植入后全胚胎培养的培养基pH值改变对大鼠胚胎生长发育的影响

目的　探讨植入后全胚胎培养培养基最适pH值。方法　分离 9.5天龄Wistar大鼠胚胎 ,分别在实验组 (即不同pH :5 .5 ,6 .0 ,6 .5 ,7.0 ,7.5 ,8.0 ,8.5 ,9.0 )和对照组 (pH为 8.2 )的培养基 (1 0 0 %大鼠即刻离心血清 )中体外旋转培养4 8小时 ,观察pH值的改变对胚胎生长发育的影响。结果　与对照组比较 ,当培养基pH为 6 .5、6 .0和 9.0时培养胚胎的生长发育明显受到影响 (P <0 .0 5 ) ,胚胎畸形率和死亡率增高 (P <0 .0 5 )。当培养基pH为 5 .5时 ,培养胚胎死亡率达1 0 0 %。结论　全胚胎培养培养基pH条件改变 (过低或过高 )能够影响培养胚胎的生长发育。植入后全胚胎培养培养基最适pH值为 7.5～ 8.2。     

同型半胱氨酸对大鼠器官形成早期卵黄囊内吞功能的影响

应用显微解剖和移植术 ,初步建立了 9 5日龄大鼠卵黄囊 (VYS)胎盘体外培养模型 ,并观察了同型半胱氨酸 (HCY)对VYS内吞功能及生长发育的影响。结果显示 :HCY可抑制VYS的内吞功能 ,实验组与对照组相比内吞指数明显下降 (P <0 0 1) ;HCY还可抑制VYS生长及其血管形成 ,实验组的VYS直径明显小于对照组 (P <0 0 1)。结果提示 :VYS对胎盘内吞功能的损伤及对其血管形成分化的抑制作用 ,可能是HCY主要致畸机理之一。     

同型半胱氨酸体内外诱导鼠胚胎心肌细胞凋亡的研究

目的 探讨同型半胱氨酸(HCY)是否能诱导啮齿类动物胚胎心肌细胞凋亡及剂量与凋亡的关系。 方法 应用大鼠胚胎心肌细胞体外培养及小鼠体内致畸实验,加入4-20 mmol/L的HCY,经荧光显微镜及透射电镜观察细胞凋亡情况。 结果 体外心肌细胞培养中,心肌细胞凋亡的比例随着HCY剂量的增加而增加。培养12 h出现凋亡,14 h达到高峰。小鼠体内致畸实验,给予孕鼠HCY 0.74 mmol/kg,胚胎心肌和脑组织中凋亡细胞明显可见。 结论HCY可以诱导胚胎心肌细胞凋亡,可能是HCY导致胚胎发育异常的机制之一。     

烹调油烟冷凝物对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 观察烹调油烟冷凝物(Cooking Oil Fume Condensates，COFC)的体外发育毒性并探讨其可能的毒性作用机制。方法采用体外全胚胎培养模型，将植入后8．5d龄昆明种小鼠胚胎在大鼠即刻离心血清培养基中培养48h(COFC染毒浓度分别为0、20、40、80、160、320mg／L)，观察COFC对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果COFC在≥80ms／L以上剂量时能抑制胚胎生长发育和形态分化，诱发卵黄囊生长和血管分化不良，发育异常率增高；高浓度组能诱发多种畸形，主要为神经系统，心脏、肢芽等器官系统畸形。结论体外实验条件下，COFC对小鼠胚胎具有一定的胚胎毒性和致畸性。     

转HCY-2基因对鸡胚神经管发育的影响

为探讨新基因ＨＣＹ－２与神经管畸形表型的关系及明确其是否具有基因毒性作用，应用脂质体介导基因转移技术将构建的含有全长ＨＣＹ－２ ｃＤＮＡ（２０１４ｂｐ）的真核表达载体转入新生鸡受精卵，培养３．５天后观察其对神经管闭合时期胚胎的整体分子生物学效应，利用Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹和免疫组化等技术研究在整体环境下ＨＣＹ－２蛋白的表达和分布情况。结果显示转ＨＣＹ－２基因（５～２０μｇ）可诱导早期鸡胚发生神经管畸变，而空载质粒组胚胎发育正常；Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹和免疫组化分析发现有ＨＣＹ－２蛋白大量表达，主要分布于胚脑组织中，显著高于空载质粒对照组；透射电镜观察发现转ＨＣＹ－２基因后，胚脑细胞超微结构受损和出现呈弥散分布的凋亡细胞。结论是ＨＣＹ－２基因对神经管闭合时期的胚胎神经系统发育具有明显基因毒性作用，其编码蛋白在神经管畸形发生过程中可能具有重要意义