补阳还五汤上调miR-199a-5p表达促进脑缺血大鼠神经发生和血管生成

目的: 探讨补阳还五汤促进脑缺血大鼠神经发生和血管生成的机制。方法: 实验大鼠随机分为手术对照组、模型对照组、补阳还五汤组、拮抗剂组、拮抗剂对照组,各14只。除手术对照组外,其余组采用线栓法诱导大脑中动脉阻塞模型,缺血90 min后再灌注14 d;补阳还五汤组、拮抗剂组和拮抗剂对照组在缺血后24 h灌胃补阳还五汤（13 g/kg）;所有大鼠腹腔注射5-溴脱氧尿苷（BrdU,50 mg/kg）,1次/d,连续14 d;缺血后第5天,拮抗剂组和拮抗剂对照组分别于侧脑室注射miR-199a-5p拮抗剂和miR-199a-5p拮抗剂对照10 nmol。采用改良神经损伤严重程度评分（mNSS）和角试验评价神经功能缺损,甲苯胺蓝染色检测脑梗死体积,免疫荧光双标记法检测脑缺血大鼠神经发生和血管生成,实时逆转录PCR检测miR-199a-5p表达,蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子（VEGF）和脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白表达。结果: 补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复（P < 0.05或P < 0.01）,减小梗死体积（P < 0.05）,增加BrdU⁺/DCX⁺、BrdU⁺/NeuN⁺、BrdU⁺/vWF⁺细胞数（均P < 0.01）,上调miR-199a-5p表达（P < 0.01）,促进VEGF和BDNF蛋白表达（均P < 0.05）;侧脑室注射miR-199a-5p拮抗剂后则逆转上述效应。结论: 补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经发生和血管生成,其机制可能与上调miR-199a-5p增加VEGF和BDNF表达有关。     

低剂量鱼藤酮诱导BV2细胞IL-6产物及montelukast的作用

目的：在体外帕金森病（Parkinson's disease,PD）模型观察低剂量鱼藤酮诱导的BV2小胶质细胞白介素6（IL-6）生成及montelukast的作用。方法以PD诱导因子鱼藤酮处理小鼠小胶质细胞系BV2细胞。 Western blot方法检测BV2细胞前炎症细胞因子 IL-6蛋白表达, ELISA 方法检测 BV2细胞 IL-6释放。观察 CysLT1R 拮抗剂montelukast对鱼藤酮诱导的小胶质细胞IL-6的影响。结果低剂量鱼藤酮（0．3～3 nM）浓度依赖性地增加IL-6蛋白表达;以鱼藤酮（3 nM）处理细胞1～24h,时间依赖性的诱导IL-6释放增加。 CysLT1R拮抗剂montelukast降低鱼藤酮增高的BV2细胞IL-6水平。结论低剂量鱼藤酮诱导小胶质细胞前炎症细胞因子IL-6增加,montelukast抑制鱼藤酮诱导BV2细胞效应。     

黄芪总皂苷对体外培养大鼠神经干细胞增殖的影响

目的:体外研究不同浓度黄芪总皂苷(TSA)对神经干细胞(NSCs)增殖的影响。方法:体外分离培养大鼠胚胎NSCs,nestin免疫荧光标记鉴定NSCs;不同浓度TSA(0.1、0.2、0.5、1、2、5和10μg/ml)处理NSCs 24、48和72h,采用MTT法、Brd U/Nestin免疫荧光双标检测细胞增殖情况。结果:体外分离培养的神经干细胞nestin染色为阳性;MTT实验结果显示,与空白对照组比较,TSA呈剂量和时间依赖性促进NSCs增殖,其中1、2μg/ml TSA处理48h效果最显著(P0.01);Brd U/Nestin免疫荧光双标结果显示,与空白对照组比较,TSA 1、2μg/ml处理48h后,Brd U阳性细胞显著增多(P0.01)。结论:TSA促进体外培养的NSCs增殖,且1、2μg/ml处理48h效果最好。