北京市南部郊区女性压力性尿失禁发病率及就诊率调查

目的 了解北京市南部郊区成年女性压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的发病率、就诊率及未就诊原因.方法 采用问卷形式对北京南部郊区20周岁以上的正常女性人群进行有关压力性尿失禁的调查,抽样调查1083人,其中城镇居民630人,农村居民431人,流动人口21人.结果 北京市南部郊区成年女性压力性尿失禁的发病率22.16％(240/1 083),就诊率为3.33％ (8/240),未就诊原因是认识不足的比例为92.7％(215/232).结论 北京市南部郊区成年女性压力性尿失禁的发病率比较高,而就诊率低,患者对该疾病认识不足,应加大宣传力度.     

人类β3-糖基转移酶β3GnT8/β3GalT7在恶性血液系统肿瘤细胞中的表达差异及其原核表达和鉴定

目的研究一种新的人类β3-糖基转移酶β3GnT8/β3GalT7在恶性血液系统肿瘤细胞中mRNA水平的表达情况,并在原核体系中克隆和表达。方法运用半定量RT-PCR方法研究人β3GnT8/β3GalT7在13种恶性血液系统肿瘤细胞中的表达谱,以其中表达该基因最高的THP-1细胞的cDNA为模板,克隆目的基因,构建重组表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达。经超声裂菌,尿素溶解包涵体,过Ni-NTA琼脂糖层析柱纯化,透析复性浓缩后进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western blot验证。结果 K562、U937、THP-1和NB4细胞株均较高效表达β3GnT8/β3GalT7,其中THP-1细胞株表达最高;并成功构建原核表达载体pQE30-β3GnT8/β3GalT7,表达出相应的重组蛋白。结论人β3GnT8/β3GalT7在13株细胞中表达有显著差异,并获得大量较纯的目的蛋白,其分子量与预测相符,为单克隆抗体制备及进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。     

pp-GalNAc-T4表达载体的构建

目的构建pp-GalNAc-T4的正义表达载体。方法采用质粒转染法构建真核表达载体。结果构建了pp-GalNAc-T4的正义表达载体,并得到了鉴定。结论构建了pp-GalNAc-T4的正义表达载体,研究发现了在pp-GalNAc-T4c DNA转染NB4细胞株后,在mRNA水平及蛋白水平能稳定上调pp-GalNAc-T4的表达,可以用于以后的研究。     

细胞表面α2,3唾液酸结构与胃癌细胞AGS增殖、迁移的关系及相关基因表达的初步研究

目的 检测6个α2,3唾液酸转移酶基因在胃癌细胞AGS的表达,以及AGS细胞表面的α2,3唾液酸结构对增殖、迁移能力的影响.方法 通过RT-PCR分别检测6个基因在胃癌细胞AGS mRNA水平的表达情况.以不同活性浓度的α2,3唾液酸酶处理AGS细胞,通过MTT法检测其生长曲线的改变,通过划痕试验检测其迁移能力的改变.结果 在胃癌细胞AGS中,α2,3唾液酸转移酶家族的6个成员有两个在mRNA水平表达.分别是ST3Gall和ST3Ga14;α2,3唾液酸酶处理后,AGS生长周期缩短,迁移能力显著增强.结论 AGS细胞表面的α2,3唾液酸结构可能通过影响细胞之间的识别、改变信号通路,延长AGS细胞的生长周期,抑制其迁移能力.     

Smad3基因小干扰RNA的序列设计及其表达载体的构建

目的构建大鼠Smad3基因小干扰RNA的表达质粒,为肝纤维化RNAi介导的基因治疗打下基础。方法利用互联网资源针对Smad3基因设计并合成三条可能的小干扰RNA,脂质体瞬时转染大鼠肝星状细胞,RT-PCR检测Smad3基因的表达情况。然后将这三条小干扰RNA插入到RNA干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,构建成三条干扰载体并测序。结果 RT-PCR和测序结果表明,成功构建了Smad3基因的RNA干扰真核表达载体。结论重组质粒pRNAT-SiSmad3的成功构建,为后续的Smad3基因下调实验提供了可能。     

高分级的前列腺上皮内瘤(PIN)重复穿刺方案

在前列腺穿刺标本中未发现前列腺癌但存在高分级上皮内瘤(ＰＩＮ)时则要进行重复穿刺,因为有同时合并前列腺癌的危险。如何合理地进行重复穿刺尚无明确方案。为此,作者对诊断为高分级ＰＩＮ患者拟定了合理的序贯穿刺方案以检测是否合并前列腺癌。作者对63例在初次前列腺穿刺活检时存在孤立的高分级ＰＩＮ男性患者中的45例于一年内进行重复穿刺活检,其中8例单纯行肿物部位穿刺,12例行6针穿刺,13例行6针穿刺加双侧移行带穿刺,另12例行11针多部位穿刺(常规的6针穿刺 双侧移行带 双侧外周带前角 外周带中线)。对患者初次穿刺中的高分级病变部位…     

小鼠多肽：N一乙酰氨基半乳糖转移酶家族分子进化的初步研穷

目的探讨小鼠多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族成员间的同源性，揭示其进化规律。为多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族各成员间结构相似但功能不同的特征提供一定的依据。方法采用生物信息学软件和网上数据库对核酸、蛋白质序列进行同源比较，结构域分析和进化树绘制。结果小鼠多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族一级结构、二级结构均有较高的同源性，系统进化树显示各成员来源于同一祖先并在不同时期分野。结论各成员来自于同一祖先的同一家族，结构相似，但其进化方式属于趋异性进化。     

子宫内膜异位症腹腔液中转化生长因子的测定及其意义

目的：测定转化生长因子β1（TGF－β1）在子宫内膜异位症患者腹腔液中的浓度，探讨其与异位子宫内膜的种植，盆腔粘连的关系。方法：采用双抗体夹心ELISA法测定正常盆腔（15例），盆腔粘连（10例），内膜异位症（30例）腹腔液中TGF－β1的含量。结果：子宫内膜异位症患者腹腔液中TGF－β1的含量明显高于正常盆腔组和盆腔粘连组（P＜0．01），盆腔粘连组高于正常盆腔组（P＜0．01），结论：子宫内膜异位症患者腹腔液中TGF－β1的升高与异位子宫内膜的种植及盆腔粘连有关。     

曲司氯铵治疗膀胱过度活动症的多中心临床研究

目的：评价曲司氯铵治疗膀胱过度活动症的有效性和安全性。方法：以盐酸奥昔布宁为对照，采用随机双盲双模拟多中心临床试验设计，144例膀胱过度活动症患者随机均分为试验组和对照组，分别服用曲司氨铵20mg或奥昔布宁5mg,bid。结果：治疗6周后，试验组（n=69）和对照组（n=64)24h平均排尿次数头值，尿失禁患者的平均尿失禁次数减少值以及平均每次尿量增加值比较无统计学差异（P＞0．05）。试验组患者不良事件的总发生率为47．2％，其中主要不良事件口干发生率为23．6％，而奥昔布宁组不良事件总发生率为76．4％，口干发生率为68．1％，不良事件总发生率及口干发生率在两组间均有明显统计学差异（P＜0．001）。结论：曲司氨铵治疗膀胱过度活动症与奥昔布宁等效，但不良反应明显低于奥昔布宁。     

人类β3GnT8/β3GalT7对人4IgB7-H3蛋白的翻译后糖基化修饰作用

目的探讨人类β1,3N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶8/β3半乳糖基转移酶7（β3GnT8/β3GalT7）与人4IgB7-H3蛋白的相互作用,以期阐明该糖基转移酶对人4IgB7-H3蛋白的翻译后糖基化修饰作用。方法在线预测软件预测人4IgB7-H3蛋白氨基酸序列上潜在的糖基转移酶作用位点;免疫共沉淀探讨β3GnT8/β3GalT7与人4IgB7-H3蛋白的相互结合作用;细胞免疫荧光化学技术研究两种蛋白质在细胞内的空间定位。结果人4IgB7-H3蛋白氨基酸序列上潜在的N-糖基化位点共有8个,O-β-GlcNAc的附着位置共有18个;β3GnT8/β3GalT7与人4IgB7-H3蛋白能相互结合而被共沉淀;两种蛋白质能在人肺癌A549细胞中共定位。结论人类β3GnT8/β3GalT7可能对人4IgB7-H3蛋白有糖基化修饰作用。