基于HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路研究木兰脂素对急性鼻窦炎大鼠的治疗作用及机制

目的： 观察木兰脂素对急性鼻窦炎(ARS)大鼠的治疗作用，并探讨其通过高迁移率家族蛋白1/ Toll样受体4/核因子-κB(HMGB1/TLR4/NF-κB)信号通路的调控机制方法： 49只大鼠，随机取9 只作为正常组，40只用鼻窦腔内接种金黄色葡萄球菌法制备ARS模型，36只建模成功大鼠随机分为模型组、木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组、阳性组，各9只。木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组分别灌胃20、80 mg·kg^-1体质量的木兰脂素，模型组和正常组灌胃等体质量溶媒，阳性组灌胃40 mg·kg^-1 体质量左氧氟沙星，连续7 d。给药前、末次给药后1 h评估各组鼻窦炎症状评分；测定给药后各组血白细胞(WBC)计数及中性粒细胞占比，观察鼻窦黏膜病理组织学变化，检测鼻腔灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6水平及鼻黏膜中HMGB1、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达情况结果： 给药后，木兰脂素低剂量组、高剂量组、阳性组的急性鼻窦炎症状评分及血WBC计数均低于模型组，但仍高于正常组，且木兰脂素高剂量组及阳性组均低于木兰脂素低剂量组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，而木兰脂素高剂量组与阳性组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。与给药前比较，给药后木兰脂素低剂量组、高剂量组及阳性组急性鼻窦炎症状评分均降低(P＜0.05)，正常组及模型组给药前后无明显差异(P＞0.05)。与模型组比较，木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组、阳性组中性粒细胞占比均降低，且木兰脂素高剂量组低于木兰脂素低剂量组，阳性组低于木兰脂素高剂量组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，而阳性组与正常组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。HE染色显示，模型组大鼠纤毛脱落、缺失、排列紊乱，黏膜上皮破损、变性，黏膜内及黏膜下可见大量炎症细胞浸润； 木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组及阳性组上述病理变化均减轻，且木兰脂素高剂量组和阳性组炎症反应减轻更为明显。与模型组比较，木兰脂素低剂量组、木兰脂素高剂量组、阳性组鼻腔灌洗液中 TNF-α、IL-6水平及鼻黏膜中HMGB1、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白相对表达量均降低，但仍高于正常组，且木兰脂素高剂量组及阳性组均低于木兰脂素低剂量组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，而木兰脂素高剂量组及阳性组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)结论： 木兰脂素治疗ARS效果显著，可能通过HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路抑制鼻黏膜炎症反应。     

艾司氯胺酮复合麻醉在小儿瘢痕非插管全身麻醉患者超脉冲点阵二氧化碳激光治疗术中的应用及效果观察

目的探讨艾司氯胺酮+七氟烷+小儿布洛芬肛栓在小儿烧伤后增生性瘢痕非插管全身麻醉患者超脉冲二氧化碳点阵激光(UFCL)治疗术中的应用及效果观察。 方法选取2020年1月至2021年4月就诊于空军军医大学第一附属医院烧伤与皮肤外科门诊89例烧伤后增生性瘢痕患儿纳入本随机对照临床试验。将患儿采用随机数字表法分为氯胺酮+丙泊酚组[共42例，其中男22例，女20例，平均年龄为(44.33±14.87)个月]和复合麻醉镇痛组(艾司氯胺酮+七氟烷+小儿布洛芬肛栓)[共47例，男24例，女23例，平均年龄(44.47±14.65)个月]；在麻醉前和术中监测患儿血流动力学指标以及警觉/镇静(OAA/S)量表评分；在麻醉清醒时(T0)、麻醉清醒后1 h(T1)、麻醉清醒后2 h(T2)应用儿童疼痛行为量表(FLACC)对患儿疼痛程度进行评估；分别于术前和术后6个月应用温哥华瘢痕量表(VSS)对瘢痕进行评分。对数据行独立样本t检验和χ²检验。 结果(1)麻醉前氯胺酮+丙泊酚组血流动力学及OAA/S量表评分[平均动脉压(63.71±3.40)mmHg、心率(107.21±9.45)次/min、呼吸(25.29±2.34)次/min、血氧饱和度(99.00±0.80)%、OAA/S量表评分(4.64±0.49)分]与复合麻醉镇痛组[平均动脉压(63.87±3.57)mmHg、心率(109.34±12.21)次/min、呼吸(26.473.53)次/min、血氧饱和度(98.77±0.91)%、OAA/S量表评分(4.57±0.50)分]比较差异均无统计学意义(t＝-0.213、0.490、-1.840、1.280、0.204，P>0.05)；麻醉后手术中氯胺酮+丙泊酚组[平均动脉压(56.29±2.43)mmHg、心率(94.48±7.01)次/min、呼吸(21.07±3.03)次/min、血氧饱和度(96.12±1.64)%、OAA/S量表评分(2.07±0.71)分]与复合麻醉镇痛组[平均动脉压(62.87±3.56)mmHg、心率(108.791±1.93)次/min、呼吸(26.52±3.48)次/min、血氧饱和度(99.23±0.67)%、OAA/S量表评分(1.45±0.50)分]比较差异有统计学意义(t＝-10.068、-6.794、-7.824、-11.960、4.820，P<0.05)。(2)氯胺酮+丙泊酚组患儿麻醉清醒时[T0：(4.40±1.17)分]麻醉清醒后1 h[T1：(2.05±0.88)分]、麻醉清醒后2 h[T2：(0.43±0.63)分]FLACC评分比复合麻醉镇痛组[(1.32±0.96)、(0.43±0.62)、(0.13±0.34)分]评分高，说明患儿疼痛度高，且数据比较差异均有统计学意义(t＝10.139、13.669、2.794，P<0.05)。(3)术前及术后6个月瘢痕评分：氯胺酮+丙泊酚组[(9.33±1.60)、(4.48±1.11)分]与复合麻醉镇痛组[(8.43±2.04)、(4.26±1.04)分]相比差异均无统计学意义(t＝2.320、0.940, P>0.05)。 结论复合麻醉镇痛措施在小儿烧伤后增生性瘢痕非插管全身麻醉患者(UFCL)治疗术中应用效果较好，可使患儿术中血流动力学平稳，术中镇静良好，术后疼痛度较低，对于激光治疗效果无影响。     

超微经皮肾镜取石术在直径1.5～2.5 cm肾及输尿管上段结石患者中的应用

目的探讨超微经皮肾镜取石术(UMP)应用于直径1.5~2.5 cm肾及输尿管上段结石患者中的安全性和有效性。方法回顾性分析2018年6月-2020年6月宿迁市第一人民医院收治的60例直径为1.5~2.5 cm肾及输尿管上段结石患者的临床资料,均采用UMP治疗,分析患者手术时间、住院时间、手术成功率、结石清除率、并发症发生率及额外镇痛药使用情况。结果60例患者均一期建立通道并顺利完成手术。所有患者均未行单通道手术,未接受输血,无毗邻脏器损伤(肠道、肝脏和脾脏等),无血气胸发生;存在尿外渗或者有明显症状的腹膜后灌注液患者3例(5.0%),均行保守治疗好转;发热(体温高于38℃)5例(8.3%),均对症治疗后好转;无感染性休克患者。手术时间为35~98 min,平均(56.1±21.3)min;术后住院天数为3~8 d,平均(4.1±1.8)d;术后立即评估结石清除率为85.0%(51/60),术后1个月评估结石清除率为91.7%(55/60);术后镇痛药使用率为15.0%(9/60)。结论UMP是治疗直径1.5~2.5 cm肾及输尿管上段结石安全、有效的治疗方法之一,值得临床推广。     

Knockdown of DEAD-box 51 inhibits tumor growth of esophageal squamous cell carcinoma via the PI3K/AKT pathway

BACKGROUND Esophageal squamous cell carcinoma(ESCC)is one of the most prevalent malignancies that seriously threaten people’s health worldwide.DEAD-box helicase 51(DDX51)is a member of the DEAD-box(DDX)RNA helicase family,and drives or inhibits tumor progression in multiple cancer types.AIM To determine whether DDX51 affects the biological behavior of ESCC.METHODS The expression of DDX51 in ESCC tumor tissues and adjacent normal tissues was detected by Immunohistochemistry(IHC)analyses and quantitative PCR(qPCR).We knocked down DDX51 in ESCC cell lines by using a small interfering RNA(siRNA)transfection.The proliferation,apoptosis,and mobility of DDX51 siRNAtransfected cells were detected.The effect of DDX51 on the phosphoinositide 3-kinase(PI3K)/AKT pathway was investigated by western blot analysis.A mouse xenograft model was established to investigate the effects of DDX51 knockdown on ESCC tumor growth.RESULTS DDX51 exhibited high expression in ESCC tissues compared with normal tissues and represented a poor prognosis in patients with ESCC.Knockdown of DDX51 induced inhibition of ESCC cell proliferation and promoted apoptosis.Moreover,DDX51 siRNA-expressing cells also exhibited lower migration and invasion rates.Investigations into the underlying mechanisms suggested that DDX51 knock down induced inactivation of the PI3K/AKT pathway,including decreased phosphorylation levels of phosphate and tensin homolog,PI3K,AKT,and mammalian target of rapamycin.Rescue experiments demonstrated that the AKT activator insulin-like growth factor 1 could reverse the inhibitory effects of DDX51 on ESCC malignant development.Finally,we injected DDX51 siRNA-transfected TE-1 cells into an animal model,which resulted in slower tumor growth.CONCLUSION Our study suggests for the first time that DDX51 promotes cancer cell proliferation by regulating the PI3K/AKT pathway;thus,DDX51 might be a therapeutic target for ESCC.     

黄连NRAMP3基因的克隆与生物信息学分析＊

目的 克隆黄连（Coptis chinensis Franch.）中自然抗性相关巨噬细胞蛋白（Natural Resistance-Associated Macrophage Protein，NRAMP）的编码基因，并进行生物信息学分析。方法 从黄连基因组中比对NRAMP3基因，并根据比对的基因序列设计特异性引物，经PCR扩增得到的黄连NRAMP3编码序列，进行克隆、测序和生物信息学分析，并利用qPCR技术对黄连NRAMP3基因进行时空表达分析。结果 得到黄连NRAMP3基因cDNA序列，全长1617 bp，编码538个氨基酸，通过与GenBank上的其他蛋白序列比对，将其命名为CcNRAMP3；序列分析显示，黄连NRAMP3基因编码的氨基酸序列包含一个典型的NRAMP结构域（PF01566），有12个跨膜结构域，亚细胞定位于液泡膜上，具有疏水性强的特点。二级结构中肽链构象主要包括α-螺旋与无规则卷曲两部分；三级结构模型具有葡萄球菌锰转运突变体（MntH）的晶体结构。利用系统进化关系分析推测它可能具有转运重金属元素Cd功能。对黄连NRAMP3基因的组织表达分析表明，CcNRAMP3基因在黄连叶片中表达量最高。在遭受镉胁迫时，在须根中表达量先升高后降低，该基因很可能主要在根部对镉进行响应并发挥作用。结论 本研究首次通过克隆得到黄连NRAMP3基因，并运用生物信息学方法对其理化性质、结构特征等进行了分析预测，这些结果将为黄连NRAMP3基因的功能研究以及其对镉转运的调控机制提供理论依据和基因资源。     

肾周脂肪梅奥粘连概率评分系统在肾癌后腹腔镜肾部分切除术中的应用

目的探讨肾周脂肪梅奥粘连概率评分系统（MAP）在肾癌后腹腔镜肾部分切除术中的临床应用价值。 方法回顾性分析2015年1月至2020年6月徐州医科大学附属淮安医院泌尿外科收治的行后腹腔镜肾部分切除术的153例肾癌患者的临床病例资料。依据MAP评分系统将其分为低度复杂组、中度复杂组和高度复杂组三组。比较各组间的手术时间、术中出血量、术中及术后并发症、术中热缺血时间、术后住院时间及术后血肌酐变化情况。 结果在153例患者中，低度复杂组68例，中度复杂组58例和高度复杂组27例。三组患者在年龄、性别、术前血肌酐水平、肿瘤最大径、肿瘤位置、BMI、RENAL评分等方面差异无统计学意义（P>0.05）。随着复杂程度的提高，手术时间、术中出血量也在不断增加（P<0.05）；而术中热缺血时间、术后住院时间及术后血肌酐水平无明显变化（P>0.05）。在术中并发症方面，随着复杂程度的提高，术中并发症的发生率也在增加（P<0.05），且高度复杂组的术后并发症发生风险是低度复杂组的13.895倍（P=0.002)，MAP评分系统预测术中并发症发生的精度较高（AUC=0.757，P=0.002）。但是术后并发症各组比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论MAP评分系统在肾癌后腹腔镜肾部分切除术中，对预估手术难度及术中并发症发生风险有较好的临床应用价值。     

基于文献的老年人群常见证候分布特征研究＊

目的 了解我国老年人中医证候分布特征，为中医药辨治老年人提供参考依据。方法 系统检索中国知识基础设施（CNKI）、中文科技期刊数据库（CCD）、万方数据资源系统数据库（CSPD），纳入研究对象为老年人的临床流行病学调查研究文献，对其调查目的、调查疾病及调查结果等进行描述统计。结果 ①最终纳入168篇文献，其中2010至2020年之间发表138篇（82.14%）；调查地区涵盖全国28个省市自治区，共纳入43948例老年人，累计覆盖340个研究中心；②主要研究结果显示，老年人中医证候阴虚阳亢证（10.05%）>血瘀证（9.5%）>痰浊（湿）证（8.91%）>阴阳两虚证（4.98%）>痰瘀互结证（4.96%）；单元证分布阴虚证（14.70%）>痰证（11.22%）>气虚证（7.15%）>肾虚证（4.72%）>血瘀证（4.18%）；涉及病变脏腑肾>肝>脾>肺>心。结论 根据统计结果，可以看出老年人证候分布虚证多于实证，虚证中又以阴虚证、气虚证最为多见，实证常见血瘀证、痰浊（湿）证等，且多见痰瘀互结证；老年人五脏皆损，其中又以肾、肝、脾功能失调最为突出。     

蒙药绿松石的质量标准研究＊

目的 建立蒙药绿松石的质量标准。方法 收集不同产地绿松石，共10批。观察绿松石样品和粉末的性状并进行理化鉴别；按2020年版《中国药典》（四部）通则方法测定绿松石样品中水分、浸出物含量；采用原子吸收光谱法测定绿松石样品铜元素含量。结果 绿松石为不规则、周围带有黑石的块状物，表面蓝绿色，体重，质硬脆，难砸碎，断面呈贝壳状，蜡样光泽，粉末呈灰绿色，无臭，味淡；理化鉴别结果显示，呈铜盐反应；10批次样品中水分含量为0.41%-3.94%（SD=1.37%），浸出物含量为0.21%-0.81%（SD=0.21%），铜元素含量为3.03%-4.63%（SD=0.63%）。结论 初步拟定绿松石中水分含量不得超多5.0%、浸出物含量不得低于0.10%，铜元素含量应为2.60%-4.84%，制定的标准可用于蒙药材绿松石的质量控制。