海洛因对大鼠C6胶质瘤细胞的双向电泳图谱比较

目的 比较海洛因对大鼠C6胶质瘤细胞的双向电泳图谱差异,从蛋白质水平初步探索阿片类毒物-海洛因的作用机制。方法 提取对照组与海洛因组C6胶质瘤细胞的蛋白质,以固相pH梯度等电聚焦为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向进行2-DE。以图像分析软件ImageMaster V 5.0分析电泳图谱。结果 将对照组与海洛因组C6胶质瘤细胞的2-DE图谱匹配后,检测到570个蛋白点,差异大于1.5倍的斑点有29个,其中20个下调,9个上调。结论 初步建立了大鼠C6胶质瘤细胞的蛋白质组学分析方法;差异点的发现为深入理解海洛因的分子机制提供了线索。     

海洛因及补偿AMP和GMP对大鼠海马组织腺苷脱氨酶的影响

目的探讨海洛因及补偿AMP和GMP对海马组织嘌呤核苷酸分解代谢关键酶ADA的影响。方法剂量递增腹腔注射海洛因及嘌呤核苷酸,建立了海洛因及补偿AMP和GMP的给药与依赖大鼠模型,用试剂盒检测海马组织腺苷脱氨酶(ADA)的活性。提取海马组织总RNA,采用逆转录聚合酶链反应检测海马组织ADA mRNA的水平,以β-actin mRNA为内标。结果海马组织中ADA含量测定结果显示,与盐水对照组相比,核苷酸组和海洛因组的海马组织ADA含量明显升高(P0.05,n=10);与海洛因组相比,海洛因加核苷酸组、核苷酸3天组的海马组织ADA含量明显降低(P0.05,n=10),核苷酸9天组降低更为显著(P0.01,n=10)。海马组织中ADA mRNA的水平结果显示,与盐水对照组相比,海洛因组ADA mRNA的相对表达量明显增高(P0.05,n=3),其余各组与盐水对照组相比无统计学意义;与海洛因组相比,海洛因加核苷酸组、戒断3天组、戒断9天组、核苷酸3天组和核苷酸9天组ADA mRNA的相对表达量明显降低(P0.01,n=3)。结论海洛因通过影响海马组织ADA的活性,进而促进嘌呤核苷酸的分解代谢,嘌呤核苷酸和/或代谢产物可能通过某些机制影响海洛因对海马组织的作用,其机制有待进一步研究。     

嘌呤对慢性吗啡处理大鼠热痛阈与急性戒断的影响

目的：研究嘌呤碱基与嘌呤核苷对吗啡依赖大鼠的热痛阈与急性戒断的影响。 方法：28只大鼠随机分成对照组、吗啡依赖组、吗啡依赖+嘌呤碱基组、吗啡依赖+嘌呤核苷组,每组7只。通过热敏感甩尾实验,记录大鼠热敏感甩尾潜伏期;通过纳洛酮催促,对大鼠急性戒断症状进行观察与评定。 结果：与对照组相比,吗啡依赖组、吗啡依赖+嘌呤碱基组、吗啡依赖+嘌呤核苷组均产生明显的药物抗痛觉效应（P<0.05）;吗啡与嘌呤碱基或与嘌呤腺苷同时作用大鼠的甩尾潜伏期与吗啡依赖组相比有延长的趋势（P>0.05）;吗啡与嘌呤碱基或与嘌呤核苷同 时作用的大鼠戒断后,湿狗样抖动及腹泻/排便的发生次数比吗啡单独作用组明显增加（P<0.05）。 结论：本实验观察到系统应用腺嘌呤/鸟嘌呤、腺苷/鸟苷对吗啡依赖大鼠既可提高其基础热痛阈,又可加重其部分急性戒断症状。     

海洛因对雌性大鼠肽类性激素影响的研究

目的研究海洛因对雌性大鼠血浆FSH、LH、PRL的影响。方法以剂量递增法大鼠腹腔注射海洛因,放免分析法检测血浆——催乳素(PRL)、黄体生成素(LH)及卵泡刺激素(FSH)的水平。结果与对照组相比,海洛因给药组(3d、9d)血浆PRL、LH显著降低(P<0.05);停药后3d、9d组血浆PRL、LH水平仍明显低于对照组(P<0.05),但与给药9d组比较,停药9d组血浆PRL、LH水平虽有回升,但无统计学差异(P>0.05)。血浆的FSH水平在给药组(3d、9d)、停药组(3d、9d)均无明显改变(P>0.05)。结论海洛因使雌性大鼠血浆LH、PRL的水平显著降低,且短期停用海洛因尚不能恢复到正常,对FSH水平无显著影响。     

吗啡对肠道嘌呤核苷酸分解代谢的影响

目的：研究吗啡依赖及戒断状态下嘌呤核苷酸分解代谢的变化及作用机制。方法：剂量递增腹腔注射盐酸吗啡,建立吗啡依赖及戒断大鼠模型。试剂盒检测血浆尿酸含量、血浆及小肠组织黄嘌呤氧化酶（XO）的活性。提取小肠组织总RNA,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测小肠组织XO mRNA的水平,以β-actin mRNA为内标。结果：血浆尿酸水平显示,7 d吗啡用药组明显高于对照组（P<0.05）;血浆XO酶学结果显示,7 d吗啡用药组XO明显高于对照组（P<0.05）,自然戒断组与纳洛酮对照组也明显高于对照组（P<0.01）;小肠组织XO酶学结果可见, 7 d吗啡用药组与纳洛酮戒断组XO明显高于对照组（P<0.05）;小肠组织XO的mRNA水平可见,7 d吗啡用药组、自然戒断组和纳洛酮戒断组XO mRNA水平明显高于对照组。结论 ：吗啡促进嘌呤核苷酸分解代谢;吗啡促进大鼠小肠嘌呤核苷酸分解代谢关键酶XO的活性,纳洛酮不能阻断该作用。提示吗啡对小肠XO的作用是通过非μ受体途径。     

吗啡对大鼠肾功能部分血浆生化指标影响的评估

目的：研究吗啡依赖大鼠血浆肾功能的变化。方法：建立吗啡依赖及戒断大鼠模型，50只Wistar大鼠随机分成对照组、3d给药组、7d给药组、3d戒断组及7d戒断组，检测血液生化指标尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）和尿酸。结果：与对照组相比，7d给药组、3d戒断组和7d戒断组血浆BUN的含量明显升高, 其中7d戒断组血浆BUN的含量升高最为显著（P＜0.01）；CREA含量在给药3d时开始升高，给药7d后稍有下降，停药后又升高，但各组含量与对照组相比，均无统计学意义；吗啡给药组血浆尿酸水平明显高于对照组（P＜0.05）。结论：吗啡给药对肾功能有一定程度的损害，并可能存在持续性，不能在停药后立即消除。     

嘌呤核苷酸减弱吗啡抑制的PC12细胞嘌呤核苷酸合成代谢

目的：探讨外源性嘌呤核苷酸对吗啡致神经细胞核苷酸合成代谢降低的影响。方法: 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12细胞)分为对照组、吗啡组、单嘌呤核苷酸（AMP+GMP）组、三嘌呤核苷酸（ATP+GTP）组、吗啡+AMP+GMP组及吗啡+ATP+GTP组。应用RT-PCR法检测各实验组腺苷激酶（AK）和次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）基因转录产物含量的变化。结果:吗啡组AK mRNA及HGPRT mRNA表达量（分别为1.330±0.108和1.407±0.141）与对照组（1.874±0.161和1.923±0.155）比较明显降低(P<0.01,P<0.05)。吗啡+AMP+GMP组AK mRNA表达量（1.626±0.171）与吗啡组和对照组比较差异无显著性（P>0.05），HGPRT mRNA表达量（1.796±0.168）高于吗啡组(P<0.05)。吗啡+ATP+GTP组AK mRNA表达量（1.107±0.164）低于对照组(P<0.01),HGPRT mRNA表达量（1.563±0.209）与吗啡组及对照组比较差异无显著性（P>0.05）。结论：外源性补充嘌呤核苷酸能改善吗啡所致的PC12细胞嘌呤核苷酸合成代谢关键酶基因表达降低。     

吗啡抑制大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)增殖

目的：探讨吗啡对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞增殖的影响及作用机制。方法: 应用MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期。RT-PCR及免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果: 10 μmol/L吗啡对PC12细胞的增殖有抑制作用,G₁期细胞增多，S期细胞减少。24 h PCNA mRNA表达开始低于对照组(P<0.05),48 h和72 h明显降低(P<0.01)。免疫细胞化学也显示PCNA表达量降低(P<0.05)。纳洛酮具有逆转吗啡降低PCNA表达的作用。结论:吗啡可能通过μ受体降低PC12细胞PCNA表达，进而抑制细胞增殖。     

吗啡对嘌呤核苷酸分解代谢的影响—吗啡依赖的生化与分子生物学机制研究

目的 :研究吗啡依赖及戒断对嘌呤核苷酸分解代谢的影响与作用机制。方法 :建立吗啡依赖、戒断的大鼠模型 ,测定大鼠血浆中尿酸及腺苷脱氨酶 (ADA)含量 ;各组织中的腺苷脱氨酶含量以及大鼠脑顶叶、肝脏、小肠和肌肉组织中腺苷脱氨酶的基因转录产物。结果 :吗啡给药大鼠血浆尿酸水平明显升高 (P <0 0 5 ) ;吗啡给药及戒断期间 ,大鼠血浆ADA水平均显著升高 (P <0 0 5 ) ;吗啡给药组大鼠脑顶叶、肝脏、小肠和肌肉组织匀浆中的ADA含量都有不同程度的升高 (P <0 0 5 ) ,而在自然戒断期间 ,上述各组织ADA含量较给药组有所下降 ;吗啡给药 3d组大鼠脑顶叶、吗啡给药 7d组大鼠肝脏、小肠和肌肉组织中ADA的基因表达均明显升高 (P <0 0 5 ) ,除肌肉组织外 ,在自然戒断期间 ,上述各组织ADA的基因表达水平都有不同程度的恢复。结论 :嘌呤核苷酸分解代谢加强可能是吗啡的基本作用 ,也可能是依赖的重要原因之一。