羟色胺和多巴胺的含量,其中PX、醇提物及分离组份C的作用更为明显（与模型组比较,P<0.05或<0.01）。结论 补肝散醇提物的抗抑郁活性部位主要集中于乙酸乙酯和正丁醇分离组份,其次是二氯甲烷分离组份。     

2,3-吲哚醌对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖影响

目的 研究2，3-吲哚醌对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖的影响。方法 应用MTT比色法观察2，3-吲哚醌对SH—SY5Y细胞生长的抑制情况；流式细胞仪检测2，3-吲哚醌对SH—SY5Y细胞周期分布的影响；Western blot方法观察其对细胞信号传导通路蛋白有丝分裂原激活的蛋白激酶（ERK）的作用，同时结合免疫细胞化学方法检测2，3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞caspase-3的影响。结果 2，3-吲哚醌能显著抑制SH—SY5Y细胞增殖，并使细胞周期阻滞于G0／G1期；caspase-3蛋白表达随着药物浓度的升高逐渐增加；加2，3-吲哚醌后磷酸化的有丝分裂原激活的蛋白激酶蛋白（ERK1／2）相对表达量降低。结论 2，3-吲哚醌对SH—SY5Y细胞具有抗增殖作用，其作用可能是通过诱导细胞凋亡、改变细胞周期以及作用于细胞通路而实现的。     

岩藻多糖对2型糖尿病的预防作用

目的研究岩藻多糖对链脲佐菌素诱导实验性2型糖尿病大鼠的预防作用。方法建立2型糖尿病大鼠动物模型,预防给药岩藻多糖（600mg/kg、400mg/kg、200mg/kg）5周后,测定大鼠、空腹血糖、血脂和血清胰岛素水平。结果高脂高糖饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素（30 mg/kg）可诱导大鼠2型糖尿病模型。岩藻多糖可降低大鼠空腹血糖,提高基础胰岛素水平,升高胰岛素敏感指数,改善胰岛素抵抗。并能降低血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇含量,升高高密度脂蛋白胆固醇水平。结论岩藻多糖对实验性2型糖尿病的发生有预防作用。     

2,3-吲哚醌对血管内皮细胞生长因子的影响及作用机制研究

目的:研究2,3-吲哚醌在体外对人神经母瘤细胞(SH-SY5Y)分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响,探讨其作用机制。方法:采用酶联免疫吸附测定法检测VEGF蛋白分泌水平;反转录-聚合酶链反应测定VEGF信使核糖核酸(mRNA)的相对表达水平;Western-blot测定磷酸化的有丝分裂原激活的蛋白激酶(pp42/pp44)的相对表达量。结果:2,3-吲哚醌作用细胞24h后,VEGF分泌量明显降低,mRNA相对表达水平下降,pp42/pp44的相对表达量降低。结论:2,3-吲哚醌能抑制SH-SY5Y细胞分泌VEGF蛋白和mRNA的表达,其作用可能与改变有丝分裂原激活的蛋白激酶磷酸化水平有关。     

益气通脉口服液治疗冠心病心绞痛的多中心随机双盲临床研究

目的:评价益气通脉口服液治疗冠心病心绞痛的临床疗效及其安全性。方法:采用多中心、随机、双盲、平行对照的方法,选择冠心病心绞痛气虚血瘀证型患者110例为试验组,予以益气通脉口服液治疗;109例为阳性对照组,予以舒心口服液治疗。疗效性指标为:临床显效率、有效率;心绞痛发作次数、持续时间;心电图;血脂指标;血流变学指标;于第0、1、2、3、4周定期观察气虚血瘀证型中医症候指征。安全性指标为:一般体格检查项目;血、尿、大便常规;肝、肾功能检查;不良反应监测。结果:试验组和阳性对照组的总有效率分别为91.82%和85.32%,差异无统计学意义(P>0.05);从显效、有效、无效的分布看,试验组的疗效明显优于阳性对照组(P<0.01)。两药均明显降低心绞痛发作次数和持续时间(P<0.01)、冠状动脉造影阳性率(P<0.05)以及平板运动试验阳性率(P<0.01);试验药物降低心绞痛发作次数和持续时间的效果优于阳性对照药(P<0.05);而两药降低冠状动脉造影阳性率、平板运动试验阳性率的效果差异无统计学意义(P>0.05)。两组心电图疗效及分布无明显差别(P>0.05)。两药均明显降低血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平(P<0.05);试验药控制血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的效果优于阳性对照药(P<0.05)。两药均明显降低全血黏度、高切还原黏度、低切还原黏度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、纤维蛋白原、血沉(P<0.05);试验药降低全血黏度、高切还原黏度、低切还原黏度、红细胞聚集指数、纤维蛋白原的作用优于阳性对照药(P<0.05)。对于胸痛、胸闷、气短、心悸、疲倦乏力、面色紫黯和自汗等中医症候指征,两组均表现出明显的改善作用和趋势(P<0.05);对于改善胸闷、心悸、疲倦乏力和自汗等症状,试验组的效果优于阳性对照组(P<0.05);试验组具有更明显降低症候总积分的作用和趋势(P<0.01)。两组治疗前后生命体征都在正常范围内,血、尿、大便常规及肝、肾功能等指标治疗前后的差异无统计学意义(P>0.05);两组间的安全性差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:益气通脉口服液能较好地治疗冠心病心绞痛,效果优于阳性对照药舒心口服液,且无明显不良反应。益气通脉口服液是临床治疗冠心病心绞痛的安全有效的中药新药。     

牛磺酸对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力影响

目的探讨牛磺酸对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法雄性SD大鼠84只,随机分为正常组、假手术组、模型组、阳性对照组及牛磺酸大、中、小剂量组,每组12只大鼠。正常组、假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,阳性对照组给予哈伯因(0.16mg.kg-1.d-1)灌胃,牛磺酸大、中、小剂量组分别给予牛磺酸(600、400、200mg.kg-1.d-1)灌胃。灌胃10d后,模型组及牛磺酸大、中、小剂量组分别于右侧海马注入5μL Aβ1-40,假手术组注入等量磷酸盐缓冲液(PBS,0.01mol/L),正常组不做任何处理。采用Morris水迷宫实验进行大鼠学习记忆能力测试,同时测定海马中乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)的含量。结果与模型组比较,阳性对照组及牛磺酸中、大剂量组逃避潜伏期均显著缩短(F=2.20,q=4.13～4.52,P<0.05),穿越平台次数及第三象限活动时间明显增加(F=2.78、2.56,q=3.74～4.38,P<0.05),Ach含量和ChAT、SOD、GSH-Px活性明显增高(F=2.22～3.38,q=3.41～4.25,P<0.05),AChE活性和MDA含量明显降低(F=5.13、5.04,q=3.27～4.46,P<0.05)。结论牛磺酸可显著改善AD模型大鼠的学习记忆能力,其机制可能与其抗氧化及改善胆碱能系统的功能有关。     

塞来昔布抑制顺铂致大鼠迟发性呕吐的作用及机制研究

目的:研究选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对顺铂致大鼠迟发性呕吐的作用及机制。方法:将大鼠分为对照组、顺铂组和塞来昔布组(顺铂+塞来昔布),各组给予相应药物后观察大鼠摄食高岭土量;测定肠组织中5-羟色胺(5-HT)及其代谢产物5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量;测定色氨酸羟化酶(TPH)和单胺氧化酶(MAO)活性;观察小肠黏膜形态学改变。结果:与对照组比较,顺铂组摄食高岭土量明显增加(P<0·05),肠组织内TPH活性增强,MAO活性减弱,5-HT的含量增加(P<0·05)。与顺铂组比较,塞来昔布组摄食高岭土量明显降低,TPH酶活性及5-HT的含量也均降低(P<0·05),且小肠组织病变减轻。结论:塞来昔布可以抑制顺铂所致化疗性异食癖,提示其可能具有防治迟发性恶心、呕吐的作用。     

2,3-吲哚醌抑制人神经母瘤细胞增殖

运用台盼蓝拒染法测定人神经母瘤细胞(SH-SY5Y细胞)生长曲线,Hoechst33258核染色形态学检测细胞凋亡,流式细胞仪检测2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞凋亡率的影响.结果2,3-吲哚醌作用48 h后开始抑制SH-SY5Y细胞生长,并且细胞核出现核裂解、浓缩等典型凋亡形态学改变,凋亡率升高,诱导细胞凋亡呈现时间和剂量依赖关系.提示2,3-吲哚醌可用于肿瘤的治疗.