噬菌体展示TM-TNF-α模拟肽体内杀瘤效应的研究

目的　研究噬菌体展示TM -TNF- α模拟肽的体内杀瘤效应及机制。方法　大量制备所需的噬菌体展示肽,比较不同展示肽对小鼠的肝癌细胞H2 2的体外杀瘤效应,挑取杀瘤效应最好的展示肽并选择其合适的滴度进行体内实验。小鼠接种H2 2细胞3d后,于肿瘤接种部位皮下注射噬菌体展示肽,观察肿瘤的生长情况。结果　噬菌体展示TM- TNF -α模拟肽在体内能明显抑制肿瘤的生长(P <0 .0 1)。且抑瘤率与展示肽之间呈剂量依赖关系。HE染色发现展示肽治疗组肿瘤组织中有大量淋巴细胞浸润,而sTNF- α治疗组除淋巴细胞浸润还可见中性粒细胞、浆细胞浸润。结论　直接注射噬菌体展示TM -TNF -α模拟肽可在体内有效杀瘤,其杀瘤机制可能不同于分泌型TNF -α。     

结直肠癌中LncRNA介导的内源性竞争性RNA调控网络

【摘要】 目的 构建结直肠癌RNA调控网络,探讨结直肠癌中分子调控机制。方法 从TCGA数据库中提取结直肠癌转录水平表达数据,筛选差异表达RNAs,结合miRDB, miRcode, miRTarBase和TargetScan数据库靶基因预测 结果,整合LncRNA- miRNA.miRNA-mRNA关系对,基于ceRNA假说及LncRNA细胞内定位,筛选出胞质表达并介导该网络调控的LncRNA,重建结直肠癌中IncRNA-miRNA-mRNA作用网络。结果 在结直肠癌差异表达基因分析中初步筛选出119个LncRNA、32个m沢NA以及59个mRNA;识别777对LncRNA-miRNA与77对miRNA-mRNA, 基于ceRNA假说以及LncRNA在细胞内定位,最后筛选出15个上调LncRNA、3个下调miRNA(hsa-mir-145, hsa-mir- 193b, hsa-mir-150)以及5个上调mRNA重建ceRNA网络。结论 成功构建结直肠癌中LncRNA介导调控的ceRNA 网络,识别出预后相关的潜在靶点,为结直肠癌治疗研究提供了新的参考依据。     

浅谈临床医学生实验诊断学教学体会

实验诊断学是临床医学的基础学科。它是运用检验结果所反映的机体功能状态、病理变化或病因等客观资料,进行全面系统的综合分析,来判断健康状态及指导临床诊断、病情检测、疗效观察和预后评估等的一门学科,是诊断和解释疾病规律最基本的理论和方法,是医学生必须掌握的基础课程之一[1]。     

肿瘤坏死因子α在乳腺癌中的表达及其与雌激素受体的相关性

目的研究肿瘤坏死因子α（TNF—d）在乳腺癌中的表达及其与雌激素受体（ER）的相关性研究。方法采用免疫组织化学SABC法检测112例原发性乳腺癌患者肿瘤组织中TNF—α的表达,分析TNF—α在乳腺癌中的表达、与乳腺癌组织学分级的关系以及和ER的相关性。结果正常乳腺组织、乳腺小叶增生标本中TNF—α的阳性表达率分别为6．67％（1／15）、12．00％（3／25）。乳腺癌中TNF—α的阳性表达率为33．93％（38／112）。乳腺癌中TNF-α阳性表达率显著高于正常组织和乳腺小叶增生组织（X^2=8．573,P=0．014）。乳腺癌组织学分级为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级时,TNF—α阳性表达率逐渐升高,分别为27．77％（15／54）、37．83％（14／37）、38．10％（8／21）,但差异无统计学意义（X^2=1．304,P=0．521）。ER阴性时TNF—α的阳性率为25．00％（21／84）,ER阳性时TNF-α的阳性率为60．70％（17／28）。ER和TNF-α在乳腺癌中的表达呈正相关（X^2=11．949,P=0．001）。结论TNF—α在乳腺癌组织中的阳性表达率高于正常组织和小叶增生组织,与ER在乳腺癌中的表达呈正相关,机制尚不明确．有待更多研究。     

肿瘤坏死因子转化酶(TACE)最新研究进展

1 TNF-α裂解酶的发现TNF-α前体(TM-TNF-α)需要加工去除氨端76个氨基酸残基,才能成为游离型TNF-α(S-TNF-α),进入循环系统。80年代末,人们认为这一加工过程依赖于丝氨酸蛋白水解酶;到了90年代,人们知道参     

利用流感病毒反向遗传学操作系统表达绿色荧光蛋白(EGFP)

目的 构建基于RNP复合体的流感病毒反向遗传学操作系统,并利用该系统表达绿色荧光蛋白.方法 将人源pol Ⅰ启动子分别插入真核表达载体pcDNA3和原核质粒pUC18,获得pol Ⅰ/pol Ⅱ双启动子表达载体pCHBW和pol Ⅰ单启动子表达载体pPol IR;来源于禽流感病毒H5N1湖北分离株A/Chicken/Hubei/489/2004的基因被克隆到pCHBW上,获得pCHBW-PB2、pCHBW-PB1、pCHBW-PA、pCHBW-NP;将荧光蛋白基因置换NA基因的编码区进而克隆到pPol IR上获得pPol IR-NA (EGFP);这些质粒共转染293T细胞并观察荧光.结果 所构建的载体均经酶切和测序验证正确.pCHBW-PB2、pCHBW-PB1、pCHBW-PA、pCHBW-NP和pPol IR-NA (EGFP)共转染293T细胞后能观察到绿色荧光,Western-blot实验证实被转染的293T细胞表达绿色荧光蛋白(EGFP).结论 基于RNP复合体的反向遗传操作系统构建成功,并表达绿色荧光蛋白.     

TNF结合肽和TNFR封闭肽对TNF-α体外介导的生物学抑制效应的实验研究

目的检测TNF-α结合肽(TBP)和TNFR封闭肽(TRBP)的生物学特性及功能。方法以GFP-TNF融合蛋白竞争结合实验,检测TBP和TRBP的特异性。用非变性PAGE检测TBP和TRBP的互补结合性。用细胞毒抑制实验,观察TBP和TRBP对TNF-α杀伤U937细胞的抑制作用。用硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力和RT-PCR技术,检测TBP和TRBP对TNF-α诱导的人外周血单核细胞的呼吸爆发和对促炎症因子IL-1β和IL-8mRNA水平的抑制作用。结果TBP和TRBP能抑制GFP-TNF融合蛋白与细胞膜上TNFR的结合。非变性PAGE证明,TBP与TRBP之间的结合,为非配体和受体的结合;TBP和TRBP对TNF-α的细胞毒效应均有抑制作用,且随着剂量的增加而增强,二者联用(即pep.38 X4)效果更好。TBP和TRBP联用,能有效地抑制TNF-α和IFN-γ诱导的单核细胞呼吸爆发的强度,抑制TNF-α诱导的IL-1β和IL-8mRNA的转录。结论TBP和TRBP具有结合TNF-α和TNFR的特异性,但二者的结合为非配体和受体的相互结合。TBP和TRBP对TNF-α介导的各种生物学效应均具有抑制作用,二者联用效果更显著。     

刍议病例引导式医学检验技术虚拟仿真实验库的构建

医学检验技术作为一门实践性极强的学科,从传统的实验教学模式向虚拟仿真实验教学模式的过渡和转变,已然成为高校医学检验技术专业教学改革的新方向和新趋势。文章从基层教师角度,对医学检验技术专业传统实验教学的局限性、虚拟仿真实验教学的作用和发展现状进行了总结,并着重从项目设计、项目内容和教学方法、教学评价体系等方面进行了思考,提出了“病例引导式医学检验技术虚拟仿真实验库”的构建设想,以及基于该设想建立不同类型疾病间的网络式学习,以促进医学检验技术专业虚拟仿真实验教学水平的不断提高。     

内皮型一氧化氮合成酶基因Glu298Asp多态性与糖尿病肾脏病的关系

目的探讨内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）基因Glu298Asp多态性与糖尿病肾脏病（DIcD）的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）后限制性内切酶消化技术，对在我院就诊的326例中国汉族2型糖尿病（T2DM）患者和215名健康体检者进行Glu298Asp基因型分析。根据尿白蛋白排泄率（UAER）水平将T2DM患者分为3组：UAER正常组（DM组）102例，微量白蛋白尿组（MAU组）81例，临床肾病组（DKD组）143例。选择同时期本院健康体检者215名为对照组。用多因素Logistic回归分析法判定DKD的独立危险因素。结果DKD组与对照组Glu298Asp基因型频率分布存在显著性差异（GG72．72％、GT26．57％、TT0．70％比GG83．41％、GT16．10％、TT0．49％，P=0．019），而DM组和MAU组则与对照组无差异（P〉0．05）。Logistic回归分析显示，年龄、平均动脉压、GT基因型是DKD发生的独立危险因素。结论eNOS Glu298Asp基因与中国汉族T2DM患者DKD具有相关性。