对不同月龄雄性大鼠成骨细胞内钙和钙通道电流的实验研究

目的研究不同月龄的雄性大鼠成骨细胞内钙浓度及钙通道电流是否存在差异.方法采用二次酶消化法分离不同月龄(分别为1、2、3、5、7、9、11、13、15)雄性大鼠的原代成骨细胞,通过激光扫描共聚焦技术测定细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)(以平均荧光强度表示),同时应用全细胞膜片钳技术记录成骨细胞膜钙电流(ICa)的变化.结果共聚焦结果显示随月龄增加,成骨细胞内[Ca2+]i逐渐降低,但相邻2月龄组之间细胞内[Ca2+]i无显著性差异(P＞0.05);1、2、3月龄组与11、13、15月龄组成骨细胞内[Ca2+]i有显著性差异(P＜0.05),5、7、9月龄组与各组相比均无差异(P＞0.05).应用全细胞膜片钳技术发现刺激电压为+10 mV时,2、7、13月龄组鼠ICa分别为(-392.77±97.07)pA、(-330.33±33.86)pA和(-287.68±71.01)pA,13月龄组鼠与2月龄组鼠相比,ICa明显降低(P＜0.05),而7月龄组鼠与2月龄组鼠和13月龄组鼠相比,ICa均没有明显差异(P＞0.05).结论不同月龄大鼠成骨细胞内[Ca2+]i存在差异,其机制可能与细胞膜上钙通道活性改变相关.     

rhIGF-1对成骨细胞增殖、分化及骨保护素、骨保护素配体基因mRNA表达的影响

目的 观察不同剂量rhIGF-1对成骨细胞增殖，分化及骨保护素，骨保护素配体mRNA基因表达的影响，为明确骨保护素，骨保护素配体在骨质疏松症发病的作用机理及rhIGF-1在临床中应用提供实验依据。方法 取2代培养的大鼠成骨细胞，在rhIGF-1为0ng/ml,10ng/ml,20ng/ml,50ng/ml的浓度中培养。观察细胞的生长及钙结节的形成，MTT法，碱性磷酸酶（ALP），骨钙素（OCN）测定细胞增殖和分化，RT－PCR测定rhIGF-1对成骨细胞骨保护素，骨保护素配体基因mRNA表达的影响。结果 成骨细胞在7d可铺满瓶壁，30d可形成钙结节，rhIGF-1可促进成骨细胞的增殖，ALP和OGN的分泌，促进骨保护素，骨保护素配体基因的表达，以促进骨保护素表达明显，在rhIGF-1为10ng/ml时作用明显。结论 rhIGF-1可促进大鼠成骨细胞的增殖，分化，及骨保护素，骨保护素配体基因mRNA的表达，骨保护素mRNA表达显。rhIGF-1可能通过影响骨保护素，骨保护素配体而调节成骨细胞破骨细胞的平衡，使骨重建，从而防治骨质疏松症。     

拇指背动脉岛状皮瓣再造拇指的解剖学研究

作者在18只尸体手标本上,对拇指背动脉进行了显微解剖研究,发现该动脉出现率较恒定,起始部血管外径平均为0.63mm,动脉可解剖长度为7.2cm,血管分布范围包括第一掌骨背侧、部份鱼际区及拇指近节背桡侧5×10cm 的皮肤。以拇指背动脉及与其相连的桡动脉远段为蒂,可以游离成一个理想的岛状皮瓣,适用于拇指再造及邻近的组织缺损修复。     

微重力引起的骨质丢失研究进展

人类对太空的探索日益频繁,然而太空微重力会引起航天员骨质丢失,对航天员的健康造成损害。因此,有研究者通过航天实验及模拟微重力实验研究微重力下骨质丢失的发生机制及解决措施。微重力会引起成骨细胞和破骨细胞代谢活动改变,并引起机体对钙离子新陈代谢的改变。航天微重力导致的骨质丢失是微重力和太空射线共同作用的结果。本文将对微重力所致骨质丢失的发生机制和治疗对策加以概述。     

不同用药方案阿仑磷酸钠治疗老年性骨质疏松症的临床疗效分析

目的探讨阿仑膦酸钠的不同给药方案防治老年性骨质疏松症的临床疗效与安全性。方法采用随机平行对照实验,连续入选600例老年性骨质疏松症患者,按给药间隔分成两组。A组为常规间隔,每周1次口服阿仑膦酸钠70 mg;B组为长间隔,每两周口服阿仑膦酸钠70 mg。两组均联用钙尔奇D600每日1片。测定两组治疗前、治疗26、52 w的骨密度值,检测治疗前、治疗13、52 w的血清钙、磷、碱性磷酸酶水平及尿钙/肌酐比值;观察不良反应与新生骨折的发生情况。结果与治疗前相比,治疗26、52 w两组骨密度均明显增加,差异有统计学意义(P0.05);而两组骨密度变化率比较无显著差异(P0.05)。与治疗前相比,治疗13、52 w两组血清碱性磷酸酶水平、尿钙/肌酐比值均明显减少,差异有显著统计学意义(P0.01);血钙、血磷水平无明显变化。A、B两组治疗52w总有效率分别为85.31%和84.89%,差异无统计学意义(P0.05);不良反应发生率分别为9.09%和3.60%,差异有显著统计学意义(P0.01)。两组均无新生骨折发生。结论阿仑膦酸钠防治老年性骨质疏松症安全有效。与常规间隔用药相比,延长用药间隔的临床疗效相似、不良反应发生率较低,更为便捷经济。因此,阿仑膦酸钠间断、小剂量的用药方案在临床值得推荐。     

衰老骨髓间充质干细胞中端粒短缩与成骨能力下降相关性研究

目的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是组织工程中修复骨和软骨缺损的重要种子细胞。老年供体BMSCs的增殖速度和分化能力均低于年轻供体,其相关机制仍不清楚,希望通过相关实验对其进行探究。方法采用SD大鼠的BMSCs进行培养,并通过应用H_2O_2处理和连续传代诱导细胞衰老。通过β-半乳糖苷酶染色和端粒长度分析检测衰老,同时对细胞增殖和成骨分化能力进行检测。应用Olaparib维持端粒长度来研究端粒长度在细胞衰老、增殖和分化能力方面的影响。结果 H_2O_2可以增加BMSCs中β-半乳糖苷酶染色阳性率、缩短端粒长度、降低细胞增殖率和碱性磷酸酶活性。BMSCs长期传代后也可观察到成骨分化的衰老。抑制端粒长度下降可降低H_2O_2诱导所致的β-半乳糖苷酶染色阳性率增加,促进细胞增殖,增强成骨分化能力。结论端粒长度下降可引起BMSCs的衰老,从而降低其成骨分化能力、抑制干细胞增殖。     

髋臼周围部肿瘤的切除与重建1例

1病例资料 患者,男,55岁。左髋部疼痛3个月,加重10余天,于2008年4月9日入院。患者3个月前无明显诱因左髋部疼痛,疼痛呈持续性加重。近10余日左下肢疼痛剧烈,以大腿后侧为重,夜间痛明显。查体：脊柱生理弯曲正常,棘突无压痛及叩击痛：平卧时左臀部因疼痛不敢着床,左侧梨状肌下缘处压痛伴左下肢放射痛。左侧坐骨结节处压痛明显。左侧腹股沟压痛明显,以偏内侧为重。左侧直腿抬高试验及加强试验均阳性。     

羟基磷灰石／40％氧化锆与骨组织相容性和生物活性的体内研究

目的探讨羟基磷灰石／40％氧化锆（HA／40％ZrO2）骨植入后组织相容性和生物活性。方法30只家兔右侧股骨大转子植入HA／40％ZrO2,左侧植入HA为对照组,于术后1、2、4周处死动物通过光镜和手术前后1周白细胞计数（WBC）观察局部及全身炎症反应和骨／植入物界面情况。于术后4、8、16周时处死动物,通过光镜和扫描电镜分析,观察局部炎症反应及骨／植入物界面结合进行研究。结果①1、2、4周后植入物局部及全身均有轻微炎症反应,空隙随时间延长而逐渐减小,术后WBC较术前升高,有显著差异;于8、16周时局部及全身无明显炎症反应,骨与植入物结合紧密且无明显空隙,两组间无显著差异。②光镜下见1、2周少量炎症细胞浸润,4、8、16周无明显炎症细胞浸润;4周两组植入物与宿主骨间见骨缺损区,内充满新生类骨质;8周两种植入物与新生骨组织整合,新生骨组织成熟度升高。③扫描电镜下见新生骨成熟度随植入时间而升高。结论HA／40％ZrO2有良好的组织相容性和生物活性,具有广阔的临床应用前景。     

应用经皮椎体成形术治疗骨质疏松性椎体骨折的研究

目的 探讨椎体成形术（PVP）在治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折（OVCF）中的作用.方法 31例骨质疏松性压缩性骨折患者接受了椎体成形术,患者均有背部疼痛.在X线透视引导下,经单侧或双侧椎弓根入路行PVP,每个椎体注入骨水泥量为3～8 ml,平均6.0 ml,完成46个椎体成形术.术后患者随访1～18个月.结果 31例中绝大多数患者术后6 h～2 d疼痛明显缓解或消失.结论 椎体成形术为骨质疏松压缩性骨折经保守治疗无效患者提供了一种安全、微创、有效的治疗方法.     

17-β雌二醇对不同月龄大鼠成骨细胞雌激素受体β表达的影响

目的探讨17-β雌二醇对不同月龄大鼠成骨细胞雌激素受体β（ERβ）表达的影响。方法雌性大鼠颅盖骨经多次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养得到大量纯净成骨细胞并进行形态学检查和碱性磷酸酶（ALP）染色;免疫组化法（SABC）进行雌激素受体染色;用10-8mol/L17-β雌二醇处理培养的成骨细胞,SDS-PAGE电泳和western blot法检测雌激素受体。结果成骨细胞碱性磷酸酶染色阳性率为90%以上。形态学检查符合成骨细胞的特征。免疫组化染色显示大鼠的成骨细胞存在雌激素受体β,且位于胞核内。Western blot结果表明,与对照组相比,处理组的各月龄大鼠雌激素受体β表达均有上调。结论17-β雌二醇能提高各月龄组大鼠成骨细胞雌激素受体β表达水平,不同月龄间上调水平不同,以4、8月龄组最为显著。