仲景温法探析

《伤寒杂病论》中温法是中医治疗体系中最具特色的治疗方法之一,是通过温性或热性药物来振奋阳气,以消除病人的沉寒痼冷,补益人体阳气,达到寒祛阳复的目的,是《伤寒杂病论》整个治法中始终贯穿的基本精神.纵观《伤寒杂病论》全书,不论是预防、治疗,还是预后,仲景无一不强调正气、阳气的作用,总以恢复人体正气、阳气,驱邪外出为宗旨.现代社会由于冰箱、空调等广泛应用以及滥用抗生素、寒凉药物等诸多因素,导致阴寒性病证的发生率较高,故温法可起到很好的补偏救弊作用.现代对仲景温法的临床应用,扶阳派最有特色,其理论上推崇扶阳,临床上善用姜、附、桂等辛热药物治疗各种疾病.     

辐射敏感性新基因UHRF1真核表达载体的构建及鉴定

目的构建UHRF1的真核表达载体,并验证其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达。方法采用RT-PCR方法,从乳腺癌细胞MCF-7的总cDNA中扩增出2.3kb的UHRF1基因的cDNA片段,经限制性内切酶KpnⅠ与XhoⅠ双酶切,定向克隆到真核表达载体pcDNA3中,构建重组质粒pcDNA3（＋）-UHRF1,利用限制性内切酶双酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒;构建成功的重组质粒,经脂质体Lipofactamin2000介导转染MDA-MB-231细胞,G418筛选阳性克隆,以RT-PCR和Western blot检测UHRF1的mRNA和蛋白的表达。结果获得全长约为2.3kb的UHRF1基因片段;重组质粒经限制性内切酶XhoⅠ和KpnⅠ酶切、电泳后显示2.3kb的UHRF1目的片段和5.4kb的pcDNA3载体片段,即UHRF1基因的cDNA已正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中;UHRF1转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后的RT-PCR和Western blot的结果显示：UHRF1的mRNA和蛋白水平均呈现高表达。结论成功构建UHRF1基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定基础。     

小儿病毒性心肌炎的心电图检查和实验室检查

小儿病毒性心肌炎临床经过轻重不同,多数患儿预后良好,部分患儿发展成迁延慢性,极少患儿可暴发猝死。由于本病由柯萨奇病毒、流感病毒、肝炎病毒等嗜心性病毒侵害心肌所致,与呼吸系、消化系等病素感染病轻相关连,症状类似,所以早期诊断,早期治疗十分重要,除症     

医学院校生物技术专业本科生微生物学教学改革初探

医学院校生物技术专业如何逐渐摆脱原有的以病原微生物为中心的医学微生物教学模式束缚,应在教学内容、方法和手段等方面进行教学改革,利用医学院校的特有资源建立特色鲜明的普通微生物学教学新模式,努力探索出一套科学、合理的微生物学教学体系对培养适应现代生命科学技术及市场发展需要的生物技术创新人才,具有重要意义。     

敏净冲剂提取工艺的研究

目的优选敏冲剂有效成分的工艺条件。方法用正交试验的方法 ,以出膏率和芦丁含量为指标进行考察影响水煎的煎煮时间、煎煮次数和加水量 3因素。结果敏净冲剂的最佳提取工艺条件为 :煎煮 1次 ,时间为 1小时 ,加水 5倍量。结论此提取条件工艺为最佳。     

固肠止泻丸的药效学研究

本试验结果表明 ,固肠止泻丸 (原名结肠炎丸 )对 10 0 %大黄煎液和蓖麻油所致动物腹泻模型具有治疗作用 ;对大肠杆菌 ATCC2 5 92 2标准株的 MIC为 0 .0 6 2 4 g/ml,MBC为 0 .0 780 g/ml;对福氏痢疾杆菌 ATCC2 7891标准株的最小抑菌浓度 (MIC)为 0 .0 780 g/ml,最小杀菌浓度 (MBC)为 0 .0 975 g/ml;对大肠杆菌 ATCC2 5 92 2标准株的 ED50 为 3.74 37g/kg,95 %可信限为 3.372 5～ 4 .15 5 6 g/kg;对福氏痢疾杆菌 ATCC2 7891标准株的 ED50 为 3.2 74 6 g/kg,95 %可信限为 2 .9394～ 3.6 480 g/kg;对 ip 0 .6 %冰醋酸致痛剂所致小鼠腹痛扭体反应具有对抗作用     

罗红霉素对BALB/c小鼠肠道菌群的影响

目的应用PCR-DGGE技术评价罗红霉素对BALB/c小鼠肠道菌群的影响。方法选用SPF级BALB/c小鼠,按5mg/0.1kg每天灌服水溶性罗红霉素10d,停药7d。分别在实验的0d、3d、10d以及停药7d收取每只小鼠粪便,提取基因组DNA,应用PCR-DGGE(聚合酶链式反应——变性梯度凝胶电泳)技术获得肠道菌群分子指纹图谱,进行相似性、多样性分析及优势条带的序列分析。结果 PCR-DGGE可明确将实验0d、3d、10d以及停药7d小鼠分为4个簇,且灌服罗红霉素的小鼠肠道菌群结构多样性明显减少,序列分析表明灌药前后小鼠粪便标本中的拟杆菌和丁酸梭菌分别为优势菌型。结论罗红霉素对BALB/c小鼠肠道菌群有显著影响。     

UHRF1的高表达降低人乳癌细胞对X射线敏感性的研究

目的：了解基因UHRF1的高表达对乳癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响.方法：利用克隆形成实验观察细胞存活;流式细胞术测定细胞周期;利用DNA片段分析和Annexin V 试剂盒测定细胞凋亡;Western blot 测定蛋白表达变化;利用经典的染色体分析,观察染色体畸变（着丝粒环和双着丝粒）.结果：与对照相比, UHRF1转染可明显降低MDA-MB-231细胞对X射线的敏感性.利用UHRF1-siRNA抑制UHRF1的表达,可显著增强细胞的辐射敏感性.UHRF1的高表达,可诱导G2/M期阻滞,抑制细胞凋亡,下调促凋亡蛋白Bax,上调DNA损伤修复蛋白Ku70和 Ku80的表达水平,而且,能抑制X射线诱导的染色体畸变.结论：UHRF1可能通过影响凋亡和DNA损伤修复成为乳癌放疗的新靶标.     

UHRF1对人乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及作用机制

目的 了解基因UHRF1的不同表达水平对乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及潜在的作用机制。方法 利用克隆形成实验观察细胞存活;流式细胞术测定细胞周期;利用DNA片段分析和Annexin V试剂盒测定细胞凋亡;Western blot 测定蛋白表达变化;利用经典的染色体分析,观察染色体畸变(着丝粒环和双着丝粒)。 结果 与对照相比较,UHRF1转染可将D₀值由2.08 Gy提高至3.17 Gy,即降低MDA-MB-231细胞对X射线的辐射敏感性。利用siRNA抑制UHRF1的表达,可将X射线照射后细胞的生存率由41%降低至17%,即增强了细胞的辐射敏感性。UHRF1的高表达,可诱导G₂/M期阻滞,抑制细胞凋亡,下调促凋亡蛋白Bax,上调DNA损伤修复蛋白Ku70和 Ku80的表达水平,而且,抑制X射线诱导的染色体畸变。结论 UHRF1的高表达可以抑制细胞凋亡,促进DNA损伤修复。因此,通过抑制UHRF1的表达,可作为临床提高乳腺癌放疗疗效的新靶标。