抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用

用提纯的猪流行性腹泻病毒抗原免疫BALB/c小鼠,脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法筛选,以有限稀释法克隆化,阳性率达100％,建立了1D_8、5D_7、4B_1、2B_8、1A_4五株杂交瘤细胞系。用ELISA检测培养上清及诱生的腹水的效价。培养上清效价为1D_8 1∶1280~×、5D_7 1∶640~×、4B_1 1∶320~×、2B_8 1∶320~×、1A_4 1∶640~×,腹水效价为1D_8 10~(-7)、5D_7 10~(-7)、4B_110~(-7)、2B_8 10~(-5)、1A_4 10~(-4)。用免疫双扩散试验结果,五株单抗中有一株属IgG类,四株属IgG类。将单抗提纯后用ELISA夹心间接法及间接免疫荧光试验(IFA)对6种冠状病毒进行了特异性鉴定,除猪流行腹泻病毒外,不与其它冠状病毒发生交叉反应。取效价高而稳定的1D_8、5D_7、4B_1细胞系单克隆抗体做IFA及直接ELISA试验初步证明该McAb具有敏感性高,特异性强的优点,可作为猪流行性腹泻病毒检测的一种新试剂。     

吉林省珲春地区蜱中伯氏疏螺旋体与斑点热群立克次体复合感染研究

目的了解吉林省珲春地区伯氏疏螺旋体与斑点热群立克次体的复合感染情况.方法运用PCR方法对吉林省珲春地区采集的蜱标本,进行伯氏疏螺旋体5S～23S rRNA间隔区基因与斑点热群立克次体外膜蛋白A（ompA）基因的检测.测序并用PHYLIP软件进行序列分析.结果全沟硬蜱中伯氏疏螺旋体感染率为36.0%,在全沟硬蜱中检测到了斑点热群立克次体的感染,其感染率为2 0%.二者的复合感染率为2.0%;森林革蜱中伯氏疏螺旋体感染率30.9%,斑点热群立克次体感染率29.1%,二者的复合感染率16.8%.伯氏疏螺旋体的序列分析显示吉林地区的伯氏疏螺旋体都属于B.garinii基因型,同源性较高.对斑点热阳性片段序列分析表明新测序列与斯洛伐克新发现的IRS3株和IRS4株核苷酸序列同源性为97%.结论吉林省珲春地区全沟硬蜱及森林革蜱中检测到伯氏疏螺旋体与斑点热群立克次体的感染,并检测到2种病原体的复合感染情况.     

部分省区啮齿动物中斑点热群立克次体的检测

目的了解我国部分省区啮齿动物中斑点热群立克次体的自然感染情况，比较南北地区不同鼠种带菌率的差异。方法在黑龙江、内蒙古、新疆、浙江和贵州5省（自治区）共捕获鼠473只，用聚合酶链反应检测鼠脾脏中的斑点热群立克次体DNA序列片段。结果共检测鼠473只，69只阳性，阳性率为14．6％；在黑龙江、内蒙古、新疆、浙江和贵州省（自治区）都检测出阳性标本，阳性率分别为3．1％、21．6％、30．0％、10．8％和21．4％。结论我国黑龙江、内蒙古、新疆、浙江和贵州省（自治区）的鼠中都存在斑点热群立克次体的感染，南北地区鼠的带菌率差异无统计学意义（P〉0．05）。     

猪内源性反转录病毒在中国实验小型猪中的存在与表达

目的对中国实验小型猪中内源性反转录病毒的存在与mRNA的表达进行检测,摸清中国实验小型猪中内源性反转录病毒的携带情况.方法根据已发表的PERV的序列设计并合成了三对引物,分别用于检测PERV核心蛋白基因(gag)、多聚酶基因(pol)及囊膜基因(env)的存在与表达;同时,根据目前通用的env基因分型方法合成了三对用于分型检测的引物env-A、env-B、env-C.应用PCR、RT-PCR扩增的方法,对来自于中国实验小型猪外周血淋巴细胞的DNA和RNA样品进行了检测.结果在6个被检DNA样品中均检出了PERV特异性DNA的存在;同样,在被检RNA样品中均有PERV特异性RNA的表达,且所表达的PERV均为A型和B型,在所有样品中均未检出C型PERV的表达.结论初步表明中国实验小型猪中存在内源性反转录病毒序列,且能以mRNA的形式表达,这一结果为我国特有小型猪的开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础.     

宠物鸟·疫病·公共卫生

宠物鸟种类多,来源地广,检验检疫预防措施缺乏,致使宠物鸟疫病不断传播,并造成人类的感染,已经威胁到公共卫生.宠物鸟疫病中以新城疫、禽流感、鹦鹉热最为常见,而且与人类关系密切,具有重要的公共卫生学意义.本文从宠物鸟在疫病流行传播中的意义、疫病的宿主感染谱、疫病的流行特征以及疫病的公共卫生学意义对新城疫、禽流感、鹦鹉热三种疫病进行了综述.表明宠物鸟疫病的感染率比较高,且严重危害人类健康.加强对宠物鸟疫病的检验检疫及预防,很好的防控宠物鸟类疫病具有非常重要的意义.     

抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体细胞系的建立及初步应用

用提纯的猪流行性腹泻病毒抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS—1骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附试验间接法筛选出阳性孔经3～4次克隆化,阳性率达100％后扩大培养,液氮及超低温冰箱保存。建立了1D_8、5D_7、4B_1、2B_8、1A_4五株抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞系。接种BALB/c小鼠,10天左右收取腹水,用ELISA检测培养上清液     

抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用

用提此的猪流行性腹泻病毒抗原免疫BALB／c小鼠，脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合，用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法筛选，以有限稀释法克隆化，阳性率选100％，建立了1D8，5D7，4B1，2B3，1A4五株杂交瘸细胞系。用ELISA检测培养上清及诱生的腹水的效价。培养上清效价为1D8 1：1280^x，5D7 1：640^x，4B1 1：320^x 2B8 1：320^x，1A4 1：640^x，腹水效价寿1D8 10^-7，5D7 10^-7、4B1 10^-7，2B8 10^-5，1A4 10^-4。用免疫双扩散试验结果，五株单抗中有一株属IgG类。四株属IgG类。将单抗提此后用ELISA央心间接法及间接免疫荧光试验(IFA)对6神冠状病毒进行了特异性鉴定，除猪流行腹泻病毒外，不与其它冠状病毒发生交叉反应。取效价高而稳定的1D8，5D7，4B1细胞系单克隆抗体做IFA及直接EISA试验初步证明该McAb具有敏感性高，特异性强的优点，可作为猪流行性腹泻病毒检测的一种新试剂。     

吉林省林区家畜中斑点热群立克次体与莱姆病螺旋体复合感染的血清学调查

目的了解吉林珲春地区家畜中斑点热、莱姆病及其复合感染的情况。方法应用间接免疫荧光法检测家畜血清中斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体的IgG抗体。结果牛血清中斑点热感染率为18.0%,莱姆病感染率为27.5%,复合感染率为9.5%;羊血清中斑点热感染率为19.2%,莱姆病感染率为31.5%,复合感染率为12.8%。结论吉林珲春地区家畜中广泛存在斑点热和莱姆病的复合感染。     

吉林林区动物莱姆病螺旋体感染的调查研究

目的了解吉林珲春林区的蜱、野鼠及牛、绵羊感染莱姆病的情况。方法对蜱和野鼠进行莱姆病螺旋体的PCR扩增,阳性标本RFLP分型,应用间接免疫荧光法检测家畜血清中的IgG抗体。结果PCR检测全沟硬蜱和森林革蜱的带菌率为36.0%和30.9%;在五种鼠中检测到莱姆病螺旋体的特异性片段,带菌率分别为14.0%、8.3%、13.0%、25.0%和33.3%。阳性标本RFLP分型结果属于B.garinii和B.afzelii型;牛、羊血清学检测阳性率为27.5%和31.5%。结论野鼠、蜱和牛羊中都检测到伯氏疏螺旋体的感染,证实吉林珲春林区存在莱姆病的自然疫源地。