一种银离子过氧化氢手消毒液消毒性能的研究

摘要〓目的〓研究一种银离子过氧化氢手消毒液的消毒性能及安全性。方法〓采用悬液定量杀菌试验和动物试验方法,对该消毒液杀灭微生物的效果和安全性进行观察。结果〓该消毒液中银离子含量为100 mg/L，过氧化氢含量为质量分数0.752%。以该消毒液原液作用0.5 min,对悬液内金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭对数值均＞5.00,对悬液内白色念珠菌的杀灭对数值＞4.00,对流感病毒、副流感病毒及新城疫病毒有明显的灭活作用。以该消毒液原液作擦拭消毒作用1 min,对手上自然菌的杀灭对数值＞1.00。该消毒液小鼠急性经口毒性试验LD50＞5 000 mg/(kg·bw)|其原液对家兔完整皮肤刺激指数为0,对小鼠骨髓嗜多染红细胞无致微核作用。结论〓该手消毒液能快速杀灭细菌繁殖体、真菌和病毒,属于无毒级物质。     

人巨细胞病毒UL123基因全长及其外显子4的克隆与表达

【目的】克隆人巨细胞病毒（HCMV）UL123基因cDNA全长（iel）及其外显子4（iel-exon4），构建原核表达重组质粒，诱导立即早期蛋白1（IE1）及其C-端86-491氨基酸（IE1-C86-491）表达，并鉴定表达产物。【方法】分别用RT-PCR和PCR法将iel和iel-exon 4从感染了HCMV的人胚肺成纤维细胞（HEL）中扩增出来，再分别克隆入原核表达载体pTWIN1上intein2的N端，转化大肠杆菌，经PCR、限制性酶切和测序鉴定阳性重组子，在低温和低IPTG浓度下诱导重组子表达可溶性重组融合蛋白rIE1／intein2和rIE1-C86-491／intein2，用SDS-PAGE和Western Blotting对表达产物进行鉴定。【结果】经PCR、限制性酶切和测序鉴定重组质粒pTWIN1／iel和pTWIN1／iel-exon4构建成功，sDS-PAGE和Western Blotting分析表明融合蛋白在大肠杆菌中表达。【结论】成功克隆并表达了iel和iel-exon4。     

应用PCR和ELISA法研究新生儿巨细胞病毒感染

人类巨细胞病毒 (ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＶ)是先天性病毒感染的重要病因之一 ,在人群中感染极为普遍。发达国家孕妇ＨＣＭＶ感染率在 5 5 %以上[1,2 ] ,我国多数学者报道孕妇ＨＣＭＶ感染率为 90 %以上[3 ,4 ] 。孕妇的原发性感染或复发性活动性感染均可能导致胎儿的先天性感染 ,造成死胎、流产、小头畸形、脑钙化、耳聋、神经系统发育异常等病理损害 ,对人口素质的提高构成严重的威胁。本研究采用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术检测脐血、新生儿尿液中的ＨＣＭＶ ＤＮＡ ,用于诊断ＨＣＭＶ感染 ,与血清免疫学方法 (ＥＬＩＳＡ)检测ＨＣＭＶ ＩｇＭ作比较。1　材料与方法     

疱疹病毒与宿主细胞骨架间的相互作用 FREE

疱疹病毒依赖于宿主细胞骨架有效地进入细胞、复制以及从细胞中释放出来。为促使这一过程顺利完成，在细胞质和细胞核中，病毒蛋白必须与宿主细胞分子马达相互作用，以便使病毒在感染细胞中正确定位。本文就疱疹病毒如何利用宿主细胞骨架、相关的分子马达和重塑蛋白将复杂的病毒结构高效地转入或转出细胞进行简要综述。     

日本血吸虫雌虫抗原免疫血清筛选成虫cDNA文库

目的筛选日本血吸虫(Schistosoma ja ponicum，Sj)新的疫苗候选基因或雌虫性别特异性基因。方法用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清，对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选，将阳性克隆的插入片段进行PCR扩增，采用Sanger双脱氧核苷酸末端终止法对阳性克隆插入子进行测序，与GeneBank中的已知序列进行比对分析。结果共获得26个阳性克隆，其PCR产物大小约0．5～3kb。在进行测序的8个阳性克隆中发现了GeneBank未报道的Sj肌球蛋白的部分基因序列(GeneBank登录号为AY322148)和1个新基因(命名为Sj-F1，GeneBank登录号为AY261995)。Sj-F1编码的蛋白理论分子质量为13．45ku，等电点为6．29，富含α螺旋和随机卷曲，含多个蛋白激酶磷酸化位点，1个酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点和1个豆蔻酸位点。结论Sj雌虫免疫血清可识别Sj特异性抗原分子，该抗原基因是否为雌虫性别特异性基因及其作为日本血吸虫病疫苗候选基因的价值，有待进一步研究。     

表达mIFN-γ的重组链球菌的构建及其对重组Sj-F1链球菌疫苗免疫调节作用研究

目的 构建表达mIFN-γ的重组链球菌,并与重组日本血吸虫Sj-F1链球菌疫苗进行联合免疫,观察IFN-γ对重组日本血吸虫Sj-F1链球菌疫苗的免疫调节效应.方法 用PCR法扩增mIFN-γ基因,亚克隆至链球菌重组质粒pGMB1,经PCR、限制性酶切和测序鉴定筛选阳性重组子.将阳性重组质粒转化链球菌载体,经抗生素抗性转化及染色体PCR鉴定筛选阳性重组链球菌.用Streak blot和Westem blot分析鉴定重组链球菌的表达情况.鉴定后的重组mIFN-γ链球菌与重组Sj-F1链球菌疫苗联合应用,经滴鼻接种免疫昆明小鼠,观察诱导产生的减虫和减卵效果.结果 成功构建了分泌mIFN-γ重组链球菌.Streak blot和Westem blot分析表明重组链球菌能分泌mIFN-γ并可稳定遗传.免疫保护性实验表明,重组mIFN-γ链球菌与重组日本血吸虫Sj-F1链球菌疫苗联合免疫,减虫率和减卵率分别为31.56％和47.48％,与单用重组Sj-F1链球菌疫苗比较减虫率和减卵率均增加.结论 结果表明,重组mIFN-γ链球菌能增强重组Sj-F1链球菌疫苗抗日本血吸虫感染的保护力.     

人类巨细胞病毒感染对血管平滑肌细胞脂代谢相关基因表达的影响

目的研究人类巨细胞病毒感染对体外培养血管平滑肌细胞脂代谢相关基因表达的影响,探讨该病毒致动脉粥样硬化(As)的机制。方法以1 MOI人类巨细胞病毒感染体外培养的血管平滑肌细胞,利用基因表达谱芯片技术检测细胞脂代谢相关基因的表达变化。结果人类巨细胞病毒感染血管平滑肌细胞后,细胞内与脂代谢有关的基因表达出现明显的异常,其中表达上调的基因主要有低密度脂蛋白受体相关蛋白10、11、12、极低密度脂蛋白受体、B型清道夫受体、HMG-CoA合成酶、HMG-CoA还原酶、酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶及脂肪酶合成酶等基因;表达下调的主要有载脂蛋白A1、载脂蛋白M和载脂蛋白H等基因。结论人类巨细胞病毒感染可能通过改变血管平滑肌细胞脂代谢相关基因的表达而参与As的发病过程。     

HCMV感染对人神经胶质瘤U251细胞p38MAPK活性的影响

人巨细胞病毒(HCMV)在人群中的感染非常普遍。随着器官移植的广泛开展、艾滋病的传播以及耐药病毒株的出现，对HCMV致病、致畸机制的研究越来越受到重视。MAPK是细胞内的一类丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，它介导的信号转导通路是生物信号引起核反应的重要通路，参与细胞生长、分化、凋亡等多种生理过程，并在细胞恶性转化等病理过程     

人巨细胞病毒立即早期蛋白功能的研究进展

人巨细胞病毒基因表达分为立即早期、早期和晚期三个时相。立即早期基因的表达在病毒基因和宿主细胞基因的表达和调控方面有重要作用,并能够影响宿主细胞周期进程。本文对立即早期蛋白调节病毒复制以及影响细胞周期进程方面的功能作一综述。     

染色质免疫沉淀技术在人巨细胞病毒即刻早期蛋白研究中的应用

染色质免疫沉淀(ChIP)技术是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的最好方法,该技术不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。在研究人巨细胞病毒及其他病毒的基因调控和病毒蛋白与宿主细胞DNA相互作用方面,该技术亦有很好的应用前景。利用该技术研究表明,人巨细胞病毒IE1-72和IE2-86蛋白对组蛋白乙酰化的影响可能是调控病毒转录的重要机制之一。