筛查大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌高产AmpC酶的三种方法比较

AmpC酶属于分子生物学分类中的C类酶及功能分类(Bush分类)中的Ⅰ类酶,能水解第一、二、三代头孢菌素及单酰胺类抗生素,且不受酶抑制剂抑制,外膜蛋白丢失的菌株甚至出现对碳青霉烯类抗生素耐药[1].虽然质粒型AmpC酶不及ESBL常见,但由其所致严重感染的病死率更高,危害更严重.Pai等[2]报道,在产质粒型AmpC酶肺炎克雷伯菌血液感染患者中,最初接受抗生素治疗的失败率较高,尤其是头孢菌素治疗,并认为产生AmpC酶菌株常规体外药敏试验中出现的致命性错误是假敏感问题.     

恶性疟原虫FCC1/HN株CTP基因真核表达载体的构建

目的构建恶性疟原虫CTP 基因的真核表达载体,以便进一步研究其功能. 方法根据Genbank 已发表恶性疟原虫CTP基因序列(序列号为X084041),自行设计并合成了一对引物,通过聚合酶链反应扩增出CTP基因,经HindⅢ和BamHⅠ消化后定向克隆入测序载体pUC19,构建重组质粒pUC19-CTP.经双酶切、PCR扩增和序列测定,证实插入片段与已知CTP编码序列完全相同.用HindⅢ和BamHⅠ消化pUC19-CTP,将双酶切下的CTP编码基因片段定向亚克隆入真核表达载体pcDNA3. 结果经双酶切和PCR扩增鉴定证实CTP基因正向插入真核表达载体pcDNA3中. 结论真核表达质粒pcDNA3-CTP构建成功.     

恶性疟原虫海南株CSP3′末端基因的克隆及序列分析

目的　构建恶性疟原虫海南株 (FCC1 HN)CSP3′末端基因的原核表达载体 ,并对CSP3′末端基因进行序列测定。方法　根据恶性疟原虫CSP编码的基因序列设计引物 ,采用PCR技术扩增出CSP3′末端基因 ,将其克隆入原核表达载体pGEX 4T 1,转化大肠杆菌JM10 9;阳性重组质粒经PCR、酶切鉴定 ,用双脱氧链末端终止法进行序列测定。　结果　从恶性疟原虫基因组中扩增出CSP3′末端基因 ,其片段大小为 2 2 5bp ,构建的阳性重组质粒pGEX 4T 1 CSP3′末端经PCR和酶切鉴定与预期结果一致 ,测序结果进一步确认了插入片段的正确性。　结论　成功地构建了CSP3′末端的原核重组质粒 ,为进一步研究其功能奠定了基础。     

临床尿路感染病原菌分布及药物敏感性分析

泌尿系统感染（urinary tract infection UTI）是常见的感染性疾病，为了解UTI病原菌的菌群分布及耐药情况，指导临床合理使用抗生素，作对2004年8至12月自中段尿培养标本中分离到的病原菌的菌群分布及对抗菌药物敏感率作回顾性分析，现报告如下。     

金黄色葡萄球菌感染儿童的现状调查和耐药性分析

目的研究儿童感染金黄色葡萄球菌的耐药现况,比较新生儿MRSA与普通儿童MRSA耐药情况,为临床儿科合理使用抗生素提供依据。方法对2013年-2016年14岁以下儿童标本分离的482株金黄色葡萄球菌进行鉴定和药敏分析,调查不同来源菌株的耐药情况,以及新生儿和普通儿科的分离株进行耐药比较分析。结果从482株菌株中分离到100株MRSA,占20.75%,以呼吸道标本为主(354株,占73.44%),MRSA占18.64%,咽拭子分离MRSA比率高于痰液;新生儿更容易感染MRSA,普通儿科对红霉素和克林霉素耐药率高于新生儿且耐药谱广。结论儿童感染金黄色葡萄球菌以呼吸道为主,特别是咽拭子等上呼吸道标本可疑MRSA定植值得引起注意,新生儿的易感性,耐药谱变宽,使得临床加强耐药监控,控制感染刻不容缓。     

肺炎链球菌对大环内酯类的耐药机制研究

目的 探讨台州医院肺炎链球菌临床分离株的耐药性及对红霉素的耐药机制,为临床用药提供依据.方法 收集临床分离的肺炎链球菌31株,运用K-B纸片法及VITEK细菌鉴定仪检测其对抗菌药物的药敏谱;通过纸片法筛选对大环内酯类抗菌药物(红霉素)的耐药表型,PCR扩增红霉素耐药基因:ermB、mefA,并送测序鉴定.结果 K-B法纸片药敏结果显示,肺炎链球菌临床分离株主要对红霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶和四环素耐药,耐药率分别为:100.0％、64.5％、32.2％;未发现有对青霉素、万古霉素及替考拉宁耐药的菌株;31株肺炎链球菌临床分离株耐药表型均为组成型耐药;31株红霉素耐药菌株的基因均为ermB(+)/mefA(+),测序结果正确.结论 台州医院肺炎链球菌临床分离株对红霉素耐药率高,erm基因介导的靶修饰作用和mef基因介导的外排泵机制的共同作用,是主要的耐药机制.     

恶性疟原虫海南株CTP基因的克隆测序及序列分析

目的 测定恶性疟原虫（P.f）海南株CTP基因序列,了解该虫株CTP基因序列与其它种类的CTP基因序列的差异,用于药物靶位的筛选。方法 用PCR的方法特异性的扩增CTP基因,并将此基因克隆于测序载体pUC19,采用Sanger双脱氧链末端终止法测序。结果 我国海南株的CTP基因序列与其它的CTP基因有不同程度的差异。结论 P.f CTP作为潜在的抗疟药物靶值得进一步深入研究。     

婴儿下呼吸道感染病原菌分布及产ESBLs菌株检测

目的：了解婴儿下呼吸道感染的病原菌分布及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的构成比例。方法：对104名婴儿下呼吸道分泌物培养阳性结果进行分析。采用双纸片协同试验检测ESBLs。结果：104名婴儿阳性标本共培养致病菌125株。其中76．8％为革兰氏阴性杆菌，16．0％为革兰氏阳性球菌，7．2％为真菌。其中产ESBLs13株，占肠杆菌科细菌20．0％。结论：革兰氏阴性杆菌为婴儿呼吸道感染的重要病原菌，近来产ESBLs菌株构成有增加趋势。     

浅议低年段语文语用性教学策略

语用性是语文课程的特点.通过设计有效的活动组织学生去实践,在实践活动中提高语文能力.低年段语文教学活动应该根据学生的学情和年龄特征,考究教学策略,既要掌握语言知识又能彰显语用性.     

血液透析用的B液细菌污染的调查与分析

目的:分析血透室血液透析用的B液细菌含量超标情况,找出细菌含量超标的原因。方法:按卫生部《医院感染管理规范》的要求检测细菌含量,并鉴定细菌种类。结果:过夜保存和现配血液透析用的B液细菌检测不合格;反渗水和A液细菌检测均合格;将细菌数严重超标的B液和合格A液与合格反渗水按1∶34混合而成的透析液(即透析器进口水)细菌检测也合格。结论:血液透析用的B液细菌含量超标与B液过夜保存或B液配制过程中污染有关;建议每月进行B液的监测。