月华胶囊对耐多药结核分支杆菌感染自噬的影响

目的:以月华胶囊含药血清对耐多药结核分支杆菌感染小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)进行干预,探讨其对耐多药结核分支杆菌感染巨噬细胞自噬的作用及其机制。方法:低温冷冻干燥法制备月华胶囊,大鼠按3.02 g·kg^-1灌胃给药7 d,制备月华胶囊含药血清。体外培养RAW264.7,耐多药结核分子杆菌。以细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测含药血清对RAW264.7的增殖能力并选定其有效浓度。细胞分为模型组(10%胎牛血清);月华胶囊含药血清组(10%月华胶囊);自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)+月华胶囊含药血清组(5 mg·L^-1的3-MA+10%月华胶囊含药血清);雷帕霉素(Rap)组(200 mg·L^-1的Rap+10%胎牛血清);正常组(10%胎牛血清)。除正常组外,各组细胞培养24 h后,按细胞-细菌1∶10感染4 h。透射电镜观察细胞自噬体的出现和形成;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中I型微管相关蛋白轻链3(LC-3Ⅰ),Ⅱ型微管相关蛋白轻链3/I型微管相关蛋白1轻链3(LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ),Beclin-1蛋白的表达;间接免疫荧光染色法观察细胞中LC3B荧光颗粒、斑点及亮度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中LC3,Beclin-1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量均无显著变化,细胞无荧光颗粒、斑点,无荧光亮度。与模型组比较,月华胶囊含药血清组及Rap组细胞,均可观察到自噬体的形成,细胞LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均明显升高(P<0.05),月华胶囊含药血清组细胞荧光颗粒和荧光斑点明显增多,Rap组细胞荧光颗粒和荧光斑点增多非常明显,荧光闪亮,可判定细胞荧光呈现为阳性;自噬抑制剂3-MA+月华胶囊含药血清组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均无明显升高。结论:月华胶囊含药血清能使耐多药结核分支杆菌感染细胞产生自噬而发挥抗结核的免疫效应,其机制是通过调控自噬相关蛋白LC3,Beclin-1蛋白及其mRNA的表达水平,促使LC3-I趋向LC3-Ⅱ的转化加快而实现的。     

“5+3”中医学专业医学免疫学教学改革的探索与实践

对"5+3"中医学专业的医学免疫学课程教学模式进行改革和探索,将医学免疫学独立成为一门课程,同时修改教学计划、调整教学内容、开展创新性实验教学和采用多种教学方法和手段等,以期找到一种适合"5+3"中医学专业的医学免疫学教学模式,达到提高学生学习效果、促进学生科研能力提升的目的。     

泌尿生殖道支原体感染状况调查及药敏结果分析

应用Mycoplasma ICS试剂盒对1523例泌尿生殖道系统感染患者进行支原体培养和药敏试验，支原体阳性率为44.39%。解脲支原体感染占90.53%，药敏试验对交沙霉素、米诺环素（美满霉素）、强力霉素敏感;人型支原体感染占3.40%，对强力霉素、米诺环素、交沙霉素敏感;解脲支原体合并人型支原体感染占6.07%，对强力霉素、交沙霉素、美满霉素敏感。根据药敏结果合理用药，对防止支原体耐药株产生具有重要意义。     

灭幽汤对幽门螺杆菌感染性胃炎小鼠胃组织IKKβ表达的影响

目的探讨IκB分子的上游蛋白激酶(IKKβ)在幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)病理变化的可能作用机制及灭幽汤的影响效应。方法建立HAG模型,将造模成功的小鼠按体质量随机分为模型组、丽珠得乐组,灭幽汤组。采用免疫组化法检测胃黏膜组织中核转录因子(NF-κB)、IKKβ的蛋白表达情况。HE染色观察胃组织病理变化。结果灭幽汤组能明显减轻胃组织的炎症反应,灭幽汤组胃黏膜炎症程度低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);能抑制HAG胃组织中NF-κB、IKKβ蛋白的活性,灭幽汤组NF-κB、IKKβ表达强度明显低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NF-κB和IKKβ在HAG的炎症反应中发挥重要的作用,灭幽汤治疗HAG的可能作用机制是通过抑制IKKβ的激活,阻止其活化。     

MKR转基因糖尿病小鼠血糖血脂与血清炎症因子CRP、IL-6、TNF-α的相关性分析

2型糖尿病发病机制较为复杂,至今尚未完全阐明,炎症反应发病学说备受关注,这种炎症反应被认为是一种亚临床炎症,是导致胰岛素抵抗、胰岛β细胞损伤和血管内皮细胞功能紊乱,从而对糖尿病及其慢性血管并发症的发生发展起着重要作用[1].     

目安眼膏抗单纯疱疹病毒的最佳浓度研究

目的探索目安眼膏抗单纯疱疹病毒(HSV-1)作用的最佳浓度,为目安眼膏处方设计提供依据。方法将模型兔随机分为7组,每组4只(8眼),采用兔角膜上皮划痕法造模。Ⅰ组～Ⅳ组:分别给予含0%、3%、5%、7%蜂蜜和3%阿昔洛韦(ACV)的目安眼膏;Ⅴ组:模型组;Ⅵ组:给予3%阿昔洛韦眼膏;Ⅶ组:凝胶基质组。接种病毒后第9天,透射电镜观察角膜上皮情况。结果通过电镜观察,含5%蜂蜜的目安眼膏组用药后兔角膜上皮表面微绒毛丰富,细胞层次排列规则,可见相互重叠的扁圆形细胞核,核型较规则,细胞间连接紧密,细胞外胶原纤维结构排列整齐,基质中成纤维细胞形态正常。细胞结构、形态恢复均优于其它各组。结论含5%蜂蜜的目安眼膏对HSV-1抑制作用最强,并有促进角膜上皮修复、愈合、再生作用。     

降糖益肾方对MKR鼠2型糖尿病肾病早期的保护作用

目的探讨滋阴益气、补肾活血解毒法组方(降糖益肾方)对MKR转基因小鼠2型糖尿病肾病早期的保护作用。方法15周龄MKR鼠24只,根据性别和空腹血糖分层,随机分为3组,即模型组、中药组[降糖益肾方16.72g/(kg·d)]、西药组[格列喹酮4.33mg/(kg·d)+贝那普利1.44mg/(kg·d)],同期另设C57BL/6野生型小鼠为正常组。用药组分别给予相应剂量药物灌胃,模型组和正常组给予等容量蒸馏水灌胃。30d后,同步观察各组小鼠的空腹血糖、尿微量白蛋白和尿β2-微球蛋白(ELISA法)的含量,电镜观测肾脏病理改变。结果给药30d后,降糖益肾方能显著降低MKR鼠空腹血糖、尿微量白蛋白和尿β2-微球蛋白的排泄,与给药前比较,P0.01;与模型组比较,P0.01。电镜结果显示:降糖益肾方组肾小球基底膜增厚减轻,系膜区基质堆积减少。结论降糖益肾方能显著改善MKR鼠空腹血糖、降低尿微量白蛋白和尿β2-微球蛋白的含量、改善肾脏的病理损害,从而延缓MKR鼠肾脏病变的进一步发展。     

加味四逆散对血吸虫病小鼠肝纤维化相关因子表达的影响

目的观察加味四逆散对血吸虫病肝纤维化小鼠透明质酸（HA）、血清III型前胶原（PcIII）、羟脯氨酸（Hyp）及转化生长因子-β。（TGF—β1）mRNA表达的影响。方法NIH小鼠经皮肤人工感染血吸虫尾蚴后随机分为4纽：模型组（B组）、吡喹酮组（C组）、吡喹酮＋加味四逆散组（D组）、吡喹酮＋秋水仙碱组（E组）,同时设正常对照组（A组）。病理观察小鼠肝组织,于肝纤维化形成后第21日开始灌服相应药物及生理盐水,C、D、E组在第45日时予以吡喹酮一次性灌胃进行杀虫,第78日小鼠心脏采血用放免法测定血清PC III和HA含量,取肝组织匀浆测定Hyp含量;RT—PCR检测TGF—β1 mRNA的表达。结果HA水平D组高于A组,低于B、C、E组（P〈0．01,P〈0．05）;PC III水平D组低于B、C、E组（P〈0．05）;Hyp水平D组高于A组,低于B、C、E组（P〈0．05）;TGF-β1 mRNA表达D组低于B、C、E组（P〈0．05）。结论加味四逆散联合吡喹酮能有效改善血吸虫病小鼠肝纤维化,降低TGF-β1 mRNA的表达。     

左归降糖清脂方对2型糖尿病转基因MKR 鼠脂肪肝发生的影响

目的:探讨左归降糖清脂方对2型糖尿病转基因MKR鼠脂肪肝发生的影响。方法:30只MKR鼠随机分为MKR组、MKR高脂组和左归降糖清脂方组;左归降糖清脂方组以生药29.64 g.kg-1 ig干预治疗高脂饮食诱发脂肪肝的MKR鼠,观察其肝脏病理形态、血糖、血胰岛素、肝功能和血脂变化。结果:高脂饲料诱发MKR鼠形成非酒精性脂肪肝,肝细胞有大小不一的脂滴,呈脂肪性变;MKR高脂组小鼠空腹血糖、血胰岛素、肝质量、肝指数、肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)]、血清总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于MKR组(P<0.05,P<0.01),甘油三酯(TG)下降,低于MKR组(P<0.01)。2型糖尿病并发脂肪肝MKR鼠经左归降糖清脂方治疗后,肝细胞内脂肪性变得到改善,空腹血糖、血胰岛素、肝质量、肝指数、肝功能指标(ALT,AST)和血脂(TCHO,LDL-C和TG)显著下降,低于MKR小鼠(P<0.05,P<0.01);HDL-C高于MKR小鼠(P<0.05)。结论:左归降糖清脂方可通过调节高脂饮食MKR鼠体内的糖脂代谢,改善肝脏脂肪性变。     

Effects of Qiwei Baizhu San（七味白术散）in Inhibiting Replication of Human Rotavirus in Vitre

ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＱｉｗｅｉＢａｉｚｈｕＳａｎ（七味白术散）ｉｎＩｎｈｉｂｉｔｉｎｇＲｅｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＨｕｍａｎＲｏｔａｖｉｒｕｓｉｎＶｉｔｒｅＨＥＳｈｕａｎｇ－ｔｅｎｇ（贺双腾）；ＨＥＦｅｉ－ｚｈｏｕ（何飞舟）；ＬＩＳｈｕｎ－ｘｉａｎｇ（李...