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在链霉菌中,早先被克隆的基因是一类赋予受体菌株显性的,可作为选择性状的一些标记,这样使克隆片断能比较直接的加以识别。这些基因控制对次甲霉素、硫链丝菌素、新霉素、紫霉素和红霉素的抗性,其中好几个基因都已被连接到链霉菌质粒或噬菌体的复制子中,成为一系列用途广泛的克隆载体,用来分离各种各样的链霉菌基因,包括那些与抗生素生物合成有关的基因。 相似文献
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抗生素是动植物致病微生物的天敌,是抗菌消炎药中最大的一类药物。抗生素大多是由细菌、真菌或其他微生物所产生的生物活性物质,具有抑制或杀灭细菌、真菌、螺旋体、支原体、衣原体等致病微生物的作用,在疾病的治疗中起着十分重要的作用。但是随着致病菌抗药性的不断增强,过去曾经能够起到良好治疗效果的许多抗生素,有些效果已经大不如前了。 相似文献
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基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物发酵过程优化 总被引:1,自引:0,他引:1
以组合生物合成技术得到的基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物CS103为研究对象,在摇瓶水平进行培养条件的初步优化。确定了接种量、接种时间、发酵过程pH、装液量等初步条件。对3.7L发酵罐水平的培养条件进行优化,确定了最适搅拌转速和通气量,并初步建立了补料分批发酵工艺。结果表明,接种时间30h、接种量为10%、控制pH6.5-7.0、搅拌转速450r/min、通气量200L/h,发酵过程维持发酵液残余葡萄糖浓度5g/L左右,在3.7L发酵罐基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物CS103产量达到99.87μg/ml。本研究为基因工程FR-008/杀念菌素工业化生产工艺提供了依据。 相似文献
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微生物次级代谢产物生物合成基因簇与药物创新 总被引:12,自引:3,他引:12
微生物产生众多结构和生物活性多样的次级代谢产物,其生物合成基因簇的克隆是药物创新和产量提高的必要前提。迄今为止已有超过150种生物合成基因簇通过各种方式被克隆,并被用于组合生物合成、体外糖类随机化、代谢工程的定向改造。我们研究室已经克隆并测定了氨基糖苷类井冈霉索/有效霉索、多烯类抗生素FR-008/克念菌索、聚醚类南昌霉索、聚酮类梅岭霉索、杂合聚酮一多肽类略唑霉索等生物合成基因簇。深入的基因功能分析揭示了他们独特的生物合成途径和调节机理,为正在进行的组合生物合成结构改造和代谢工程产量提高奠定了基础。 相似文献
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核苷类抗生素代谢工程的研究现状及展望 总被引:1,自引:0,他引:1
核苷类抗生素是一类生物活性多样,主要来源于微生物的重要次级代谢产物,应用潜力巨大.一些核苷类抗生素生物合成基因簇的相继克隆及其基因功能的深入研究从分子水平揭示出此类抗生素独特的生物合成途径与调节机制,为今后利用代谢工程手段实现核苷类抗生素的定向改造提供了丰富的研究材料与理论基础. 相似文献
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聚酮系指通过连续的低级羧酸如乙酸、丙二酸、丁酸等脱羧缩合而产生的一组在结构和生理功能上形形色色的分子.它们在植物、动物、真菌和细菌中的分布极为广泛,如植物体内的类黄酮(其中包括植物和根瘤菌相互作用后产生的物质),真菌产生的黄曲霉素,灰色链霉菌产生的杀假丝菌素等等.成百上千的、不同结构的聚酮表现出了各种不同的生物学特性,如抗细菌、抗真菌、抗肿瘤和抗蠕虫、抗蚊子幼虫等等;有的聚酮是花色素的组成部分,有的可以用作免疫抑制剂,而由一些真菌和一些细菌产生的聚酮物质还与其产生孢子的特性及其发育途径有关.聚酮 相似文献
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pHZ1276是透明颤菌血红蛋白基因(vgb)的诱导型表达载体,携带有硫链丝菌素诱导的强启动子PtipA和ФC31int,attP基因使载体整合在染色体上。本研究利用组成型启动子ermP1P2替代pHZ1276上的诱导型启动子PtipA构建了组成型表达血红蛋白基因的质粒pHZ1291。将vgb基因去掉后构建了组成型链霉菌表达载体pHZ1294。将pHZ1276。pHZ1291导人阿维链霉菌(Streptomyces avermitiHs)NRRL8165,所得重组子经Southern杂交验证后,蛋白粗提物经Western杂交和CO结合实验表明vgb基因在该菌中表达出了有活性的VHb蛋白。 相似文献
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反相高效液相色谱法测定发酵液中FR-008/杀念菌素及其相关组分的含量 总被引:2,自引:0,他引:2
目的建立发酵液中杀念菌素(Candicidin)/FR008及其相关组分的快速测定方法。方法色谱条件SBC8(4.6mm×250mm)色谱柱,乙腈-20mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH4.0)=40∶60为流动相,流速为1.0mL·min-1,柱温为25℃,检测波长380nm。结果在6.25-500μg·mL-1范围内Candicidin/FR008与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=20.461x 30.748,r=0.9991。精密度和重复性分别为1.84%和3.8%。结论本方法的精密度、回收率和线性关系均表现较好,且具有精确、高效、操作简单等特点,适用于发酵产物的常规检测。 相似文献
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SCP2是一个31kb的低拷贝链霉菌质粒,SCP2*作为SCP2的天然突变体在载体的构建和应用方面得到了广泛的应用。与SCP2相比,SCP2*诱动染色体的能力提高了约1000倍,具有清晰的“麻点”形成特征并在接合时的供受体双方均携带有野生型SCP2时没有“进入不利”的属性。通过缺失分析,已确定了与接合转移、麻点形成及质粒稳定性等功能区,对SCP2*的复制功能也进行了深入的研究。本文对SCP2分子生物学研究和应用的进展进行系统综述。 相似文献
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微生物药物是一类化学结构和生物活性多样的次级代谢产物,近年来其多个产生菌基因组序列已经被测定完成,在此基础上开展的功能基因组研究方兴未艾,并在抗生素生物合成、形态分化、调控、系统发育与进化以及次级代谢产物挖掘等方面有着新的发现,展现出广阔的研究前景.本文重点阐述了四种重要抗生素产生菌功能基因组学的研究现状,集中于青霉素高产的遗传机制、红霉素产生菌红色糖多孢菌基因组与转录组分析、链霉素产生菌灰色链霉菌中A因子调控网络、阿维菌素产生菌作为次级代谢物异源表达的通用宿主与超高产菌株构建以及新型天然产物的挖掘等研究内容,同时简要介绍了当前我国微生物药物产生菌基因组学的研究概况,并从基础与应用两个角度对其未来发展趋势进行了展望. 相似文献