狂犬病毒的分子生物学研究

狂犬病毒(rabies virus)是狂犬病的病原体,是一种包膜病毒,在分类学上属于弹状病毒科狂犬病病毒属.根据血清学和抗原性的关系,狂犬病毒分为4个血清型[1].血清Ⅰ型由经典的狂犬病毒组成,包括野毒株和固定株,血清Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型统称为狂犬病相关病毒.近年来,随着分子生物学技术的发展,在狂犬病毒的基因组结构、基因组复制、转录和调控等方面积累了丰富的资料,笔者就狂犬病毒分子生物学方面的研究进展进行了综述.     

5株新疆出血热病毒分子流行病学研究

目的 从分子水平揭示中国新疆出血热（XHF）病毒基因结构与功能的关系。寻找传播途径及流行原因。方法 对分离自新疆的5株XHF病毒进行S基因片段的克隆和测序，与其他克里米亚-刚果出血热（CCHF）的S基因序列进行比较和分析。结果 5株病毒S基因全长均为1672个核苷酸，开放阅读框均为1449个核苷酸，编码一个含482个氨基酸的蛋白，新疆分离毒株的S基因核苷酸序列同源性（93.0%-99.5%)明显高于其他国家分离毒株的S基因核苷酸序列。系统发生树状图显示新疆毒株在一个分支之下形成独立的群体，明显区别于来自其他地区的CCHF病毒并且又进一步分为三组。结论 不同毒株的S基因序列差异不完全取决于病毒分离的宿主，地域和时间。     

应用pAdEasy-1系统构建表达狂犬病毒核蛋白的重组腺病毒

目的 应用pAdEasy-1系统，将分离自我国的狂犬病毒CTN株N基因重组入人5型腺病毒基因组的E1区。成功获得了表达狂犬病毒核蛋白的复制缺陷型重组腺病毒。为使核蛋白得到高效表达，在构建时，将N基因控制在CMV早期启动子和SV40poly（A）加尾信号下，并对其翻译调控区进行了改造，在其第一个密码子前加入了哺乳动物典型的Kozak序列基本功能单位ACG，在N基因终止密码子的3’端另加了一个终止密码子。Western Blotting方法证实该重组腺病毒能正确表达产生核蛋白。重组腺病毒在细胞上遗传稳定性分析表明N基因能稳定存在于腺病毒基因组而不被切除。