缺血/再灌损伤对大鼠视网膜一氧化氮合酶活性的影响

组织短时急性缺血、缺氧性损伤不仅发生于缺血的当时,而且主要发生在血流再灌期。近年来研究证实氧自由基（Ｏｘｙｇｅｎｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌ;ＯＦＲ）、一氧化氮（Ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ;ＮＯ）等参与心肌缺血／再灌流损伤的病理过程。一氧化氮合酶（Ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ;ＮＯＳ）是ＮＯ合成的唯一限速因素,能把精氨酸转化为ＮＯ和胍氨酸;急性人工高眼压后再灌流对ＮＯＳ活性是否有影响,国内外报道较少。本文采用依赖还原性辅酶Ⅱ硫辛酰胺脱氢酶（ＮＡＤＰＨｄｉａｐｈｏｒａｓｅ;ＮＡＤＰＨｄ）组织化…     

静压力对人眼筛板细胞Ⅲ型胶原mRNA表达水平的研究

目的观察压力对人眼筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达水平的影响，探讨筛板细胞外间质的变化在青光眼视神经损害中的作用。方法对筛板细胞进行体外培养并施予一定的静压力，采用ｄｏｔｂｌｏｔ杂交方法和计算机图像分析法测定受压后的筛板细胞在不同时期合成Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达水平。结果静压力４６７～５３３ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）下，加压３天的筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达量吸光度（Ａ）值０５８２８±００５１７，与同期对照组Ａ值０２８３２±００６１３比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；加压６天的筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达水平Ａ值０４１６２±００５１２，与同期对照组Ａ值０３３６７±００５８９比较，仍有不同程度增高，但差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；加压９及１２天的筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达量分别为Ａ值０３２４６±００９５７及０２１６４±００１７１，均低于同时期对照组Ａ值０４０２９±００３２６、０２６０１±００１３４，差异无显著性（Ｐ＜０．０５）。结论在一定时程的压力下，筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ的表达有增强作用。     

缺氧,低营养对人眼筛板细胞纤维连接蛋白合成的影响

目的研究筛板间质纤维连接蛋白（ＦＮ）合成与血供的关系。方法在缺氧、低营养条件下对筛板细胞进行体外培养，光镜及电镜下观察其形态变化，采用免疫细胞化学和计算机图像分析对筛板细胞ＦＮ合成行定量分析。结果筛板细胞在缺氧、低营养条件下可发生胞浆内空泡、线粒体异形化、环形样小体等变性改变。缺氧２４ｈ及５％胎牛血清（ＦＣＳ）培养液中，筛板细胞ＦＮ合成量分别为１１．８８２０±３．５６５７、１５．１０２０±２．８９６９ＯＤ，与对照组比较，Ｐ＜０．０５；缺氧４８ｈ及１％ＦＣＳ培养液中，筛板细胞合成ＦＮ量开始减少，与对照组比较仍有不同程度增高。结论缺血可致筛板细胞结构变化和对ＦＮ合成有刺激作用。     

人眼筛板细胞体外培养的研究

目的研究筛板细胞合成细胞外基质的生理与病理，建立筛板细胞培养模型。方法采用酶消化法对１０只人胚眼筛板组织进行体外培养，并利用电镜和免疫组化技术鉴定。结果所培养的细胞呈多角扁平状，核周胞浆内富含颗粒，核相对透明，核仁清楚；细胞表面有微绒毛，核膜周围有异染色质，胞膜附有基底膜及细胞外基质；免疫荧光染色对Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白，层粘连蛋白呈阳性；对神经胶质纤维酸性蛋白，Ⅷ因子相关抗原呈阴性。以上均符合筛板细胞的特点，此细胞株现已传代至第４代。结论成功地建立筛板细胞体外培养模型，可用于青光眼发病机制的研究。     

视网膜下液体对人视网膜神经胶质细胞生长的刺激作用与PVR关系

研究了２８例孔源性视网膜脱离患者视网膜下液（ＳｕｂｒｅｔｉｎａｌＦｌｕｉｄＳＲＦ）对人视网膜神经胶质细胞（ＲｅｔｉｎａｌＧｌｉａｌＲＧ）生长的刺激作用。结果表明：所有标本通常具有刺激ＲＧ细胞增殖能力，但存在较大范围的活动性，增殖率范围在基线上３６．４～１８１．８％，ＳＲＦ促ＲＧ细胞增殖能力与ＰＶＲ程度呈平行关系，ＰＶＲ在Ｃ级以上，促ＲＧ细胞增殖活力显著性加强（Ｐ＜０．０１）。     

人眼筛板细胞体培养的研究

研究筛板细胞合成细胞外基质的生理与病理，建立筛板细胞培养模型，方法采用酶消化法对１０只人胚眼筛板组织本外培养，并利用电镜和免疫组织化技术鉴定。结论，成功地建立了筛板细胞外培养模型，可用于青光眼发病机制的研究 。     

压力对体外培养的筛板细胞及糖蛋白合成影响

为研究压力对筛板细胞形态和糖蛋白合成的影响，对筛板细胞进行体外培养并施与一定压力，相差显微镜下观察筛板细胞形态学改变，并采用显微荧光光度计对筛板细胞合成层粘蛋白（ＬａｍｉｎａＬＮ）及纤维连接蛋白（ｆｉｂｒｉｎｅｃｔｉｏｎＦＮ）进行定量测定。结果在静压力（５０ｍｍＨｇ）下，筛板细胞形态变扁，随加压时间延长，胞浆内空泡增多，线粒体肿胀、部分空泡化；胞浆内可见髓鞘样结构；加压３天的筛板细胞合成ＬＮ及ＦＮ分别为４２．２±４．６７、６３．６５±１１．２０荧光强度（ＡＵ），与对照组比较，差异呈显著性（Ｐ＜０．０５），加压５天的筛板细胞合成ＬＮ及ＦＮ分别为３６．６５±８．４５、６０．９０±１１．９１ＡＵ，与对照组比较仍有不同程度增高。显示压力能促使筛板细胞形态异常和糖蛋白合成增加。     

视网膜下液体对人视网膜色素上皮细胞生长的刺激作用及其临床特征

研究了28例孔源性视网膜脱离患者视网膜下液对人眼视网膜色素上皮细胞生长的作用。所有标本均可刺激视网膜色素上皮细胞增殖，但存在较大范围的活动性，发现增殖刺激活力与视网膜脱离的增殖性玻璃体视网膜病变程度、视网膜脱离范围和脱离持续时间呈正相关，且与视网膜脱离增殖性玻璃体视网膜病变程度及脱离范围相关性最大（P＜0．01）。结果表明：增殖性玻璃体视网膜病变在C级以上，脱离范围超过2个象限、脱离时间超过4周者，视网膜下液促增殖活力显著增强。     

视网膜下液体对人成纤维细胞的刺激作用

观察２３例孔源性视网膜脱离患者视网膜下液体（ＳＲＦ）对培养的人成纤维细胞生长的刺激作用，同时采用￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定了ＳＲＦ对成纤维细胞ＤＮＡ的合成作用。结果表明，所有ＳＲＦ均有刺激成纤维细胞增殖的能力，增殖率为５５．４％～２７７．８％，ＳＲＦ能促进成纤维细胞的ＤＮＡ合成（Ｐ＜０．０５）。ＳＲＦ与视网膜脱离的增殖性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）程度、脱离范围和脱离持续时间呈正相关。