犬IGF-I编码区cDNA克隆及其序列分析

目的：克隆犬胰岛素样生长因子(IGF—Ⅰ)编码区基因，构建重组真核表达载体。方法：从犬左心室组织中提取总RNA，通过RT—PCR获取IGF—1 cDNA编码区全序列，将其与pcDNA3．1( )质粒载体连接，构建重组真核表达载体pcDNA3．1( )／IGF—1，转化大肠杆菌DH5α后，随机挑选数个克隆，提取质粒DNA，通过限制性酶切和核苷酸序列鉴定阳性克隆。结果：重组质粒pcDNA3．1( )／IGF—1的酶切图谱和序列分析结果与国外文献报道一致。结论：克隆到IGF—1编码区基因，成功构建重组真核表达载体pcDNA3．1( )／IGF—1。     

胶原膜治疗Ⅱ～Ⅲ度根分叉区病变的临床观察

目的:对引导组织再生术(GTR)治疗Ⅱ～Ⅲ度根分叉区病变的短期临床疗效进行评价,分析影响其疗效的因素.方法:选取Ⅱ～Ⅲ度根分叉区病变的患牙21颗,胶原膜治疗11颗,翻瓣术治疗10颗,术后3月通过观察牙龈指数、附着水平、根分叉垂直与水平探诊深度的变化;实验室检测龈沟液量(GCF)及龈沟液碱性磷酸酶(GCF-ALP)活性水平的变化;计算机测量分析根尖片,对2种手术方法的临床疗效进行比较.结果:术后3月①自身前后比较,2组的牙龈指数均无显著性差异(P＞0.05),根分叉垂直与水平探诊深度与GTR组的牙周附着水平,均有明显改善,且有显著性差异(P＜0.05),翻瓣组临床附着水平变化则无显著性差异(P＞0.05);胶原膜组与翻瓣组相比较,除牙龈指数外各项临床指标均具有显著性差异(P＜0.05).②实验室观察:自身前后对照比较.2组GCF量均无显著性差异(P＞0.05),GCF-ALP浓度均减少,且有统计学意义(P＜0.05).胶原膜组与翻瓣组相比较,GCF-ALP浓度减小幅度较大,有显著性差异(P＜0.05).③根尖片的测量:2组根分叉区骨密度均增高,GTR组与对照组相比较,垂直向骨高度增加明显,具有显著性差异(P＜0.05).结论:胶原膜治疗Ⅱ～m度根分叉区病变,可获得良好的短期临床疗效.     

二甲双胍和饮食因素对糖尿病小鼠骨骼肌AMPK活性的影响

将2型糖尿病KK-Ay小鼠分为二甲双胍／高脂饮食、二甲双胍／低脂饮食、高脂饮食和低脂饮食4组，通过测定骨骼肌中腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）活性，发现二甲双胍和低脂饮食均可使AMPK活性增加，二者不存在累加效应。     

手术治疗胃溃疡132例疗效观察

目的 观察外科手术方式治疗胃溃疡的临床治疗效果.方法 收集2008年1月～12月前来就诊的132例胃溃疡患者的手术治疗资料,92例 采取单纯缝合修补手术,23例采取胃大部切除手术,17例采取病灶局部切除缝合手术.分析观察手术疗效.结果 通过胃镜复查显示,显效62例,有效 56例,无效14例,治愈118例,患者手术治疗的总有效率为89.39%.手术后7例患者有并发症,并发症均为切口感染,无肠瘘、腹腔脓肿和死亡病例.结论 胃溃疡通过外科手术的方法治疗,可取得比较高的疗效,降低并发症的发生率,复发性小,临床治疗效果满意,值得推广应用.     

胫骨开放性骨折的分型与治疗

目的探讨Gustilo分型对胫骨开放性骨折临床治疗的指导意义,寻求制定正确治疗方案的理论依据,预测病情转归,客观地对治疗效果进行比较,有利于经验的积累和传递。方法回顾性分析2004年10月至2006年3月获得完整随访资料的胫骨开放性骨折45例患者(47胫骨),依Gustilo分型选择相应不同的治疗方式,并将治疗结果进行比较。结果本组病例中GustiloⅠ型4例,Ⅱ型9例,ⅢA型17例,ⅢB型13例,ⅢC型4例;对于全部Ⅰ型和Ⅱ型及部分Ⅲ型病例,清创后1期采取内固定,无深部感染发生,对于部分Ⅲ型病例,采取外固定架固定,深部感染率为8.5%,骨不愈合率为6.4%。结论对开放性胫骨干骨折应用Gustilo分型进行初始评判、反复彻底清创;尽早的软组织覆盖,可获得理想的治疗效果,对判断预后亦有重要的临床意义。     

普外科切口感染病原菌分布及相关因素调查

目的研究普外科切口感染病原菌分布及相关因素,为临床感染预防提供参考。方法收集分析507例普外科围手术期患者档案资料。无菌采集手术切口分泌物,并进行培养和鉴定。采用Kirby-bauber纸片扩散法检测抗药性。分析不同年龄、性别、切口类型、手术时间、是否患有糖尿病和抗生素使用时机等患者切口感染情况。实时荧光PCR检测铜绿假单胞菌OprD2基因表达情况。结果507例患者中共有46例患者发生切口感染,感染率为9.07%。培养出46株病原菌,其中革兰阳性菌27株,革兰阴性菌19株。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和表皮葡萄球菌是主要致病菌。革兰阳性菌对头孢呋辛酯、头孢曲松、头孢吡肟、诺氟沙星、环丙沙星、加替沙星、复方新诺明、红霉素、阿奇霉素、庆大霉素、阿米卡星和利福平耐药情况依次为:52.17%、47.83%、21.74%、48.15%、40.74%、3.70%、65.22%、81.48%、40.74%、43.48%、4.35%和11.11%。革兰阴性菌对头孢呋辛酯、头孢他啶、头孢吡肟、诺氟沙星、环丙沙星、加替沙星、复方新诺明、红霉素、阿奇霉素、庆大霉素、阿米卡星、美罗培南和亚胺培南耐药率依次为:84.21%、42.11%、31.58%、52.63%、47.37%、10.53%、84.21%、78.95%、21.05%、52.63%、10_53%、15.79%和5.26%。不同年龄、切口类型、手术时间、是否患有糖尿病和抗生素使用时机等患者切口感染率差异均有统计学意义(P<0.05)。11株铜绿假单胞菌中5株检出VIM、3株检出IMP,3株OprD2呈低表达或缺失,4株OprM高表达。讨论切口感染中铜绿假单胞菌分离数量较多,可能与它对临床使用抗生素天然耐药有关。OprD2呈低表达或缺失使得铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐受性上升。     

不同保存方法对蚊虫RNA保护效果的评价

目的研究适合口岸媒介生物监测的蚊虫样本保存方法,并对蚊虫RNA保护效果进行评价。方法采用普通冰箱、低温冰箱、液氮、RNALater等保存方式,对蚊虫进行1周、1个月、6个月保存,提取蚊虫RNA,比较这些保存方式对蚊虫RNA保护效果。结果 RNALater与液氮对蚊样本均具有良好的保存效果,在1周、1个月、6个月内,蚊虫RNA均未见明显降解;低温冰箱在1周、1个月内对蚊样本有较好的保存效果,蚊虫RNA未见明显降解,但6个月后,蚊虫RNA降解明显;常温冰箱(-20℃)保存效果不佳,仅在1周之内对蚊虫核酸有一定的保护效果,1个月后,RNA发生明显降解。结论 RNALater、液氮和低温冰箱在1个月内对蚊虫RNA均具有较好的保存效果,但RNALater具有保存时效长、使用方便等优点,更适用口岸蚊虫监测中样本的保存和运输。     

16S rRNA基因序列分析法在输入性蜚蠊携带病原菌检测中的应用研究

目的 应用16S rRNA基因序列分析法对江苏口岸输入性蜚蠊携带的细菌进行快速检测.方法 用研磨器将蜚蠊研碎,用LB培养基增菌和分离培养,随机挑选细菌单克隆,提取DNA,对16S rRNA基因进行PCR扩增,扩增产物进行序列分析、比对,确定细菌种属.结果 从输入性蜚蠊中共分离鉴定出23种细菌,分属15属.结论 输入性蜚...     

人角化细胞生长因子-1的克隆及其在骨髓基质细胞中的表达

目的 从人胚肺成纤维细胞中克隆人角化细胞生长因子-1（KGF-1）编码区序列,构建真核荧光表达载体.方法 从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA,通过反转录 PCR获取KGF-1 cDNA编码区序列,将其与pIRES2-EGFP质粒载体连接,构建重组表达载体pIRES2-EGFP/KGF-1,测序鉴定.将pIRES2-EGFP/KGF-1瞬时转染骨髓基质细胞（marrow stroma cells,MSCs）48 h后,免疫荧光法检测骨髓基质细胞是否存在KGF-1蛋白的表达.结果 构建的重组质粒pIRES2-EGFP/KGF-1经序列分析示与国外文献报道一致.KGF-1免疫荧光法激光共聚焦检测结果证实,pIRES2-EGFP/KGF-1转染骨髓基质细胞后,存在KGF-1蛋白的表达,定位于细胞浆内.结论 成功构建重组真核荧光表达载体pIRES2-EGFP/KGF-1,初步探讨了该基因在骨髓基质细胞中的表达,为其在皮肤组织工程的运用奠定了基础.     

重度烧伤早期肠内营养治疗的护理体会

目的研究重度烧伤后实施肠内营养的有关护理注意事项。方法将重度烧伤患者22例随机分组为实验组(11例)及对照组(11例),实验早期使用肠内营养,对照组早期使用肠外营养。分别于伤后1、3、7d观察比较白蛋白、前清蛋白、便潜血等指标。结果实验组伤后7d白蛋白、前清蛋白明显高于对照组(P<0.05),实验组潜血发生观察到2例,对照组潜血发生5例,两组比较差异显著(P<0.05)。结论早期肠内营养可明显改善重度烧伤患者的营养水平,对严重烧伤应激性溃疡的发生有一定的预防作用。