黄连解毒汤通过诱导自噬减轻脓毒症小鼠肝损伤

目的 探讨黄连解毒汤对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的脓毒症小鼠肝损伤保护作用中自噬相关蛋白的表达。方法 将60只8周龄C57BL/6小鼠随机分为假手术组、脓毒症模型组、黄连解毒汤低、高剂量组（1.44，2.88 g?kg^-1）共4组（n=15）。连续给药3 d，末次给药1 h，盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。观察小鼠24 h生存率；另取5只，术后12 h处死小鼠，收集血清和肝组织。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中炎症因子白细胞介素-6（IL-6），肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-1β（IL-1β）的水平；生化法检测血中丙氨酸氨基转移酶（ALT），天冬氨酸氨基转移酶（AST）的水平；苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织的病理变化；TdT介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）染色观察肝细胞凋亡指数（AI）；蛋白免疫印迹法检测肝组织中高迁移率族蛋白1（HMGB1），自噬效应蛋白1（Beclin1），自噬标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ（LC3-Ⅱ/Ⅰ）的表达。结果 与假手术组比较，模型组小鼠12，24 h生存率明显降低，血清中炎症因子IL-6，TNF-α，IL-1β水平明显升高（P<0.05），AST，ALT活性明显增加（P<0.05），肝细胞肿胀、炎症细胞浸润，肝细胞凋亡，HMGB1表达明显增加（P<0.05），自噬相关蛋白Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ增加（P<0.05）；与模型组比较，各给药组脓毒症小鼠12，24 h生存率明显提高，炎症因子IL-6，TNF-α水平及AST，ALT活性明显降低（P<0.05），肝组织损伤明显减轻，肝细胞凋亡减少（P<0.05），HMGB1的表达明显减少（P<0.05），Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ明显增加（P<0.05）。结论 黄连解毒汤可能通过诱导自噬、抑制凋亡等机制，减轻CLP所致脓毒症小鼠肝损伤。     

基于创新人才培养的药学专业实践教学体系的改革与探索

培养创新人才,需要强化实践教学环节,完善实践教学体系,提高学生的学习能力、实践能力和创新能力。在创新人才培养要求下,如何进行药学专业实践教学模式改革以培养学生的创新素养,是药学教育者急需探索的一个重要课题。本文从加强和改进实验教学方法,鼓励学生科研立项,开设设计性综合实验,拓展毕业专题研究,鼓励加入教师科研课题研究等方面进行了基于创新人才培养的药学专业实践教学体系的改革与探索。     

后处理减轻心肌缺血/再灌注损伤与HIF-1α-iNOS-cGMP通路激活的关系

目的 探讨后处理减轻缺血/再灌注所致的心肌损伤效应是否与低氧诱导因子-1α （HIF-1α）及其下游通路有关.方法 建立大鼠心肌缺血/再灌注及后处理模型,检测心肌组织中HIF-1α及其下游基因诱导性一氧化氮合酶（iNOS）的表达情况及cGMP的含量.结果 后处理缩小缺血/再灌注所致的心梗面积[（27.30±4.16）%比 （36.00±5.29）%,P＜0.01],减少心肌细胞凋亡（Caspase 3比活性：（1.85±0.50）比（3.79±0.64）,P＜0.01）,上调心肌组织中HIF-1α表达[（5.76±0.55） 比（2.85±0.13）,P＜0.01）的同时,提高了iNOS的表达及其cGMP的含量.预先给予HIF-1α脯氨酸羟化酶抑制剂DMOG使后处理心肌组织中HIF-1α表达进一步上调后,iNOS的表达及cGMP含量随之增加,同时后处理减轻心肌损伤的效应[心梗面积：（17.95±2.00）% 比 （27.30±4.16）%,P＜0.01; Caspase3比活性：0.43±0.13比1.85±0.50,P＜0.01]也进一步增强.结论 后处理减轻缺血/再灌注所致心肌损伤的效应可能与其激活心肌组织中HIF-1α-iNOS-cGMP通路有关.     

SIRT6对老年人皮肤成纤维细胞迁移能力和增殖能力的影响及机制研究

目的 探讨沉默信息调节因子2同源类似物6（SIRT6）对老年人皮肤成纤维细胞迁移能力和增殖能力的影响及机制。方法 在山西医科大学第二附属医院泌尿外科取不同年龄患者包皮环切术切取的包皮组织，其中老年组8例，青年组8例。用胶原酶消化法提取人皮肤成纤维细胞，Western印迹法检测不同年龄组人皮肤成纤维细胞中SIRT6和磷酸化p65蛋白（p-p65）的表达，划痕实验检测细胞迁移活性，CCK8法检测细胞增殖活性。将老年组皮肤成纤维细胞分成两组，一组用SIRT6慢病毒感染使其SIRT6表达增高作为SIRT6组，另一组以空病毒感染作为对照组，用上述方法分别检测SIRT6组和对照组细胞迁移活性、增殖活性和p-p65蛋白表达水平，实时PCR检测两组Ⅰ型和Ⅲ胶原蛋白、整合素亚基α3、α5和β1 mRNA的表达。采用GraphPad Prism 5软件进行统计学分析，t检验分析两组之间数据的差异。结果 老年组皮肤成纤维细胞SIRT6表达水平（0.434 ± 0.179）显著低于青年组（1.000 ± 0.067，t = 3.040，P = 0.012），p-p65表达水平（1.694 ± 0.148）显著高于青年组（1.000 ± 0.093， t = 2.949，P = 0.015），迁移率（43.81% ± 18.84%）显著低于青年组（94.63% ± 12.32%，t = 5.903，P = 0.003），24、48 h增殖活性也较青年组显著下降（P < 0.05）。老年组成纤维细胞过表达SIRT6后，与对照组相比，p-p65表达显著下降（P < 0.05），迁移能力和增殖能力显著提高（P < 0.05），同时Ⅲ胶原蛋白和整合素亚基α3、α5和β1的mRNA表达水平显著升高（P < 0.05）。结论 SIRT6可提高老年人成纤维细胞的迁移能力和增殖能力，其机制可能与抑制NF-κB通路有关。     

蛋白质非酶糖化在丙酮醛促进心肌细胞缺氧／复氧损伤敏感性增加中的作用

目的：观察蛋白质非酶糖化是否会增加心肌缺氧/复氧损伤的敏感性。方法常规培养H9C2细胞,分别给予PBS（对照组）、丙酮醛（200μmol/L）、丙酮醛（200μmol/L）＋氨基胍（100μmol/L）孵育6 d后接受缺氧/复氧处理,以MTT法测定心肌细胞存活率,微量酶活性测试法检测乳酸脱氢酶（LDH）释放变化,比色法检测丙二醛（MDA）含量,并通过免疫组织化学检测心肌细胞终末糖化晚期产物（AGEs）表达。结果缺氧/复氧降低细胞存活率,增加心肌细胞MDA含量和LDH释放;而丙酮醛处理6 d的心肌细胞的AGEs含量明显增加,并对缺氧/复氧损伤的敏感性增加,与PBS孵育细胞经缺氧/复氧处理后相比, MDA含量和LDH释放显著上升,存活率明显下降（P＜0.01）;MGO引起的上述变化可以被糖化抑制剂氨基胍部分阻断（P＜0.05）。结论蛋白质非酶糖化是糖代谢中间产物丙酮醛增加心肌细胞对缺氧/复氧损伤敏感性的重要机制。     

苏木不同提取物行血祛瘀活性研究

苏木(Caesalpinia sappan L.)为豆科云实属植物,始载于<唐本草>,味甘、咸、性平,其干燥心材为传统中药材,具有舒筋通络、活血散结、镇静、祛痰、止痛等功效.近年来,关于苏木提取物的活性研究主要集中在抗肿瘤[1-2]和免疫抑制[3]方面,尤其在抗器官移植排斥反应方面的报道较多[4],而对于苏木的传统功效,行血祛瘀及消肿止痛方面的药理研究和报道均很少.本研究通过考察苏木不同提取物对急性血瘀模型大鼠全血黏度、血小板聚集的影响,探讨其行血祛瘀药理活性及机制.     

L-精氨酸对家兔生理及失血性休克后尿量的影响

NO是一种有许多生理、病理作用的气体物质,NO可扩张血管,改善肾循环,从而对尿的生成的影响及对肾功能具有保护作用。持续严重的休克可导致肾功能障碍。休克后给予补充生理盐水等措施来恢复血压,维持各种生命活动。由于 NO的底物是 L-精氨酸,本实验观察了L-Arg对家兔尿生成的影响。     

大鼠糖尿病早期肾脏皮质Na+,K+-ATP酶α1-亚单位的表达

目的：探讨大鼠糖尿病早期肾脏肥大和肾脏皮质Na^ ，K^ -ATP酶α1-亚单位mRNA表达的变化。方法：采用单剂量腹腔注射链脲佐菌素(streptozocozin,STZ)诱发大鼠糖尿病，分别在糖尿病第1、3、7天测定肾脏肥大指数，并以RT-PCR技术检测肾脏皮质Na^ ，K^ -ATP酶α1-亚单位mRNA的表达。结果：大鼠糖尿病早期血糖显著升高，肾脏肥大，肾脏皮质Na^ ，K^ -ATP酶α1-亚单位mRNA的表达明显降低。结论：肾脏皮质Na^ ，K^ -ATP酶α1-亚单位mRNA表达的改变可能是糖尿病早期肾脏肥大的一个因素。     

过氧亚硝基在机械性创伤致心肌细胞凋亡中的作用

目的通过制备小鼠机械性创伤模型，观察过氧亚硝基（ONOO-）在机械性创伤致心肌细胞凋亡中的作用和机制。方法利用Noble-Collip创伤仪制作非致死性小鼠创伤模型，通过比色法测定心肌组织caspase3活性，TUNEL染色观察心肌细胞凋亡指数，化学发光法检测总一氧化氮（NOx）含量，EIJSA方法检测心肌组织中过氧亚硝基标志物硝基酪氨酸（Nitrotyrosine，NT）含量。结果机械创伤小鼠心肌组织中发生明显的细胞凋亡，同时心肌组织中一氧化氮含量和硝基酪氨酸含量均增高。结论过氧亚硝基造成的心肌组织蛋白质硝基化是机械创伤致心肌细胞凋亡的重要机制，减少过氧亚硝基的生成有助于减轻机械创伤后心肌损伤。     

二甲基亚砜对离体大鼠胸主动脉的舒张作用

目的探讨二甲基亚砜（DMSO）对离体大鼠胸主动脉环的作用及其可能机制。方法观察离体大鼠胸主动脉环血管张力的变化，探讨DMSO对血管的作用。结果高浓度DMSO可降低动脉环的基础张力；DMSO对去氧肾上腺素（PE）和KCl预收缩的血管环均有浓度依赖性的舒张作用。左旋硝基精氨酸甲酯（LNAME）预处理血管环后，DMSO对PE预收缩的血管的舒张作用明显减弱。DMSO对PE诱发的依赖内钙释放和外钙内流的血管环收缩反应均有浓度依赖性抑制作用。DMSO预处理可使CaCl2量效曲线右移。结论DMSO可能通过抑制血管平滑肌细胞膜及胞内的Ca^2＋通道引起血管舒张。内皮源性的NOS通路可能部分参与DMSO诱导的血管舒张作用。