中国流行性出血热自然疫源地结构和传播机理研究——Ⅳ.不同来源毒株不同途径感染黑线姬鼠和褐家鼠实验研究

本实验为解决EHF病毒在中国EHF主要宿主动物种群中的传播途径问题,以及进一步研究阐明“鼠传人”的途径,在本室负压隔离器内进行了实验研究。实验结果表明,黑线姬鼠和褐家鼠,对不同来源毒株(从黑线姬鼠分离的遵义后坝株和自永春褐家鼠分离的R26株)、不同感染途径(气溶胶、口饲、滴鼻和划皮)都能发生感染,从试鼠特异性IgG抗体产生滴度看,气溶胶易感染黑线姬鼠和褐家鼠。结果还显示,黑线姬鼠和褐家鼠对从本种分离的毒株更敏感。从褐家鼠产生的EHF IgG抗体滴度看,一般均低于黑线姬鼠,是否与感染量多少有关,有待进一步研究。本实验进一步证明,黑线姬鼠毒株和褐家鼠毒株,可致两种试鼠相互感染。由此可见,姬鼠型疫区演变为混合型疫区是必然趋势。基于此点,控制疫区褐家鼠数量,不仅能防止疫区蔓延扩大,且可阻断黑线姬鼠病毒传播给褐家鼠。因此,具有重要的流行病学意义。     

呼和浩特市鼠类携带汉坦病毒的基因分型

目的对呼和浩特市流行的汉坦病毒进行基因分型,为制定肾综合征出血热防制对策提供科学依据。方法对经间接免疫荧光试验初筛为阳性的鼠肺标本用汉坦病毒型特异性引物,以巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增部分M和S基因片段上的目的核苷酸序列,纯化回收测序后,将扩增片段的核苷酸序列与已知病毒的核苷酸序列进行比较,以明确汉坦病毒的基因型及基因亚型。结果呼和浩特市33份阳性鼠肺中,其中32份为褐家鼠肺,1份为小家鼠肺,经巢式RT-PCR扩增,用汉城病毒型特异性引物共扩增出部分S、M片段(G1、G2区)69个,经同源性和系统发生分析,褐家鼠和小家鼠所携带汉坦病毒均为汉城型S1亚型。结论呼和浩特市家鼠中流行的汉坦病毒为汉城型,与流行病学分型一致。     

西藏林芝地区肾综合征出血热自然疫源地血清流行病学调查

目的：查明西藏林芝地区是否存在肾综合征出血热（HFRS）自然疫源地。方法：选择有疫情报告地区,进行人间疫情调查;健康人群特异性抗体检测;在山地针,阔叶混合林及山间平原的农田和居民区,用夹夜法调查小兽数量;采集捕获动物肺,血和牛,羊血清标本,检测汉坦病毒感染情况,血标本用金标免疫斑点渗滤试验和间接免疫荧光法检测抗体;动物肺的冷冻切片用免疫荧光法检测汉坦病毒抗原。结果：在西藏自然区防疫站疫情资料中,有该病记载的1976年工布江达县1例,1980年林芝县9例,检测林芝地区医院住院者18人,西藏高考学生357人和其他体检人员117人血标本,仅从2名林芝县,2名工布江达县,1名察隅县的高考学生和1名住院产妇中检出抗汉坦病毒总体抗和IgG荧光抗体,被检人群隐性感染率为1．22％,检测中华姬鼠等脊椎动物肺115只,汉坦病毒抗原阳性的中华鼠1只,带病毒率0．87％,动物血抗汉坦病毒总体和IgG荧光抗体皆阳性的有中华姬鼠5只,高山田鼠1只,抗体阳性为5．22％,检测扣,羊310只血清,其中黄牛抗汉坦坦病毒总抗体阳性率0．85％（1／118）,绵羊总抗体和IgG抗体阳性率1．68％（3／179）,结论：西藏林芝地区有HFRS散发病例,健康人群,中华姬鼠,高山田鼠,黄牛和绵羊中有汉坦病毒感染,证实了林芝县山地针,阔叶混合林及山间平原地带和工布江达县境域内存在着HFRS自然疫源地。     

海南省克里米亚─刚果出血热病毒血清抗体检测结果分析

本文首次报告海南省从本土２～３月龄羊羔血清中检出克里米亚─刚果出血热（ＣＣＨＦ）病毒ＩｇＧ抗体，阳性率１．０８％（２／１８６）；人和其它动物未检出阳性。表明海南省低山丘陵地带的澄迈县永发镇、儋州市峨蔓乡存在着ＣＣＨＦ的自然疫源地。     

大林姬鼠中汉坦病毒的分离及其S片段的序列分析

目的 分析吉林省大林姬鼠携带的汉坦病毒(HV)在进化过程中的系统发生关系。方法采用病毒分离技术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、克隆以及测序技术对中国大林姬鼠携带的HV进行研究。结果从4只大林姬鼠Hv抗原阳性的肺组织标本中分离到2株HV(CJ189和CJ193)，对其中CJ193病毒株的S片段进行克隆、测序以及分析，基因分型结果为汉滩型(HTN)汉坦病毒。根据S片段的核苷酸序列同源性分析，CJ193与Aa2499核苷酸序列的同源性最高(94．3％)，而与Ap61、Ap63的同源性最小(83．3％，82．9％)。由全S片段构建的HTN型汉坦病毒的系统发生树表明CJ193与Aa2499等俄罗斯黑线姬鼠携带的HV的亲缘关系最近，其次为中国的HTN型病毒，然后才是Ap61、Ap63等俄罗斯大林姬鼠携带的HV。结论从我国吉林省大林姬鼠分离到的CJ193株是HTN型汉坦病毒的新亚型。     

我国健康成人血清中抗成人腹泻轮状病毒抗体调查

本文报告以未知血清作为第一抗体直接包被微量凹井板,用双抗体夹心ELISA法检测抗成人腹泻轮状病毒抗体,得到成功的结果。此法应用于检测从中国一些省市收集的1,380份健康成人血清中抗成人腹泻轮状病毒抗体,其中141份阳性,总阳性率为10.2%,各地的感染率不同。对25份阳性血清进行了阻断试验,结果是在阻断后的P/N比值全部低于阻断前的P/N比值。这25份阳性血清中有17份来自河北省迁安县一带农村,该地区在两年前曾发生成人流行性腹泻。西藏50份血清均阴性,海南岛50份血清中仅1份阳性。     

中国肾综合征出血热疫苗免疫效果评价和免疫策略研究

１９９３～１９９４年对中国试生产的肾综合征出血热沙鼠肾细胞Ⅰ型灭活疫苗（上海生研所和天元公司），乳鼠脑纯化Ⅰ型灭活疫苗（兰州生研所）和地鼠肾细胞Ⅱ型灭活疫苗（长春生研所），在疫区现场进行了人群接种、安全性观察和血清学、流行病学近期效果考核。结果：３种疫苗安全性皆较好，上海沙鼠苗、天元沙鼠苗、鼠脑苗和地鼠苗中强反应率分别为０．５６％、０．０３％、３．２６％、１．５７％。３种疫苗３针全程免疫后１４天，中和抗体阳转率地鼠苗为７８．７８％，上海沙鼠苗为５８．６４％，天元沙鼠苗为７０．００％，鼠脑苗为５１．０９％；荧光抗体阳转率地鼠苗为８２．６４％，上海沙鼠苗为９３．６９％，天元沙鼠苗为８３．３３％，鼠脑苗为８４．２７％。３种疫苗近期流行病学防病效果均较好，保护率地鼠苗为９７．６３％，上海沙鼠苗为９４．０７％，天元沙鼠苗为１００．００％，鼠脑苗为９６．００％。     

宁夏汉坦病毒的分离和鉴定

目的从宁夏肾综合征出血热（HFRS）新疫区黑线姬鼠肺中分离汉坦病毒并鉴定其型别。方法采用幼龄长爪沙鼠接种和Vero－E6细胞培养的方法分离病毒,经单克隆抗体间接免疫荧光试验,属特异性PCR结合限制性内切酶分析和型特异性PCR鉴定病毒型别。结果成功分离两株汉坦病毒,两株病毒均为HTN型病毒。结论首次在宁夏疫区成功分离汉坦病毒并鉴定其属于HTN型病毒,为进一步研究和控制该地区HFRS提供了科学依据。     

应用地理信息系统分析中国肾综合征出血热的空间分布

目的　利用地理信息系统 (GIS)技术分析中国大陆肾综合征出血热 (HFRS)的空间区域分布 ,建立HFRS危险区域分布图。方法　收集中国 41个HFRS监测点 1 995～ 1 998年的人群发病资料建立数据库 ,以中国省级、县级、一级河流数字地图为背景 ,在ArcGIS软件的支持下 ,与建立的数据库关联并对监测点人群发病资料进行反距离权重插值分析 ;收集 1 998年 6月SPOT4卫星覆盖东南亚地区的植被影像 ,逐一提取出各监测点监测区域的归一化植被指数 (NDVI) ,与 1 995～ 1 998年HFRS监测点人群平均发病率进行相关分析 ;根据不同流行强度监测区域的NDVI值 ,对遥感影像使用不同的颜色进行密度分割。结果　HFRS监测点人群发病资料的空间分析预测模型显示 ,中国HFRS主要分布于黑龙江流域、黄河中下游地区、长江中下游地区及京杭大运河 淮河流域地区 ,与1 995～ 1 998年全国各县HFRS平均发病率分布图进行比较 ,发现两者基本一致 ;相关分析显示HFRS发病率与NDVI之间呈现正相关 (r=0 .41 7,P <0 .0 1 ) ,根据各监测点NDVI的差异建立了中国HFRS危险区域分布图。结论　根据监测点数据采用GIS技术建立的预测模型对预测全国HFRS的分布情况有重要意义     

福建北部山区肾综合征出血热血清流行病学调查

用IFAT检查周宁县657只鼠肺,城镇室内褐家鼠的HFRS病毒抗原的阳性率为4.72%,野外黑线姬鼠宁波亚种为5.95%。褐家鼠有外窜。城镇病例主要传染源为褐家鼠,多属于褐家鼠型出血热,农村或野外感染的病例主要传染源为黑线姬鼠,主要属于黑线姬鼠型出血热。褐家鼠型出血热症状比黑线姬鼠型出血热的症状轻。黑线姬鼠流行高峰之后出现人间流行高峰。福建北部山区是我国黑线姬鼠型出血热自然疫源地带的东南边缘部分,自然疫源地多属于山区小盆地型。周宁县除野外有黑线姬鼠型自然疫源地外,室内尚有褐家鼠型疫源地。恢复期病人血清检查21份,阳性率为90.48%,抗体维持较久,经9年仍有查出者,健康人群检查172份未发现隐性感染。