LncRNA MEG3靶向miR-181a-5p调控宫颈癌细胞放射敏感性

目的 研究LncRNA MEG3对宫颈癌细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法 运用qRT-PCR法检测放射抗性和放射敏感性宫颈癌细胞中LncRNA MEG3的表达;将过表达对照组(转染pcDNA 3.1)、过表达LncRNA MEG3组(转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3)、抑制miR-NC组(转染anti-miR-NC)、抑制miR-181a-5p组(转染anti-miR-181a-5p)、过表达LncRNA MEG3+过表达miR-NC组(共转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3和anti-miR-NC)、过表达LncRNA MEG3+过表达miR-181a-5p组(共转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3和anti-miR-181a-5p),均用脂质体法转染至SiHa细胞;克隆形成实验检测细胞的存活分数;流式细胞术检测细胞的凋亡率;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性;Western blot检测细胞中PTEN、p-Akt、Akt的蛋白表达。结果 与放射敏感组相比,放射抗性宫颈癌组织中LncRNA MEG3的表达明显降低(P<0.05),其表达量与宫颈癌细胞的放射敏感性呈正相关;过表达LncRNA MEG3、抑制miR-181a-5p均可显著增强宫颈癌细胞SiHa放射敏感性,促进凋亡(P<0.05);野生型LncRNA MEG3细胞的荧光活性受miR-181a-5p的抑制。过表达miR-181a-5p逆转了LncRNA MEG3对宫颈癌细胞放射增敏和促凋亡作用及对PTEN/Akt信号通路的调控。结论 长链非编码RNA LncRNA MEG3可增强宫颈癌细胞放射敏感性,其机制可能与靶向miR-181a-5p调控PTEN/Akt 信号通路有关,可为提高宫颈癌的预后提供新方向。     

CAR-T治疗后细胞因子释放综合征的发生机制与临床治疗

[摘要] 靶向CD19 的嵌合抗原受体修饰T 细胞（CAR-T）疗法在B 细胞肿瘤治疗中取了重大进展，美国FDA 已批准了2 项CD19 CAR-T治疗产品上市。随着CAR-T、双特异性T细胞衔接器（BiTE）和双重高亲靶向蛋白（DART）以及基因修饰的T细胞受体疗法（TCR-T）等免疫治疗临床及机制研究的开展，其潜在风险及副作用得到更广泛的认识，尤其是细胞因子释放综合征（CRS）。CRS是目前CAR-T治疗后最常见的并发症，重者可能危及生命。CRS病理生理学机制复杂，涉及多种免疫细胞及非免疫细胞，并可累及全身各脏器，研究CRS发生发展机制对提高CAR-T治疗安全性有重要意义。近年来，研究者们在动物模型中对CRS机制进行了更深入的研究。本文论述CRS的发生、病理生理学机制、动物模型、临床特征以及分级治疗等研究进展，旨在为更深入地从机制层面了解CRS，更安全地开展CAR-T临床应用提供指导。     

腹腔镜联合胆道镜保胆取石术治疗胆囊结石临床应用研究

目的:分析探讨对胆囊结石病患使用腹腔镜联合胆道镜保胆取石术治疗的临床应用效果。方法:将2016年9月至2017年9月收治的100例胆囊结石病患作为研究对象,随机分50例为接受腹腔镜胆囊切除手术治疗的对照组,以及余下50例为接受腹腔镜、胆道镜联合保胆取石手术治疗的观察组,分析比较两组病患临床治疗效果。结果:两组病患治疗后均取得较好疗效,均未在术中转开腹手术;观察组病患术后胃肠功能恢复时间、肛门排气时间和对照组病患相比没有显著数据差异(P0.05);观察组术后4周血清白蛋白以及体重指数情况要显著优于对照组(P0.05);观察组病患术后胆管损伤、胆管残余结石、胆汁反流性胃炎、腹泻、腹胀等并发生发病率为4.00%(2/50),和对照组16.00%(14/50)的并发症发病率相比显著较低(P0.05)。结论:为胆囊结石病患进行腹腔镜联合胆道镜保胆取石术治疗的效果确切,安全性较好,具有临床推广价值。     

狼毒大戟根中的萜类成分研究

目的:研究狼毒大戟Euphorbia fischeriana根中的萜类成分。方法:利用硅胶、MCI、ODS、Sephadex LH-20柱色谱及半制备高效液相色谱法(HPLC)等分离手段对狼毒大戟根中的萜类成分进行分离纯化,根据理化性质、波谱学数据分析鉴定化合物结构。结果:从狼毒大戟根的80%丙酮提取物中分离鉴定了7个萜类化合物,包括5个二萜类化合物和2个三萜类化合物,分别鉴定为7-羰基脱氢松香酸(1)、trogopteroid F(2)、陶塔二酚(3)、18-羟基弥罗松酚(4)、19-羟基弥罗松酚(5)、环木波罗-22-烯-3β,25-二醇(6)和羽扇豆醇(7)。结论:除了化合物6和7,其余化合物均为首次从狼毒大戟中分离得到。     

神经元谷氨酸转运体反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经保护作用

目的：测定神经元谷氨酸转运体(excitafory amino acid cartier 1，EAAC1)反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响，探讨脑缺血神经保护新方法。方法：将大鼠分为假手术组、模型组、反义寡核苷酸组(简称反义组)和正义寡核苷酸组(简称正义组)，用插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。运用Western blot法、神经功能缺损评分、TYC染色、尼氏染色观察缺血区EAAC1表达和EAAC1反义寡核苷酸对缺血大鼠神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响。结果：模型组缺血区EAAC1表达(0．61&;#177;0．03)明显高于假手术组(0．20&;#177;0．01)，差异有显著性意义(F=49．49，P&;lt;0．01)，而反义组表达(0．31&;#177;0．01)低于模型组，差异有显著性意义(F=49．33，P&;lt;0．05)。反义组大鼠梗死体积(101．33&;#177;15．08)mm^3显著小于模型组(140．5&;#177;20．27)mm^3，差异有显著性意义(F=6．66，P&;lt;0．01)，反义组大鼠神经功能缺损评分(3．33&;#177;0．41)分，显著高于模型组(1．42&;#177;0．34)分，差异有显著性意义(F=48．51，P&;lt;0．01)，海马各区数密度值均高于模型组(P&;lt;0．01和P&;lt;0．05)。结论：EAAC1反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤有神经保护作用。     

重症肺超改良BLUE方案在ICU急性呼吸困难患者中的临床应用

目的:探讨改良急诊床旁肺部超声评估(BLUE)在ICU急性呼吸困难患者肺实变、肺不张诊断中的应用。方法:选取2018年10月－2021年6月江西省萍乡市第二人民医院ICU收住的疑似急性呼吸困难肺实变、肺不张患者56例作为观察对象,入住ICU后完成传统BLUE方案、改良BLUE方案检查,传统BLUE方案由彩超室医生独立完成及诊断,传统BLUE方案包括上蓝点、下蓝点、膈肌线、PLAPS点;改良BLUE方案由笔者医院ICU医生独立完成并诊断,改良BLUE方案检查:在传统BLUE方案基础上增加了后蓝点。上述检查完成24h内行胸部CT和X线胸片检查,以胸部CT检查结果为金标准,将重症肺改良BLUE方案和传统BLUE方案检查结果、X线胸片结果与“金标准”进行比较,分析不同检查方法诊断效能。结果:56例患者112侧肺部中,经胸部CT检查诊断肺实变及肺不张85侧(75.89%),改良BLUE方案检查诊断有81侧(72.30%),传统BLUE方案检查诊断有63侧(56.25%),X线胸片诊断35侧(44.64%);经Kappa一致性检验分析,改良BLUE方案与胸部CT检查的一致性较好(Kappa=0.89),传统BLUE方案与胸部CT检查的一致性较差(Kappa=0.34),X线胸片与胸部CT检查的一致性最差(Kappa=0.21)。改良BLUE方案诊断肺实变及肺不张的敏感度为94.11%,特异性为96.29%,诊断准确率为94.64%,阳性预测值为98.76%,阴性预测值为83.87%;BLUE方案诊断肺实变及肺不张的敏感度为65.88%,特异性为74.07%,诊断准确率为67.85%,阳性预测值为88.89%,阴性预测值为40.81%,与胸部CT比较,差异有统计学意义(P<0.05);X线胸片诊断肺实变及肺不张的敏感度为41.18%,特异性为44.44%,诊断准确率为41.96%,阳性预测值为70.00%,阴性预测值为19.35%,与胸部CT比较,差异有统计学意义(P<0.05)。重症肺超改良BLUE方案用于ICU急性呼吸困难的肺实变患者中诊断敏感度、特异性、阳性预测值和阴性预测值和诊断符合率均高于传统BLUE方案检查和X线胸片检查(P<0.05)。结论:改良BLUE方案用于ICU急性呼吸困难患者肺实变、肺不张中,能获得较高的诊断准确度、敏感度及特异性,能为临床诊疗提供参考依据。     

双水平正压通气治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期并发Ⅱ型呼吸衰竭效果的Meta分析与试验序贯分析

背景慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）患者发展为Ⅱ型呼吸衰竭的风险明显增加。在临床治疗中双水平正压通气（BiPAP）被广泛运用于AECOPD患者来纠正呼吸性酸中毒,延缓肺功能进一步恶化,但是BiPAP在该类患者中的治疗效果仍存在着争议。目的系统评价BiPAP对于AECOPD并发Ⅱ型呼吸衰竭患者的治疗效果。方法计算机检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网、中国生物医学文献数据库（CBM）、PubMed、The Cochrane Library、Springer、Medline、Web of Science等数据库中关于BiPAP治疗AECOPD并发Ⅱ型呼吸衰竭的随机对照研究（RCT）,检索时限从数据库建库至2020-10-01。由两位研究者独立对所检索出的文献进行筛选、提取数据和质量评价。提取第一作者、国家、人群特征、年龄、样本量、试验组及对照组的干预方式、试验组干预频率和时长、评价指标〔pH值、二氧化碳分压（PaCO2）、氧分压（PaO2）、呼吸频率（RR）、气管插管率、不良反应发生率〕等信息。采用Review Manager 5.4软件对纳入文献进行Meta分析,使用哥本哈根临床试验中心开发的TSA v0.9完成试验序贯分析。结果共纳入10篇RCT,其中4篇为高质量等级文献,6篇为中等质量等级文献。试验组改善AECOPD并发Ⅱ型呼吸衰竭患者的pH值〔MD=0.04,95%CI（0.03,0.04）,P<0.05〕、PaCO2〔MD=-7.22,95%CI（-8.20,-6.24）,P<0.05〕、PaO2〔MD=6.23,95%CI（5.31,7.14）,P<0.05〕、干预24 h内和24 h后改善AECOPD并发Ⅱ型呼吸衰竭患者的RR〔MD=-3.85,95%CI（-4.36,-3.35）,P<0.05〕、气管插管率〔RR=0.50,95%CI（0.32,0.78）,P<0.05〕的效果优于对照组。试验组患者腹胀发生率〔RR=5.95,95%CI（1.79,19.77）,P<0.05〕、面部皮肤受损发生率〔RR=8.04,95%CI（1.92,33.76）,P<0.05〕高于对照组。试验序贯分析结果得出了肯定的结论,即BiPAP治疗能明显改善AECOPD并发Ⅱ型呼吸衰竭患者的pH值、PaCO2、PaO2、RR和气管插管率。结论AECOPD并发Ⅱ型呼吸衰竭患者使用BiPAP治疗,能够改善患者呼吸性酸中毒和缺氧状况,降低气管插管率,但BiPAP治疗可能会提高如腹胀、面部皮肤损伤等不良反应发生率。     

动脉瘤性蛛网膜下腔出血病人Lindegaard比值与脑组织氧分压的相关性

目的 探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血（aSAH）病人经颅多普勒超声（TCD）检测Lindegaard比值（LR）与脑组织氧分压（PbtO2）的相关性。方法 2019年8月至2022年2月前瞻性收集aSAH共46例。使用LICOX-Ⅱ型脑组织氧分压监测系统,采用氧分压探针（Clark型微型电极）记录大脑中动脉供血脑组织PbtO2,其中PbtO2<20 mmHg且持续时间≥10 min定义为局部组织缺氧。TCD检测PbtO2探针同侧MCA和颈内动脉（ICA）颅外段,LR指同侧MCA与ICA颅外段平均血流速度比值,LR≥3存在脑血管痉挛。结果 根据PbtO2监测结果,16例出现脑组织缺氧（缺氧组）,30例无脑组织缺氧（非缺氧组）;与非缺氧组相比,缺氧组入院GCS评分较低（P=0.041）,脑血管痉挛发生率呈增高趋势（P=0.057）。LR判断存在脑血管痉挛37例,无脑血管痉挛9例。LR与PbtO2呈显著负相关（r=-0.305,P=0.039）。LR≥3预测脑组织缺氧的特异性很高（93.3%）,但敏感性较低（56.3%）;LR对脑组织缺氧的阳性预测值和阴性预测值分别为81.8%和80.0%。结论 aSAH病人在预防性迟发性脑缺血监测时,TCD检测LR是预测脑组织缺氧较好的非侵入性方法,但其敏感性低,不能单纯通过LR结果正常而排除发生迟发性脑缺血的可能。     

脐带全层源间充质干细胞分离培养及向成软骨细胞分化的实验研究

目的从人脐带全层中分离培养间充质干细胞(MSCs),并进行成软骨诱导分化,为组织工程软骨和软骨损伤后修复提供种子细胞。方法采用胶原酶消化法从脐带全层中分离培养间充质干细胞,显微镜下观察细胞形态,细胞计数法绘制细胞生长曲线,采用流式细胞仪检测细胞周期及细胞表型,采用微团细胞培养在软骨诱导液中向软骨细胞分化,阿尔辛蓝及甲苯胺蓝染色检测细胞分化情况,RT-PCR法检测诱导后细胞表达聚集蛋白聚糖(ACAN)基因情况。结果人脐带全层来源的MSCs呈成纤维样形态漩涡状贴壁生长,细胞高表达HLA-I类分子、CD73、CD90、CD166及CD105,不表达CD34、CD45、CD14、CD31、CD80、CD86及HLA-DR。细胞诱导分化21d后,阿尔辛兰及甲苯胺蓝染色阳性;RT-PCR检测诱导后的细胞表达ACAN,而对照组无表达。结论人脐带全层为成体MSCs提供一种新而方便的来源,人脐带间充质干细胞(hucMSCs)体外培养能够向软骨细胞分化。     

经尿道双极等离子电切治疗复杂性尿道狭窄体会

目的:提高经尿道双极等离子电切治疗复杂性尿道狭窄的治疗效果。方法:采用经尿道双极等离子电切治疗复杂性尿道狭窄104例,并进行术后随访。结果:104例手术均获成功,术后随访96例(3个月～10年),均排尿通畅,Qmax 17～26 ml/s。结论:经尿道双极等离子电切治疗复杂性尿道狭窄疗效确切,术中术后的正确处理是减少并发症、降低复发率、提高疗效的关键。