南极磷虾肽改善高尿酸血症机制研究

目的 探究南极磷虾肽(AKP)对于高尿酸血症模型小鼠的降尿酸功效及其作用机制。方法 采用HPLC法体外筛选出具尿酸合成关键限速酶--黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase, XOD)抑制活性的AKP,体内动物实验验证AKP的降尿酸活性。雄性SPF级Balb/c小鼠采用高嘌呤饲料(25%酵母浸粉)喂养联合腹腔注射尿酸酶抑制剂(氧嗪酸钾,200 mg.kg^-1.BW^-1)建立高尿酸血症小鼠模型,造模21天后进行AKP干预。小鼠随机分为正常对照组(生理盐水),模型对照组(生理盐水)、阳性药组(非布司他)、AKP低剂量组(450 mg.kg^-1.BW^-1),AKP高剂量组(900 mg.kg^-1.BW^-1),干预30天后检测血清尿酸含量(Uric acid, UA),肝脏尿酸合成关键酶酶活,肾脏及肠道尿酸转运蛋白mRNA的转录水平及形态学改变。结果 AKP体外XOD抑制率可达24.4%。动物实验验证表明AKP可显著降低高尿酸模型小鼠的UA,作用机制为通过抑制肝脏尿酸合成关键酶XOD及腺苷脱氨酶(Adenosine Deaminase, ADA)酶活,从而抑制肝脏尿酸生成;上调肾脏及肠道尿酸分泌转运体三磷酸腺苷结合盒转运蛋白(ATP binding cassette superfamily G member 2, ABCG2)、有机阴离子转运体(organic anion transporter 1, OAT1)转录水平,并抑制尿酸重吸收转运体葡萄糖转运体9(glucose transporter 9, GLUT9)、尿酸转运体1(urate transporter 1, URAT1)转录水平,从而促进肾脏及肠道尿酸排泄。AKP可显著降低血清尿素氮(Blood urea nitrogen, BUN)含量,肾脏及肠道切片观察结果进一步表明,AKP可以显著改善高尿酸血症造成的肾脏及肠道损伤,维护肾脏及肠道尿酸排泄功能。结论 AKP可通过抑制肝脏尿酸生成,促进肾脏及肠道尿酸排泄,维护肾脏及肠道形态及功能,从而改善高尿酸血症。     

DHA虾青素双酯抑制脂肪细胞与巨噬细胞共培养体系中炎症反应

摘要：目的 在体外水平研究DHA虾青素双酯对脂肪组织炎症的改善作用并探究其作用机制。方法 采用Transwell小室法建立脂肪细胞与巨噬细胞共培养体系,模拟体内脂肪组织炎症状态,检测培养上清中炎症因子水平以及游离脂肪酸和甘油含量,油红O染色观察脂肪细胞脂解情况,免疫荧光表征巨噬细胞极化情况,qRT-PCR测定脂肪细胞脂解与巨噬细胞极化相关基因表达。结果 DHA虾青素双酯能显著降低共培养体系中促炎因子TNF-α（P<0.01）和MCP-1（P<0.05）的水平;抑制脂肪细胞脂解,降低培养上清中甘油含量（P<0.05）;促进巨噬细胞向M2型极化,显著降低巨噬细胞内M1型标志基因IL-1β、INOS的表达（P<0.01）;并且显著抑制脂肪细胞脂解相关基因TNFR（P<0.01）、JNK（P<0.01）、G0S2（P<0.05）、ATGL（P<0.01）和NF-κB信号通路关键基因MyD88、NF-κB及TNF-α（P<0.01）的表达。结论 DHA虾青素双酯可降低脂肪细胞与巨噬细胞共培养体系中炎症因子分泌,抑制脂肪细胞脂解、促进巨噬细胞M2型极化,最终抑制共培养体系中的炎症反应。