O-葡萄糖醛酸苷的生物合成研究进展

葡萄糖醛酸结合反应是机体内重要的一类代谢反应,其中O-葡萄糖醛酸结合是最常见的反应类型。O-葡萄糖醛酸苷的制备对于准确评估葡萄糖醛酸代谢产物的药理活性及安全性、药物代谢和药动学定量分析等研究至关重要。利用尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)生物合成目标代谢物是制备葡萄糖醛酸苷的重要手段之一。综述了近年来利用生物转化技术制备O-葡萄糖醛酸苷的研究进展,包括利用植物、微生物、动物来源及人重组UGT酶等不同方法制备O-葡萄糖醛酸苷的最新进展,同时还综述了近年来国内外通过对生物反应体系和转化工艺的改进与优化,实现葡萄糖醛酸苷高效制备的相关技术和工艺特点。     

β-葡萄糖醛酸苷酶的重组表达及对黄芩苷的生物转化

目的 构建表达β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,GUS)的重组菌株,得到高纯度β-葡萄糖醛酸酶,进而对黄芩苷进行生物转化获得黄芩素.方法 以E.coli K12基因组DNA为模板,采用PCR方法 扩增GUS基因,经酶切后连接到表达载体pET-28a中,获得重组表达载体pET28a-GUS,将重组载体转化到感受态细胞BL21(DE3)中,对所得基因工程菌进行培养条件和表达条件的优化;后经分离纯化后得到高纯度β-葡萄糖醛酸酶.以黄芩苷为底物进行酶法转化生产黄芩素,并对反应条件进行优化.结果 经测序,扩增的重组质粒目的基因序列与数据库中GUS基因序列一致.经IPTG(isopropy-β-D-thiogalactoside)诱导表达后, SDS-PAGE分析获得分子质量70 kDa的单一蛋白条带,工程菌最适培养条件为: 37 ℃、pH7.2、IPTG浓度0.6 μmol/L、诱导时间12 h.经过离心破碎、亲和层析、冻干后得到高纯度β-葡萄糖醛酸酶冻干粉.在该酶催化转化下,黄芩苷可转化为黄芩素,在40 ℃,pH 6.5,酶浓度60 μg/mL条件下,反应2.5 h,黄芩苷转化率可达72.5%.结论 成功构建了β-葡萄糖醛酸苷酶高表达菌株,并用于黄芩苷的定向水解制备黄芩素,为生物转化法生产黄芩素提供了新思路.     

医学院校生物技术专业本科生微生物学教学改革初探

医学院校生物技术专业如何逐渐摆脱原有的以病原微生物为中心的医学微生物教学模式束缚,应在教学内容、方法和手段等方面进行教学改革,利用医学院校的特有资源建立特色鲜明的普通微生物学教学新模式,努力探索出一套科学、合理的微生物学教学体系对培养适应现代生命科学技术及市场发展需要的生物技术创新人才,具有重要意义。     

罗红霉素对BALB/c小鼠肠道菌群的影响

目的应用PCR-DGGE技术评价罗红霉素对BALB/c小鼠肠道菌群的影响。方法选用SPF级BALB/c小鼠,按5mg/0.1kg每天灌服水溶性罗红霉素10d,停药7d。分别在实验的0d、3d、10d以及停药7d收取每只小鼠粪便,提取基因组DNA,应用PCR-DGGE(聚合酶链式反应——变性梯度凝胶电泳)技术获得肠道菌群分子指纹图谱,进行相似性、多样性分析及优势条带的序列分析。结果 PCR-DGGE可明确将实验0d、3d、10d以及停药7d小鼠分为4个簇,且灌服罗红霉素的小鼠肠道菌群结构多样性明显减少,序列分析表明灌药前后小鼠粪便标本中的拟杆菌和丁酸梭菌分别为优势菌型。结论罗红霉素对BALB/c小鼠肠道菌群有显著影响。     

呼吸系统微生态演替与人类健康

呼吸系统微生态是人体微生态重要组成部分。呼吸道正常菌群相当于机体的天然屏障,这些固有的微生物群在抵御外籍菌入侵方面具有重要的作用,同时还发挥着局部免疫功能。正常情况下,呼吸道各部位的微生物种类和数量相对稳定。对呼吸道正常菌群演替次序和变化特征的深入研究是认识呼吸系统炎症本质、开发呼吸道益生菌的理论基础。     

人类对益生菌和肠道菌群认识的方法论价值

人们对微生物的认识经历了漫长的历史过程。虽然人们最初认为微生物是导致疾病、摧残生命的病原菌,但随着科学技术手段的不断完善,人们逐渐了解并利用与生命息．息相关的微生物——益生菌。事实上,病原菌只是细菌的一部分,大多数细菌能给人类带来很大好处。人类对益生菌和肠道菌群的认识在方法论上实现了突破,实践证明,只有用科学的方法论辩证认识微生物并指导相关研究,才能更好地对其加以利用,造福人类。     

蜜桑白皮的体内降脂作用研究＊

目的 考察蜜桑白皮的体内降脂减肥作用。方法 建立小鼠高脂肥胖模型，随机分为正常对照组、肥胖模型组、蜜桑白皮灌胃组、阳性对照组，记录小鼠体重，测定肾周脂肪指数和附睾脂肪指数，及血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平。此外，通过Autodock模拟蜜桑白皮中主要成分与脂质代谢关键酶——羟甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGR）及羧酸酯酶I（hCES1A）的相互作用，预测其调节血脂作用机制。结果 蜜桑白皮组可显著减缓小鼠体重增加，并有效降低LDL-C水平，其效果优于阳性奥利司他药物组。经Autodock分子对接发现，主要成分桑色素及桑根酮C可分别通过氢键与HMGR的催化活性中心Asp-767、及hCES1A关键氨基酸Cys-389产生较强的相互作用。结论 蜜桑白皮具有良好的减肥降脂作用。     

提高生物制药专业本科生创新能力的教学改革方法初探

生物技术制药(生物制药)是一门综合性、前沿性及应用性非常强的学科,随着科学技术的迅猛发展,生物制药已经成为最活跃、发展最快的学科之一.培养高素质的具有创新精神的生物制药人才,对推动我国生物制药产业的发展有着极其重要的意义.本文以拓展生物制药本科生创新思维为目标,从生物制药专业的特点人手,提出了培养学生创新能力的五种方法,并结合实例对方法的具体形式、特点进行了阐述,从而提高生物制药专业本科生的创新能力.