单用或联用UDP-糖、GDNF和美金刚对脑白质损伤大鼠长期预后的改善作用

目的 探讨单用和联用尿苷二磷酸葡萄糖(UDP-糖)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和美金刚对脑室周围白质软化(PVL)新生大鼠体格发育、学习记忆和肢体运动功能的远期影响. 方法 5日龄SD新生大鼠按照随机数字表法分为对照组、PVL组、UDP-糖组和UDP-糖+GDNF+美金刚组(简称三联药组).对照组大鼠仅游离右侧颈总动脉,不接扎和缺氧;PVL组大鼠结扎颈总动脉和缺氧;UDP-糖组大鼠在缺血缺氧后给予腹腔注射UDP-糖;三联药组大鼠在缺血缺氧后给予颅内注射GDNF,同时腹腔注射UDP-糖和美金刚.每组大鼠造模前后称重并记录睁眼日龄,在PVL造模后21d进行水迷宫和斜板测试,记录各组大鼠逃逸潜伏期、游泳距离及在不同倾斜角度下的斜板得分. 结果 PVL组在各时段的体质量及睁眼日龄均显著低于其他3组,四象限的平均逃逸潜伏期值和游泳距离数值均显著长于其他3组,在45°和50°斜板上的得分均显著低于其他3组,差异有统计学意义(P＜0.05);两个用药组间以及两个用药组分别和对照组间大鼠体质量、睁眼日龄、逃逸潜伏期值、游泳距离以及斜板评分的差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论 单用UDP-糖或联用UDP-糖、GDNF和美金刚能明显改善脑白质损伤大鼠的长期预后,三联药组的改善作用略微更明显.     

神经细胞缺氧实验装置的研制及其评价

目的 研制一种性能良好、简便易用的神经细胞缺氧实验装置,以便从细胞水平模拟神经细胞的缺氧缺血过程,探讨新生儿脑损伤的发病机理和防治方法.方法 设计研制一套细胞缺氧实验装置.应用这套装置,分别建立了缺氧30 min、45 min、60 min、2h及3h的氧糖剥夺(OGD)神经细胞模型.应用WST-8方法和Hoechst 33342/PI荧光双染方法,分别评估不同OGD时间对神经细胞成活率的影响.结果 所研制的细胞缺氧实验装置包括细胞缺氧舱、市售缺氧气源、出气水封瓶以及市售二氧化碳培养箱.其中研制的细胞缺氧舱外形精巧透明,便于携带,开启方便,封闭性能好.对用这套装置所建立的不同OGD时间神经细胞成活情况的评估结果,显示随着OGD时间的延长,凋亡和坏死细胞逐渐增多,细胞成活率由OGD 30 min时的85％渐降至OGD3h时的22％,其中OGD 45～60 min可造成40％～55％的神经细胞死亡.结论 所研制的这套细胞缺氧实验装置性能良好、简便易用,缺氧时间精准,可确保OGD神经细胞模型的成功建立.     

CREB与学习记忆及情绪关系

目的研究环单磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)与学习记忆和情绪的关系。方法通过查阅国内外CREB相关文献及近年来对CREB与学习记忆和情绪关系所做的临床和动物实验分析。结果相关实验结果显示:在学习及情绪障碍患者和动物模型的神经系统内发现CREB含量减少。结论脑组织中CREB含量的减少可导致学习记忆下降和各种情绪障碍。     

产前束缚应激对大鼠子代的影响

目的:观察产前束缚应激对子代大鼠海马组织脑源性神经生长因子(BDNF)的表达及学习行为的影响。方法:将孕鼠随机分为应激组和对照组,应激组孕鼠在妊娠的第13～19天给予束缚应激。观察两组孕鼠所产雄性仔鼠1月龄时的学习记忆和行为活动,并用免疫组织化学方法检测仔鼠海马组织切片中BDNF的表达。结果:应激组雄性仔鼠海马BDNF的表达低于相应对照组(t=3.377,P=0.004),学习记忆成绩低于对照组(t=3.838,P=0.002),水平运动得分高于对照组(t=2.372,P=0.028),垂直运动得分高于对照组(t=2.625,P=0.016)。结论:产前应激可能减少仔鼠海马组织中BDNF的表达,并影响仔鼠的学习记忆和行为活动。     

缺血启动未成熟大鼠脑白质内源性修复功能的研究

目的：探讨缺血启动未成熟脑白质的内源性修复机制。方法：5日龄 Sprague-Dawley 新生大鼠随机分为假手术（Sham）组和PVL组。分别于建模后7 d及21 d光镜、电镜下评估脑白质病变及髓鞘形成情况,免疫组化检测脑白质O4+少突胶质细胞（OL）前体,观察SVZ区祖细胞的激活、增殖、迁移和分化情况。结果：与Sham组比较,PVL组在建模后7 d和21 d光镜下脑白质病理均呈轻或重度病变;病理评分均明显增高;髓鞘形成数量明显减少,厚度变薄;免疫组化显示O4+OL前体明显减少。建模48 h后,PVL组SVZ 区 BrdU、NG2共阳性祖细胞明显增殖并向脑室周围迁移,至7 d达到高峰;从72 h开始,脑室周围出现呈BrdU、O4共阳性OL前体,至21 d,新生OL前体明显多于同时段Sham组。结论：缺血可启动新生大鼠脑白质的内源性修复机制,诱导SVZ 区胶质源性神经祖细胞激活、增殖、迁移至脑室周围和分化为OL前体。     

UDP-糖、GDNF和美金胺改善新生大鼠缺血性脑白质病变的光电镜病理评估

目的：通过光镜和电镜下脑病理研究,评估单用或联用UDP-糖、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）和美金胺对缺血型脑室周围白质软化（PVL）新生大鼠脑白质病变的改善效果。方法：一侧颈总动脉结扎伴缺氧2 h,建立5日龄新生大鼠PVL模型,随机分为假手术（Sham）组、PVL组、UDP-糖组（PVL后即刻腹腔注射UDP-糖2000 mg/kg）、GDNF组（PVL后即刻脑内注射GDNF 100 μg/kg）、美金胺组（PVL后即刻腹腔注射美金胺20 mg/kg）以及三联药组（PVL后即刻联用UDP-糖、GDNF和美金胺）,每组各30只。每组大鼠分别于造模后7 d及21 d断头取脑,电镜下观察髓鞘形成情况,计算髓鞘数目及厚度;光镜下对脑白质病变进行病理分级及评分。结果：造模后7 d及21 d电镜结果显示,PVL组大鼠罕见髓鞘形成,排列松散,髓鞘壁明显变薄,髓鞘数量及厚度均明显少于Sham组、UDP-糖组、GDNF组、美金胺组及三联药组（P<0.01）。光镜下脑白质病理分级结果显示,PVL组大鼠在造模后7 d和21 d,其脑白质均呈轻度病变（38%~50%）或重度病变（50%~62%）。4个用药组大鼠在造模后7 d和21 d有50%~88%呈正常脑白质,呈重度病变的比例为13%~25%。病理评分显示,PVL组在造模后7 d及21 d的病理评分最高,显著高于其他5组（P<0.05）。结论：单用或联用UDP-糖、GDNF和美金胺可明显改善PVL大鼠脑白质病变。推测良好的改善作用与这些药物能促进脑内源性的神经再生及改善脑微环境密切相关。     

GPR17调控脑白质损伤后内在修复潜能的研究进展

脑白质损伤可导致髓鞘损害和神经纤维不能髓鞘化,是脑瘫、智力和视听障碍的主要原因。目前,促进神经再生的内在修复潜能正趋向于成为治疗脑白质损伤的重要策略。近来发现一种新的P2Y受体——GPR17可能调控脑白质损伤后的内在修复潜能。文章将就脑白质的解剖特点、少突胶质细胞的生物学特性及GPR17在脑白质损伤后内在修复中的作用进行综述。     

产前束缚应激对大鼠子代行为活动的影响

目的观察产前束缚应激对子代大鼠海马组织中环单磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）的表达及行为活动的影响。方法将孕鼠随机分为应激组和对照组,应激组孕鼠在妊娠的第13 d-19 d给予束缚应激。利用旷场试验（Open-field test）观察两组孕鼠所产雌性仔鼠1月龄时的行为活动,并用免疫组织化学方法检测仔鼠海马组织切片中CREB的表达。结果应激组仔鼠海马组织CREB的表达低于对照组（P〈0.05）;水平运动得分和垂直运动得分高于对照组（P〈0.05）结论产前束缚应激可能减少仔鼠海马组织中CREB的表达,并增加仔鼠的行为活动。