Foxp1在两种模型小鼠脑内反应性星形胶质细胞中的表达差异

目的 观察Foxp1在两种模型小鼠脑内反应性星形胶质细胞中的表达差异。方法 利用脂多糖（LPS）、大脑中动脉栓塞（MCAO）构建LPS模型和MCAO模型小鼠,诱导两种模型小鼠脑内产生反应性星形胶质细胞;通过免疫荧光染色方法,使用胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、离子钙结合适配器分子1(Iba1)、神经元特异性核蛋白（NeuN）分别标记模型小鼠脑内阳性的星形胶质细胞、小胶质细胞及神经元,并结合苏木精-伊红染色观察细胞形态,鉴定模型是否构建成功;采用免疫荧光双标方法检测Foxp1与GFAP或Iba1在两种模型小鼠大脑皮层（CTX）、纹状体（STR）、海马（HIP）3个脑区中的共标情况。结果 两种模型小鼠构建成功,并且成功诱导小鼠脑内产生反应性星形胶质细胞;Foxp1和GFAP双阳性细胞数在LPS模型小鼠的CTX、STR、HIP3个脑区均明显增加（P<0.05）,而在MCAO模型小鼠的CTX和STR区域中均明显减少（P<0.05）,在HIP区域中无明显变化;在LPS模型及MCAO模型小鼠的STR区域中均未检测到Foxp1和Iba1双阳性细胞。结论 Foxp1在LPS模型小鼠脑内的反应...     

缺氧对巩膜成纤维细胞内质网应激反应的激活作用及其对巩膜重塑的影响

目的　探讨缺氧对巩膜成纤维细胞（HFSF）内质网应激反应的激活作用及其对巩膜重塑的影响。方法　取HFSF随机分为缺氧0 h组、缺氧12 h组、缺氧48 h组。缺氧0 h组细胞正常培养,缺氧12 h组及48 h组细胞分别在含氧体积分数2%的三气培养箱中缺氧处理12 h及48 h。采用Western blot 检测肌醇需求酶l (IRE1α)、P-IRE1α、COL1A1、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、BAX及BCL-2蛋白表达情况,免疫荧光染色检测HFSF中α-SMA蛋白含量,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,CCK-8检测细胞增殖情况。结果　Western blot检测结果显示:与缺氧0 h组相比,缺氧12 h组IRE1α、α-SMA蛋白表达均升高,COL1A1蛋白表达降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,其余蛋白表达变化不明显,差异均无统计学意义（均为P>0.05）;与缺氧0 h组相比,缺氧48 h组IRE1α、P-IRE1α、MMP-2、α-SMA、BAX蛋白表达均升高,COL1A1、BCL-2蛋白表达均降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;与缺氧12 h组相比,缺氧48 h组COL1A1、BCL-2蛋白表达降低,BAX蛋白表达升高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,其余蛋白表达变化不明显,差异均无统计学意义（均为P>0.05）。免疫荧光染色结果显示:缺氧12 h组及缺氧48 h组α-SMA蛋白荧光强度均较缺氧0 h组增高,且缺氧48 h组较缺氧12 h组α-SMA蛋白荧光强度升高更明显。流式细胞仪检测结果显示:缺氧0 h组、缺氧12 h组、缺氧48 h组细胞凋亡率分别为（0.617±0.032）%、（2.187±0.212）%、（4.130±0.395）%;缺氧12 h组及缺氧48 h组细胞凋亡率均高于缺氧0 h组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,且缺氧48 h组细胞凋亡率高于缺氧12 h组,差异有统计学意义（P<0.05）。CCK-8检测结果显示:缺氧12 h组及缺氧48 h组D₄₅₀均低于缺氧0 h组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;缺氧48 h组与缺氧12 h组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。结论　缺氧激活HFSF内质网应激反应,并且可能通过调节胶原代谢、促进细胞转分化及凋亡来参与巩膜重塑。     

大黄素对糖尿病大鼠肠平滑肌内质网应激及调控机制的研究

目的 探讨大黄素对糖尿病大鼠肠平滑肌细胞凋亡机制及调控机制.方法 SD大鼠分为对照组、糖尿病组与大黄素组,成模10周时,检测小肠推进率;TUNEL法测肠平滑肌细胞凋亡;免疫组织化学测细胞葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)及Caspase-12蛋白表达.结果 糖尿病组与大黄素组大鼠于成模后出现多尿、多饮、多食、体质量减轻症状;血糖水平显著增高(P＜0.05).成模10周时,与对照组比较,糖尿病组大鼠小肠推进率显著下降(P＜0.05),肠平滑肌细胞凋亡率、GRP78、Caspase-12蛋白表达显著增加(P＜0.05).与糖尿病组比较,大黄素组小肠推进率显著增高(P＜0.05),肠平滑肌细胞凋亡率、GRP78、Caspase-12蛋白表达显著降低(P＜0.05).结论 内质网应激途径介导了糖尿病大鼠肠平滑肌细胞凋亡;大黄素可能降低糖尿病大鼠肠平滑肌内质网应激介导的细胞凋亡,从而改善肠动力.     

成都市某医院医务工作者对器官移植与捐献的意愿调查

目的了解医务工作者对器官移植与捐献的意愿和认知情况。方法通过自编调查问卷,以医务工作者为调查对象的问卷调查形式。问卷内容包含医务工作者的一般信息,器官移植与捐献的认知情况,器官移植与捐献的意愿,器官移植与捐献关注的问题及影响捐献的相关因素,捐献移植方式的选择等。问卷数据由SPSS 17.0分析描述和统计。结果发放问卷200份,回收200份,回收率100%,有效率100%。139例愿意在离世后进行遗体器官捐献,61例不愿意;但绝大多数医务人员没有进行器官捐献意愿登记;175例没有移植亲属;108例支持家人进行遗体器官捐献;我国当前尚处于捐献体系的初步建立中,应扩充器官捐献协调员队伍、建立健全器官捐献分配体系、加大器官移植与捐献知识的宣教力度、完善法律法规,从而推动器官移植事业的发展。结论作为医务工作者,应在器官移植与捐献上做出榜样,丰富自身的器官移植与捐献的知识,为器官移植与捐献的宣传做出贡献,促进器官移植与捐献事业的发展。     

脑立体定位斜插法在小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶浦肯野细胞纤维投射研究中的应用

目的 探讨脑立体定位斜插法靶向注射小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶的可行性,并观察该方法对小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶浦肯野细胞纤维的神经投射。方法 利用脑立体定位直插法(进针方向与水平方向垂直)或斜插法(进针方向与水平方向的垂直线呈30°夹角)标记Pcp2-Cre小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶,对比两种手术方式对小鼠颈部上方肌肉组织的影响;选择梯度剂量(500、300、150 nL)的顺行示踪病毒,探索适宜的病毒注射剂量;通过斜插法在小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶注射重组酶依赖性顺行示踪病毒,观察该小叶浦肯野细胞的传出神经投射。结果 相较于脑立体定位直插法,斜插法中小鼠头部皮肤切口更小,且不易破坏小鼠颈部上方肌肉;在前囟后6.00 mm、中线旁开0.00 mm、深4.08 mm坐标处,采用斜插法能靶向定位到小脑蚓部第Ⅸ小叶;同时,150 nL低剂量的病毒可较好的标记小脑蚓部第Ⅸ小叶浦肯野细胞,且不发生泄漏;通过病毒顺行示踪,在小鼠小脑顶核中间部、前庭小脑核、前庭内侧核巨细胞部以及前庭下核均检测到来自第Ⅸ小叶浦肯野细胞的神经投射纤维。结论 脑立体定位斜插法能在一定程度上减轻手术对小鼠颈部上方肌肉的破坏,通过该方法注射顺行示踪病毒能精确靶向小脑蚓部第Ⅸ小叶,并观察到该小叶浦肯野细胞的传出神经投射。