花生四氢酸氨基乙醇对体外培养的牛眼小梁网细胞基质金属蛋白酶-3和基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响

目的观察花生四氢酸氨基乙醇(AEA)对体外培养的牛眼小梁网细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法对牛眼小梁网细胞进行原代及传代培养,并进行鉴定。对传3代的牛眼小梁网细胞分别施加AEA浓度为0.0、0.1、1.0、10.0μmol·L-1的无血清培养液,作用24 h后提取细胞上清液,并制备10.0μmol·L-1作用6、12、18、24 h的细胞上清液,用酶联免疫吸附测定法检测AEA作用后细胞上清液中MMP-3及TIMP-1水平的变化。结果随着AEA浓度的增加,MMP-3及TIMP-1水平均逐渐增加,并呈剂量依赖性(P<0.05)。10.0μmol·L-1AEA作用6、12、18、24 h后的MMP-3、TIMP-1水平均高于0.0μmol·L-1组(P<0.05),且MMP-3、TIMP-1水平随着作用时间的延长逐渐增加,各时间点之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论AEA可以促进MMP-3的分泌,早期AEA可以抑制TIMP-1的分泌,进一步打破MMP-3及TIMP-1的平衡,影响细胞外基质的降解,从而起到降低眼压的作用。     

大麻素对牛眼小梁细胞增殖、粘附和迁移的影响

目的:通过研究内源性大麻素物质(anandamine,AEA),对体外培养的牛眼小梁细胞的增殖、黏附以及迁移功能的影响,探讨AEA降低眼压的机制。方法:对牛眼小梁细胞进行体外原代培养及传代培养,应用免疫组化的方法(NES,Ⅷ因子相关抗原染色)鉴定细胞,化学及透射电镜观察。对3代牛眼小梁细胞分别以含AEA10,1,0.1,0μmol/L DMEM(含100ml/L小牛血清)培养液进行干预,分别于24,2h,2h后用MTT法计数细胞,再利用计算机统计软件进行数据分析,观察其对牛眼小梁细胞的增殖、粘附及迁移功能的影响。结果:内源性大麻素,在一定浓度范围内,对体外培养的牛眼小梁细胞的增殖、粘附及迁移功能均有较为明显的抑制作用(P<0.05)。结论:由此,可以了解到AEA可能是通过影响小梁细胞的增殖、粘附及迁移功能来改变房水流出途径的阻力,而降低眼内压。     

H2O2对体外培养视网膜色素上皮细胞中BMP-6及其相关受体的影响

目的　观察氧化应激对视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium，RPE）细胞的损伤作用以及对骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）-6及其相关受体的影响。方法　RPE细胞随机分为对照组:正常培养的RPE细胞；H₂O₂组:加入200 μmol·L^-1 H₂O₂处理的RPE细胞；实验组:加入200 μmol·L^-1 H₂O₂和0.1 ng·L^-1 BMP-6的RPE细胞。采用活性氧（reactive oxygen species,ROS）检测试剂盒运用流式细胞仪检测对照组与H₂O₂组RPE细胞内ROS的变化，运用PCR及Western blot法检查对照组与H₂O₂组BMP-6基因及蛋白水平的变化；TUNEL染色法观察三组细胞凋亡的变化，并运用PCR及Western blot法观察三组BMP受体及其共受体尤文素(Hemojuvelin，HJV）的变化。结果　H₂O₂组ROS水平（99.25±0.28）%较对照组（70.55±7.71）%明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）；H₂O₂组相对于对照组BMP-6 mRNA水平及BMP-6蛋白水平均降低，差异均有统计学意义（均为P<0.05）；H₂O₂组的TUNEL染色阳性细胞数显著高于对照组（P<0.05），而实验组TUNEL染色阳性细胞数明显减少，与H₂O₂组相比，差异有统计学意义（P<0.05）；与对照组相比，H₂O₂组BMP三种相关受体的BMPR1A、BMPR1B及HJV的表达水平显著降低，而实验组三种受体表达水平较H₂O₂组显著升高，差异均有统计学意义（均为P<0.05)。结论　H₂O₂导致RPE细胞ROS增加，氧化应激可在基因及蛋白水平抑制BMP-6的表达；BMP-6可减轻氧化应激引起的细胞凋亡，且可能是通过激活其相关受体起作用的，这为探索年龄相关性黄斑变性的发病机制提供了一定的理论基础。     

内源性大麻素对体外培养的牛眼小梁细胞PGE2表达及细胞骨架的影响

目的:研究内源性大麻素N-花生四氢酸氨基乙醇(anan-damide,AEA)对体外培养的牛眼小梁细胞细胞骨架及PGE2表达的影响。方法:对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,并行鉴定。对传3代的牛眼小梁细胞分别施加AEA浓度分别为0,0.1,1.0,10μmol/L的无血清培养液,作用24h后提取细胞上清液,并将细胞置于倒置显微镜下摄像,计算机图像分析系统计算细胞面积。用ELISA法检测PGE2浓度的变化。结果:AEA可以产生明显的细胞舒张效应,呈浓度依赖性。而且在一定范围内可以成剂量依赖性的促进PGE2的表达。与对照组均有显著性差异(P<0.05)。结论:AEA可引起小梁细胞的舒张和促进PGE2的释放。     

大学英语教学中词缀教学的深入--词根教学

词缀教学作为大学英语构词法的一个组成部分已贯穿在整个大学英语教材中,其目的是通过对词缀的认识,使学生能掌握更多的英语词汇。这种行为我们不妨认为就是一种英语词汇的派生行为,即象数学中的“1 1=2”这样一种行为概念。比如:ｉｌ(不) ｌｏｇｉｃａｌ(逻辑的)→ｉｌｌｏｇｉｃａｌ(非逻辑的)。对于这样的构词结构,稍有进取思维的学生便会问:ｉｌ-(不)是前缀,-ｃａｌ是见过的后缀,意为“……的”,那么,其中ｌｏｇ部分又应该是什么呢?它就没有什么含义?对于类似更多这样的结构,这些学生有朦胧认识,但弄不清楚究竟。那么ｌｏｇ到底是什么东…     

超声多普勒效应的演示和实验

一、原理和仪器结构当超声被运动介质反射(或散射)时,反射的超声与入射的超声有不同的频率,这个差别称之为多普勒频移,可由下式给出 f_D=2(f_T ν/C)cosθ~(1) (1)这里f_T是发射的超声频率,ν是介面运动的速度,C是介质中的声速,θ是介面运动方向与声传播方向之间的夹角。可见超声多普勒频移f_D随f_T、ν和θ面改变,出(1)式可导出     

氧浓度可控制小鼠饲养箱的研制

目的：探索制作可以自动控制氧浓度的小鼠饲养箱的可行性,为制作早产儿视网膜病变模型提供帮助。

方法：用粘合剂将有机玻璃粘合成透明密闭玻璃箱,前面设置开口便于放入和取出饲养小鼠的笼子,侧面设通风口,KY-2F型数字显示控氧仪置于玻璃箱顶部,其氧气探头和通过电磁阀的送气管从玻璃箱顶部接入箱内,连接控氧仪和电磁阀,用视网膜铺片和HE染色两种方法验证造模效果。

结果：氧箱饲养的C57BL/6J新生小鼠第17d视网膜形成无灌注区并有新生血管生成,HE染色示视网膜新生血管突破内界膜。

结论：本方法制作的可控制氧浓度的小鼠饲养箱简单易做、效果可靠。