T淋巴细胞-E玫瑰花试验检测胸腺肽生物学活性影响因素的探讨

欲完善和改进T细胞-E玫瑰花试验的检测条件,提高制品生物学活性检测的准确性。探究了E玫瑰花试验的影响因素。观察比较不同的脱E受体法、淋巴细胞和绵羊红细胞的比例、Hank s液的pH、离心速度对形成E玫瑰花结花率的影响以及染色和计数时间对E玫瑰花结花率观察的影响。观察不同来源的淋巴细胞与不同种红细胞形成E玫瑰花的相关情况。实验显示,脱E方法的优化更能反映胸腺肽制品的生物学活性,E玫瑰花的结花率明显优于常规脱E法。Hank s液的pH在7.0~7.5之间结花率为最佳。淋巴细胞和绵羊红细胞的最适比例为1∶20。离心速度以800 r/min为宜。染色后4℃放置,16~20 h内观察为结果的最佳观察时间。豚鼠胸腺与家兔红细胞以及小牛胸腺与绵羊红细胞均具有相关性形成E玫瑰花。结果证明,优化试验条件有利于提高制品生物学活性的准确率。     

胸腺肽溶液不同生产方法的比较

目的比较从小牛胸腺中提取活性胸腺肽溶液的不同方法。方法将小牛胸腺匀浆液分别经冻融、酸化和酶解3种方法提取胸腺肽溶液。结果3种方法制备的胸腺肽溶液均符合国家药品标准,但收率和活性不同。结论3种方法对胸腺肽溶液的收率和质量有较大的影响,B法适合于胸腺肽溶液的大规模生产。     

肺癌特异性转移因子口服液的研制

目的制备羊脾特异性转移因子口服液,并检测其免疫活性。方法采用肺癌患者术后肿瘤组织加佐剂免疫羊,取其脾用透析法制备肺肿瘤特异性转移因子。检测其理化性质,并通过E玫瑰花环试验、白细胞粘附抑制法(LAI)和迟发型皮肤超敏反应实验(DTH)检测特异免疫活性。结果制品的各项理化指标均达到了国家药品标准(WS1-XG-037-2000),E-玫瑰花法结花率为20.5%,多肽含量为1.38 mg/mL,核糖含量为83.5μg/mL。该制品能明显抑制小白鼠白细胞黏附,并能诱导小鼠皮肤迟发型超敏反应,表明该口服液对T淋巴细胞的增殖和玫瑰花结的形成均有促进作用。结论本法制备的羊脾特异性转移因子口服液,为抗肿瘤制剂的研究奠定理论基础。