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1.
目的:探讨活化转录因子 6(ATF6)对骨肉瘤细胞 MCA205 免疫原性的影响,初步解析其调控机制。方法:利用CRISPR-Cas9技术敲除MCA205细胞的Atf6基因,借助CCK-8实验、细胞能量代谢检测、流式细胞术、ATP检测试剂盒、干扰素刺激响应元件(ISRE)-荧光素酶报告细胞实验和qPCR法分别检测野生型(WT)和Atf6-/- MCA205细胞在PBS或衣霉素(Tm)处理后的活力、线粒体耗氧速率(OCR)和胞外酸化速率(ECAR)、磷脂酰丝氨酸外翻和细胞膜通透性、胞内钙离子动员、胞内外ATP浓度、IFN-a/b分泌和干扰素刺激基因(ISG)的表达水平。在免疫系统健全的小鼠皮下接种WT或Atf6-/- MCA205细胞,比较两者的成瘤速度、肿瘤组织基因转录图谱、局部抗肿瘤效应T细胞活化有无差异。将WT和Atf6-/- MCA205细胞分别接种于nu/nu小鼠背部两侧皮下,或将Atf6-/- MCA205细胞分别接种于免疫系统健全小鼠和Ifnar-/-小鼠皮下,记录肿瘤生长曲线。分别用Tm预处理的WT和Atf6-/- MCA205细胞对na?ve小鼠(未经免疫刺激的小鼠)进行初次免疫,使肿瘤抗原特异性T细胞发生初次活化(prime),随后收集引流淋巴结细胞并进行体外再刺激(boost),分析特异性T细胞再次活化有无差异。按照不同的效靶比,将NK细胞与染料标记的WT和Atf6-/- MCA205细胞共培养,流式细胞术检测细胞杀伤情况。结果:PBS或Tm处理后,WT和Atf6-/-骨肉瘤细胞活力和增殖、氧化磷酸化和糖酵解、离子霉素触发的胞内钙离子动员、胞内外ATP和IFN-a/b分泌均无显著差异。Tm处理后,Atf6-/-细胞死亡比例低于WT细胞(P<0.01)。在免疫系统健全的小鼠体内,Atf6-/-肿瘤的生长速度明显低于WT肿瘤(P<0.05)。然而,在缺乏T细胞的nu/nu小鼠体内,两种肿瘤生长速度的差异显著缩小。与免疫系统健全的小鼠相比,Ifnar-/-小鼠体内Atf6-/-肿瘤的生长速度略快(P<0.05)。Atf6-/-肿瘤内免疫应答相关基因的表达、效应T细胞的活化均显著高于WT肿瘤(P<0.05)。与WT MCA205细胞相比,Atf6-/- MCA205细胞与NK细胞共培养后死亡比例更高(P<0.05)。在Tm刺激后,Atf6-/- MCA205细胞比WT细胞表达更多的Irf3和Irf7,前者在prime-boost实验中可刺激T细胞分泌更多的IFN-g。结论:阻断ATF6信号通路能显著增强MCA205细胞的免疫原性,促进免疫监视,阻碍肿瘤进展。 相似文献
2.
目的优化女贞子的最佳酒蒸工艺。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定酒蒸女贞子中红景天苷的含量,色谱柱为ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×250.0 mm,5.0μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,柱温25℃,检测波长224 nm,流速1 mL/min,进样量10μL。以女贞子中红景天苷的含量作为考察指标,采用单因素法考察黄酒用量、闷润时间以及蒸制时间对红景天苷含量的影响,并运用响应面法优化女贞子的酒蒸工艺。结果红景天苷的回归方程为Y=7 185.2X-40.251(r=0.999 5),表明红景天苷在0.020~0.600μg范围内具有良好的线性关系;精密度、重复性、稳定性均符合试验要求;红景天苷的平均回收率为100.71%,RSD为1.92%。响应面法优化的最优炮制工艺为:黄酒用量15.14%,闷润时间2.95 h,蒸制时间9.97 h。结论该法操作简便、准确,灵敏度、精密度高,分析速度快,可作为酒蒸女贞子药材的质量控制;响应面法优化女贞子酒蒸工艺方法简便可靠,能更好地保障酒女贞子的质量。 相似文献
3.
目的探讨维生素D在多囊卵巢综合征(PCOS)中的研究进展,分析维生素D与PCOS之间的相关性,为临床进一步认识及治疗PCOS提供新思路,为中医治疗肾虚型PCOS提供理论依据。方法查阅大量文献,根据PCOS的病理、临床表现,从中西医角度就目前维生素D在PCOS中的相关研究进行综述。结果国内外研究表明,在PCOS患者中普遍存在维生素D缺乏,25-羟基维生素D水平与PCOS患者的排卵障碍、月经紊乱、低妊娠率或不育、高雄激素血症、胰岛素抵抗和肥胖等密切相关。维生素D与肾虚型PCOS可能存在相关性。结论维生素D可能在PCOS的发病及临床症状中发挥了重要的作用,补充维生素D对PCOS有治疗作用,补肾中药可改善肾虚型PCOS临床症状,但仍需更有力证据进一步证实。 相似文献
4.
目的:研究大孔树脂纯化北五味子中总木脂素的工艺条件。方法:以吸附量和解析率为指标,通过静态吸附-解析试验,从不同型号的大孔树脂中筛选出最佳型号的树脂;以解析率为指标,采用单因素试验考察乙醇体积分数、乙醇用量、上样浓度及上样量等对北五味子总木脂素大孔树脂纯化工艺的影响。采用紫外分光光度法测定总木脂素含量。结果:最佳纯化工艺为:取AB-8型树脂20 m L(湿体积)湿法上柱,上样液浓度1.5 mg/m L,上样量6 BV,加5 BV的95%乙醇按3 BV/h的流速进行洗脱。结论:AB-8型大孔树脂对五味子中总木脂素有良好的纯化效果。 相似文献
5.
6.
目的建立安徽省0~6岁儿童末梢血钙、镁常量元素和铜、锌、铁微量元素正常参考值范围。方法按照地理分布和经济水平选取合肥市4个主城区、肥东县、长丰县、肥西县以及铜陵市铜陵县和宿州市萧县儿童保健系统管理中健康儿童9630名,采用原子吸收光谱法测定血中钙、镁、铜、锌、铁元素含量。结果各年龄组间钙、铜、锌、铁元素差异有统计学意义(P<0.05),婴儿期组不同性别铜元素含量差异有统计学意义(P<0.05),学龄前儿童不同性别镁、铜、锌和铁含量差异有统计学意义( P<0.05)。结论儿童末梢血5种元素含量正常参考值范围的建立应综合考虑地域、年龄和性别等因素。 相似文献
7.
目的 探讨内镜黏膜下剥离术(ESD)术中使用纤维蛋白胶喷洒创面预防术后出血的临床效果。
方法 2015年7月至2016年6月,因消化道肿瘤在南京医科大学第一附属医院消化科行ESD治疗的连续病例纳入研究,2015年12月31日前的病例选入观察组,之后的病例选入对照组,观察组退镜结束操作前于手术创面喷洒纤维蛋白胶,对照组则无,对比分析2组的术后出血率、平均住院时间及费用等指标。
结果 观察组的术后出血率为7.45%(12/161),平均住院时间(9.09±2.65)d,平均住院费用(24 246±5 519)元;对照组的术后出血率为14.79%(25/169),平均住院时间(9.20±2.99)d,平均住院费用(25 214±6 258)元。观察组术后出血率明显低于对照组(P=0.035),平均住院时间(P=0.744)及平均住院费用(P=0.138)组间差异均无统计学意义。多因素回归分析同样显示术中使用纤维蛋白胶是ESD术后出血的保护因素。
结论 ESD术中使用纤维蛋白胶能够有效预防术后出血,并且不会明显增加住院时间和费用,是一种有效且经济的方法。 相似文献
目的研究6月龄婴儿出生季节与智能发育的关系,为儿童早期发展指导提供依据。方法合肥市妇幼保健所儿童心理保健科测试的无高危因素且0~6月龄无重大疾病的6月龄婴儿共214例作为研究对象,运用0~6岁儿童智能发育测验与访谈法进行研究。结果不同出生季节的婴儿在6月龄时各能区发育商比较,大运动、精细动作、适应能力、社交、平均发育商差异有统计学意义(P<0.01)。夏季出生的6月龄婴儿发育商分别低于春、冬季出生的婴儿,差异有统计学意义(P<0.01),精细动作、适应能力和平均发育商分别低于秋季出生的婴儿(精细动作P<0.05,适应能力和平均发育商P<0.01),冬春季出生的6月龄婴儿各能区发育商分值高于夏秋季。结论 6月龄婴儿智能发育存在季节差异性。 相似文献
9.
目的 研究不同制备工艺对桃红四物汤中成分的影响。方法 采用高效液相色谱法测定桃红四物汤中没食子酸、5-羟甲基糠醛、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸含量。结果 桃红四物汤A液中5种成分含量均值分别为82.9、11.1、235.7、917.3、49.3 mg/L;桃红四物汤B液中5种成分含量均值分别为126.6、13.2、187.3、1 040.4、28.6 mg/L,说明不同制备工艺使桃红四物汤中5种成分含量产生显著性差异。结论 不同制备工艺得到的桃红四物汤中化学成分种类和含量会产生变化。 相似文献
10.
五味消毒饮熏洗联合心理疏导综合干预阿帕替尼后手足综合征(热毒壅盛)随机平行对照研究 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]观察五味消毒饮熏洗联合心理疏导护理综合干预阿帕替尼后手足综合征(热毒壅盛)疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将60例住院患者按信封法随机分为两组。心理疏导:使患者了解化疗和靶向药物副作用表现、机理和处理措施,减少恐惧心理;皮肤护理:避免手足部摩擦、受压,避免激烈运动和体力劳动,减少手足接触热水次数(包括洗碗碟和热水澡);避免涂刺激性药物及酒精、碘酒;避免接触化学洗涤剂;穿鞋舒适宽松,用减震鞋垫,坐或卧位将手足放在较高位置;避免阳光曝晒,涂抹防晒霜,冬季晒太阳也只能在窗户后。对照组60例尿素软膏外涂;复合维生素B,2片/次,2次/d;疼痛明显塞来昔布,0.2g/次,1次/d。治疗组60例五味消毒饮熏洗(金银花、蒲公英各30g,野菊花20g,紫花地丁30g,紫草、赤芍各15g,当归12g,大黄10g,地黄30g,侧柏叶15g,皮损明显加丹皮、苦参、徐长卿各15g);手足麻木加海风藤15g,路路通30g,川芎10g;皮肤瘙痒加蛇床子、地肤子各15g,蝉蜕10g,上药煎制200mL/袋,1袋/次,加42℃温水熏洗40min,用保鲜膜包裹足部红斑处。连续治疗2周为1疗程。观测临床表现、红肿消除时间、疼痛缓解时间、手足综合征积分(中医证候积分)、皮肤病生活质量指数(DLQI)、不良反应。治疗1疗程(2周),判定疗效。[结果]治疗组痊愈10例,有效18例,无效2例,总有效率93.33%;对照组痊愈6例,有效10例,无效14例,总有效率53.33%;治疗组疗效优于对照组(P0.05)。红肿消除时间、疼痛缓解时间治疗组改短于对照组(P0.05)。DLQI、中医证候积分两组均有改善(P0.01),治疗组改善优于对照组(P0.01)。[结论]五味消毒饮熏洗联合心理疏导护理综合干预阿帕替尼后手足综合征(热毒壅盛),疗效满意,无严重不良反应,值得推广。 相似文献