海绵共附生真菌Penicillium chrysogenum次级代谢产物的化学成分及生物活性研究

目的 对分离自西沙隋氏蒂壳海绵共附生真菌Penicilliumchrysogenum的次级代谢产物进行化学成分及其生物活性研究,以期发现结构特异并且活性良好的次级代谢产物。方法 对隋氏蒂壳海绵共附生真菌Penicilliumchrysogenum用真菌2号培养基发酵,发酵后的菌丝体采用溶剂提取、萃取和现代色谱分离纯化手段,再运用现代核磁波谱技术并结合高分辨质谱鉴定化合物结构。基于微阵列技术的表面等离子体共振成像（SPRi）系统,检测化合物与肿瘤相关蛋白的相互作用,并提供化合物与肿瘤相关蛋白的结合动力学数据。结果 通过分离隋氏蒂壳海绵共附生真Penicilliumchrysogenum的菌丝体提取物,从中分离鉴定了7个单体化合物,鉴定结果为conidiogenone（1）、2-acetylquinazolin-4(3H)-one（2）、15β-hydroxyl-(22E,24R)-ergosta-3,5,8,22-tetraen-on（3）、ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one（4）、 2-((2E,4E)-hexa-2,4-dienoyl)-5,6-dihydroxy-4,6-dimethylcyclohex-4-ene-1,3-dione（5）、(22E)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol（6）、2-(1-hydroxyethyl)quinazolin-4(3H)-one（7）。结论 化合物3和6是从Penicillium属内第一次分离得到,化合物4是从真菌Penicilliumchrysogenum中第一次分离得到,化合物5与肿瘤蛋白VEGFR-1、FGFR有亲和作用,KD的数值分别为7.78×10-3和1.44×10-1 μmol/L。     

海星中具有生物活性总皂苷的分离纯化

目的利用稻瘟霉生物活性成分跟踪筛选模型,对海星中皂苷进行提取和分离纯化。方法用65%EtOH对粉碎的海星(干)进行回流提取,减压浓缩后均匀分散于水中,用石油醚和正丁醇进行萃取,浓缩正丁醇得海星总皂苷,对其进行稻瘟霉生物活性测试。海星总皂苷粗提物通过正相硅胶、反相硅胶及葡聚糖凝胶LH-20柱层析进行分离纯化。用薄层层析法(TLC)检测把相同的洗脱液收集在一起,得到所需要的有效部位。结果与结论通过稻瘟霉生物活性筛选知海星乙醇粗提物、海星总皂苷均具有抗有丝分裂活性,而石油醚粗提物没有显著的活性。海星总皂苷通过正相硅胶和反相硅胶柱层析分离得到D1～D66个含有海星皂苷的组分,其中D1、D3、D4、D5、D6在TLC上呈现出单一斑点。D2进一步通过葡聚糖凝胶LH-20柱层析进行分离,得到收率约为81.2%的组分a,收率约为3%的组份b。     

超声波辅助提取赤豆中总黄酮的工艺研究

目的 确定超声波辅助提取赤豆中总黄酮的最佳提取工艺,测定赤豆中总黄酮的含量.方法 通过单因素实验考察了超声时间、超声功率、提取温度、乙醇浓度、液料比和pH值对总黄酮提取率的影响.在单因素实验的基础上,利用正交实验法确定超声波辅助提取赤豆中总黄酮类化合物的最佳工艺条件.结果 所考察的因素中,对赤豆中总黄酮提取的影响程度为:乙醇浓度>超声时间>液料比>pH值.结论 超声波辅助提取总黄酮的最佳提取条件为:超声时间30 min,超声功率600 w,提取温度60℃,乙醇浓度为60%,液料比25:1,pH值为4.提取3次,总黄酮提取率为1.081%.     

人甲状旁腺素活性片段前体物Pro-Pro-hPTH(1-34)的制备及活性研究

目的制备出具有生物活性的人甲状旁腺素活性片段类似物,并对其活性进行考察。方法采用基因工程方法:大肠杆菌BL 21为宿主菌,pET 28a为表达载体,天门冬酰胺酶Ⅱ切除信号肽的C末端片段为融合伙伴,在融合伙伴和目的肽结合处引入Asp Pro酸敏感位点及二肽酶Ⅳ识别的N端Pro Pro位点,之后经诱导表达,酸水解使融合伙伴和目的肽分离。结果成功构建了hPTH(1 34)的融合表达体系,它能高效表达含hPTH(1 34)的融合蛋白,经纯化,得到多肽纯品,经鉴定,该多肽的分子量、氨基酸组成均与设计的分子相符,工程菌中用于编码该多肽的DNA片段其测序结果也与原设计相符,是表达该多肽的正确模板。该多肽在Parsons雏鸡分析及卵巢摘除大鼠模型试验中均显示显著活性。结论用基因工程方法成功地制备出人甲状旁腺素活性片段类似物,该产物具有显著生物活性及潜在的药用价值。     

海绵共附生真菌抗菌活性次级代谢产物研究进展

海绵共附生真菌次级代谢产物具有独特的化学结构和显著的生物学活性,是创新药物研发的重要来源。这些次级代谢产物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)等多种致病菌株具有潜在的抗菌活性。本文综述了2002—2020年之间经文献报道的85个源自海绵共附生真菌的具有抗菌活性的次级代谢产物,结构类型包括生物碱类、聚酮类、蒽醌类、甾体类、肽类及萜类,旨在为抗菌药物进一步研究提供参考。