宫颈癌组织中E-钙粘素基因5’端CpG岛甲基化与蛋白表达的关系

目的:探讨宫颈癌组织中E-钙粘素(E-Cad)基因5’端CpG岛甲基化与蛋白表达的关系。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)和免疫组织化学法分别检测10例正常宫颈鳞状上皮、31例宫颈癌组织中E-Cad基因5’端CpG岛的甲基化状况与蛋白表达情况,并分析其与宫颈癌临床病理特征的关系。结果:1正常宫颈鳞状上皮组织中未发现存在E-Cad基因甲基化状态,而在宫颈癌组织中E-Cad基因的甲基化率为54.84%(17/31);2宫颈癌组织中存在E-Cad蛋白表达降低或缺失,阳性率仅为38.71%(12/31),显著低于正常宫颈组织的100.00%(10/10),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:E-Cad基因5’端CpG岛甲基化是宫颈癌中该基因失活的机制之一,可能与宫颈癌的发生、发展有关。     

VEGF及其调控因素的研究进展

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是诱导血管生成的促进因子,在创伤愈合、胚胎发育、肿瘤生长和转移过程中起着重要的作用,其表达受细胞遗传特性和肿瘤微环境中众多因素的影响,本文简要介绍VEGF基因的结构、功能与表达调控的研究进展。     

HPV L1 C-末端保守序列短肽体液免疫学特性

目的 探讨一段位于HPV L1 C-末端、长30个氨基酸残基的保守序列的体液免疫学性质而进行此实验.方法 以此序列为基础人工合成短肽,以该短肽免疫小鼠和兔,获得抗血清,通过ELISA,Western Blot及免疫组织化学的方法,分别对含HPV6b,16及18 L1的细胞裂解物、重组蛋白或HPV阳性临床标本进行反应.结果 抗短肽抗血清能与含HPV6b,16及18 L1的细胞裂解物、重组蛋白发生针对HPV L1的反应,能使HPV6和16阳性的临床标本呈现阳性反应,而抗HPV16及抗重组HPV16 L1抗血清对此短肽的反应则较弱.结论结果表明由该保守序列短肽诱导的抗血清具有一定的型间交叉反应特征,这一特性可能对研究检测用广谱HPV L1抗体有一定的意义.该序列短肽抗血清对不同型HPV L1反应的差异性及抗血清对多型别HPV L1的反应是否具有中和性,尚需进一步的研究.     

塞来昔布抑制PI3K-Akt信号转导通路及COX-2表达的作用研究

目的:观察塞来昔布降调节COX-2的表达,诱导宫颈癌HeLa细胞的凋亡作用及阻止PI3K-Akt信号转导的可能机制。方法:采用MTT法检测塞来昔布对HeLa细胞的增殖抑制作用,应用流式细胞术检测塞来昔布对HeLa细胞增殖周期和凋亡的影响,并用免疫组化SP法和RT-PCR法检测塞来昔布对细胞PI3K-Akt信号转导通路的影响。结果:塞来昔布抑制HeLa细胞增殖和诱导HeLa细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性,经不同浓度的塞来昔布处理24 h后,HeLa细胞周期的G1期、G2/M期细胞比例明显增多,S期细胞比例明显下降,细胞被阻滞于G2/M期。塞来昔布能阻止PI3K-Akt的信号转导,并呈浓度和时间依赖性。结论:塞来昔布在体外能下调COX-2的表达,抑制HeLa细胞的增殖,并诱导其凋亡,其作用机制与阻滞细胞周期于G2/M期及阻止PI3K-Akt信号转导通路有关。     

一种新的分子治疗方式——RNAa

RNA激活是最近发现在转录水平激活目的基因表达的新的RNA调控方式,能够激活基因转录的小分子RNA被称为小激活RNA( saRNA).和siRNA的沉默效果相比,RNAa的激活作用更为持久,具有更为广泛的肿瘤治疗范围,有可能成为基因功能研究及疾病治疗的一种新的有效工具.     

提高病理学实验教学效果的几点体会

病理学实验课是病理教学中很重要的一部分,从精选编排教材,加强培养学生的实践能力,加强教学互动,贯穿病例分析,实行引导式教学等方面来提高病理学实验课教学效果谈几点体会。     

第三方调解机制在处理医疗纠纷中的运用

国内医疗纠纷案件的大量增加,占据了大量的司法资源,也严重影响了医患双方的利益,本文通过对第三方调解模式的探讨,希望建立医患之间的第三者,在医疗纠纷案件的处理中发挥积极作用,妥善有效地处理医疗纠纷案件、促进社会的和谐发展。     

天花粉蛋白突变体的构建及其与重组天花粉在原核系统中的表达和纯化

目的:对天花粉蛋白(TCS)的第120-123位氨基酸进行缺失突变,并在原核系统中对其进行表达和纯化。方法:利用重叠延伸PCR的方法得到TCS突变体cDNA,并克隆入原核表达载体pET-28(a+)。酶切和测序鉴定后,将突变体质粒pET-28(a+)-mTCS转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达后,对表达产物用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化和Western-blot鉴定。结果:利用重叠延伸PCR成功获得突变天花粉蛋白的编码序列,并构建pET-28(a+)-mTCS原核表达质粒。在BL21(DE3)菌中,突变体蛋白(mTCS)可被IPTG诱导性表达,并被Ni2+-NTA树脂有效纯化。结论:本实验成功获得一种突变体TCS,并建立该突变TCS的原核表达和纯化的实验方法。     

重组天花粉蛋白的真核表达及其对人宫颈癌 Caski细胞增殖的影响

目的:观察重组天花粉蛋白(recombinant trichosanthin,rTCS)高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响.方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(- )/6His-TCS,稳定转染Caski细胞后,RT-PCR,Western-blot筛选rTCS高表达细胞株.以转染空载质粒pcDNA3.1(一)细胞株作为对照组,MTT法检测2组细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化.结果:成功获得高表达rTCS的Caski细胞株,rTCS高表达能够显著抑制Caski细胞增殖(P＜0.01),并能将细胞抑制在G1和G2期(P＜0.05).结论:rTCS在细胞内高表达具有抗人宫颈癌细胞生长的作用,该研究为宫颈癌治疗提供了新的思路.     

端粒酶与肺癌研究进展

端柱酶是一种由结构RNA和蛋白质构成的逆转录酶，端粒酶的激活可使细胞获得无限增殖的能力而成为永生细胞，它与肺癌的发生发展关系密切，本文综述端拉酶与肺癌的关系研究进展。